N端加flag标签增加P21Cip1／WAF1蛋白质稳定性
【摘要】背景与目的: 已知细胞分裂周期抑制因子P21 通过蛋白酶体通路降解,其氨基端的泛素化可能参与了这一过程。Flag 为一蛋白标签,常用于标记重组蛋白质,以便对靶蛋白进行生物学功能分析。本文旨在研究N- 端加flag 对P21 蛋白质稳定性的影响。材料与方法: 建立稳定表达外源flag-p21 蛋白质的NIH3T3 细胞株,应用蛋白印迹法(WB) 检测NIH3T3 细胞表达的flag-p21 ,并比较其与内源P21 蛋白质半衰期的差异;确定阻断蛋白酶体水解通路对其降解过程的影响。结果: NIH3T3 细胞表达的内源P21 蛋白质半衰期约30 min , 而同一细胞表达的flag-p21 融合蛋白半衰期则明显延长; 用抑制剂MG-132 阻断蛋白酶体水解通路后, P21 蛋白质的量明显增加,但同一细胞内表达的flag-p21 量却无明显改变。结论: N- 端加flag 标签可增加P21 蛋白质的稳定性。在对P21 蛋白质的生物......阅读全文
蛋白酶体的结构和分布
蛋白酶体广泛分布于细胞质和细胞核中，26s蛋白酶体是一种分子量为2000的多亚基复合物，约有50种蛋白质亚基组成。具有多种蛋白水解酶活性，并且具有泛素依赖性。
泛素蛋白酶体途径的简介
泛素蛋白酶体途径（ubiquitin proteasome pathway）是生物化学术语，介导的蛋白降解是机体调节细胞内蛋白水平与功能的一个重要机制。负责执行这个调控过程的组成成分包括泛素及其启动酶系统和蛋白酶体系统。泛素启动酶系统负责活化泛素，并将其结合到待降解的蛋白上，形成靶蛋白多聚泛素链
关于蛋白酶体的基本介绍
蛋白酶体广泛分布于细胞质和细胞核中，26s蛋白酶体是一种分子量为2000的多亚基复合物，约有50种蛋白质亚基组成。具有多种蛋白水解酶活性，并且具有泛素依赖性。 蛋白质是生命功能的体现者，而蛋白酶体直接影响某些蛋白质的更新，其中包括错误折叠蛋白和许多在生命活动中起重要作用的蛋白质，如p53、cy
泛素化蛋白快速富集纯化黑科技TUBEs
泛素化是一种常见的调节蛋白的稳定性和功能的翻译后修饰。蛋白的泛素化需要3种酶的参与，分别是泛素活化酶（ubiquitin-activating enzyme，E1）、泛素偶联酶（ubiquitin conjugation enzyme，E2）和泛素连接酶（ubiquitin
蛋白降解疗法治疗阿兹海默和帕金森病
今日，艾伯维（AbbVie）和Mission Therapeutics共同宣布，双方达成研发合作协议，将利用Mission公司的特异性靶向去泛素化酶（DUBs）治疗阿兹海默病（AD）和帕金森病（PD）。DUBs是调节人体内蛋白降解通路的重要蛋白酶，艾伯维和Mission公司力图靶向DUBs来降解
Science－|－抗逆突破！泛素化介导叶绿体蛋白降解新途径
为了应对全球气候变化带来的频繁逆境胁迫，全面而清晰地了解植物面对胁迫反应的不同调控机制具有重要的意义。在植物抗逆研究中，研究发现非生物胁迫会抑制植物的光合作用，影响叶绿体的稳定性并诱导叶绿体的降解，叶绿体降解进而会引发植物早衰，最终影响作物产量。 叶绿体是为植物提供能量来源的重要细胞器。
Science深度：癌症靶向治疗新思路“降解垃圾蛋白”
在目前的癌症靶向药物里，占主导地位的是针对致癌蛋白的小分子或单抗抑制剂。不过，随着时间的推移，许多癌细胞会对这类药物产生抗药性，比如说产生新的突变，或者激活其它致癌蛋白。过去15年来，一些研究人员在寻找其它的抗癌途径时，将目标瞄准了细胞内的“清洁工”——泛素-蛋白酶体系统。泛素-蛋白酶体系统负责
我国揭示蛋白酶体在泛素链诱导下的变构及底物识别机制
近日，国际学术期刊Molecular Cell 在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心（上海）丛尧研究组的最新研究成果“Structural snapshots of 26S proteasome reveal tetraubiquitin-induced confor
科学家发现免疫系统“刹车”分子的调控新机制
中科院生物化学与细胞生物学研究所许琛琦研究团队首次揭示了人体免疫系统“刹车”分子PD-1的降解机制，以及该机制在肿瘤免疫反应中的功能。近日，《自然》杂志在线发表了这项成果。 T细胞作为人体免疫系统的一部分，是机体健康的重要“守护者”，可以及时识别并清除体内突变细胞，防止肿瘤的发生。不过，部分肿
补平标签实验
试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 BSA LoTE cDNA标签 实验步骤
补平标签实验
是对差异显示技术（DD）实验和基因表达系列分析实验中实验方案A和B的补充实验 现代神经科学研究技术 作者：U.Windhorst & H. Johansson 翻译：赵志奇 陈军 实验步骤 实验方案 A 1.向两个含有释放的 cDNA 标签的试管中加入： 2.在 37°C
补平标签实验
试剂、试剂盒 溶液与缓冲液BSALoTEcDNA标签实验步骤 实验方案 A1.向两个含有释放的 cDNA 标签的试管中加入：2.在 37°C 下孵育 30 min。3.加入 150ul LoTE 扩容到 200ul。4.如上所述，用等体积的 PCI 抽提，乙醇沉淀（实验方案 A，第 2 步)。5.将
上海生科院在生长素作用机制研究中取得进展
4月25日，《自然·通讯》（Nature Communications）杂志在线发表了中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所薛红卫研究组题为Arabidopsis PROTEASOME REGULATOR1 is required for auxin-mediated suppressi
关于单泛素化修饰的基本介绍
单泛素化修饰是一种调节信号可以引起靶蛋白的活性、定位以及蛋白质结构的改变从而对蛋白质的胞吞途径、膜泡的出芽、组蛋白的修饰、基因的转录以及蛋白质核内的定位进行调节。单独的泛素本身并没有任何生物功能，它只是一种分子标记蛋白，发挥作用必须在ATP提供能量的前提下依靠泛素途径的相关酶类及蛋白酶体。Gua
蛋白酶体在泛素链诱导下的变构及底物识别机制
泛素-蛋白酶体系统（ubiquitin-proteasome system）参与调控真核细胞内众多的生物进程，包括蛋白质质量控制、细胞周期维持、基因表达调控、应激反应等【1,2】。其功能的异常与癌症、神经退行性疾病、自身免疫病等人类重大疾病密切相关【3】。26S蛋白酶体是一种依赖于ATP的蛋白酶
蛋白酶体的基本功能
蛋白质是生命功能的体现者，而蛋白酶体直接影响某些蛋白质的更新，其中包括错误折叠蛋白和许多在生命活动中起重要作用的蛋白质，如p53、cyclin 等，显然这些蛋白质数量的调节会直接影响相关的生物学功能。蛋白酶体的功能涉及细胞周期控制、细胞凋亡、应激反应、DNA修复、基因转录、抗原提呈、信号转导、癌症、
蛋白酶体的基本功能
蛋白质是生命功能的体现者，而蛋白酶体直接影响某些蛋白质的更新，其中包括错误折叠蛋白和许多在生命活动中起重要作用的蛋白质，如p53、cyclin 等，显然这些蛋白质数量的调节会直接影响相关的生物学功能。蛋白酶体的功能涉及细胞周期控制、细胞凋亡、应激反应、DNA修复、基因转录、抗原提呈、信号转导、癌症、
蛋白酶体的基本功能
蛋白质是生命功能的体现者，而蛋白酶体直接影响某些蛋白质的更新，其中包括错误折叠蛋白和许多在生命活动中起重要作用的蛋白质，如p53、cyclin 等，显然这些蛋白质数量的调节会直接影响相关的生物学功能。蛋白酶体的功能涉及细胞周期控制、细胞凋亡、应激反应、DNA修复、基因转录、抗原提呈、信号转导、癌症、
蛋白酶体的基本功能
蛋白质是生命功能的体现者，而蛋白酶体直接影响某些蛋白质的更新，其中包括错误折叠蛋白和许多在生命活动中起重要作用的蛋白质，如p53、cyclin 等，显然这些蛋白质数量的调节会直接影响相关的生物学功能。蛋白酶体的功能涉及细胞周期控制、细胞凋亡、应激反应、DNA修复、基因转录、抗原提呈、信号转导、癌症、
降解的概念
降解，一般指有机化合物分子中的碳原子数目减少，分子量降低。对于降解，不同的学者持有有不同的观点，有一种观点认为降解物最终要被分解成二氧化碳和水才能称为降解。
降解的概念
降解，一般指有机化合物分子中的碳原子数目减少，分子量降低。对于降解，不同的学者持有有不同的观点，有一种观点认为降解物最终要被分解成二氧化碳和水才能称为降解。
Simth降解反应
Smith降解反应是冷的条件下脱去糖（分解掉）的反应，适用于难水解的苷获得苷元，不适用于苷元自身存在反式邻二醇结构的化合物。并且可以通过测定分解糖产生的小分子化合物来推断糖的种类。其步骤：准备物品：容量瓶（25ml * 2，50ml * 2；茶色为好）、锡纸、碱式滴定管、定量滤纸
BIORAD－采用－Profinity－eXactTM融合标签表达系统纯化无标签...
BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化无标签的重组蛋白亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性，就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合，从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方法不同之处在于
GST标签抗体GST标签与IFIP等多种应用
近年来在原核表达体系中，谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍，它的来源是日本血吸虫的25kDa大小的GST蛋白。GST标签系统具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便，以及利于GST抗体制备等特点和优势。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可从细菌裂解液中提取，在不变性的条件下通过亲和层析得到。G
RTK助力可降解塑料材料降解性能检测
今年9月，我国发改委和生态环境部联合发布了《“十四五”塑料污染治理行动方案》（以下简称《方案》）。方案对于科学稳妥推广塑料替代产品做了进一步部署。生物降解塑料是塑料替代材料中的一种，是指在土壤、海水、淡水、堆肥等环境条件下可被自然界存在的微生物完全降解变成二氧化碳或/和甲烷（CH4）、水等的一类塑料
Nat－Mat：生物降解电池可在体内降解
生物降解电池可通过药物传输到体内，在使用结束后，还可在体内降解，这在医学移植和手术医疗方面的确是一个重要发现。 生物降解电池不仅能够促进植入设备在体内正常的运转，同时也可将设备送达体内至目标治疗区域，它的一个好处就是在使用完后，可在体内降解，并被人体吸收。 美国麻省一
PSMB1基因突变因子与药物介绍
蛋白酶体亚基β1型也称为20S蛋白酶体亚基β-6（基于系统命名法）是人类中由PSMB1基因编码的蛋白质。 该蛋白质是17种必需亚基之一（α亚基1-7，组成型β亚基1-7，以及可诱导的亚基，包括β1i，β2i，β5i），它们有助于20S蛋白酶体复合物的完全组装。 特别地，蛋白酶体亚基β1型与其他β亚基
PSMB1基因编码的功能和结构描述
蛋白酶体亚基β1型也称为20S蛋白酶体亚基β-6（基于系统命名法）是人类中由PSMB1基因编码的蛋白质。 该蛋白质是17种必需亚基之一（α亚基1-7，组成型β亚基1-7，以及可诱导的亚基，包括β1i，β2i，β5i），它们有助于20S蛋白酶体复合物的完全组装。 特别地，蛋白酶体亚基β1型与其他β亚基
PSMB1基因的结构特点和主要作用
蛋白酶体亚基β1型也称为20S蛋白酶体亚基β-6（基于系统命名法）是人类中由PSMB1基因编码的蛋白质。 该蛋白质是17种必需亚基之一（α亚基1-7，组成型β亚基1-7，以及可诱导的亚基，包括β1i，β2i，β5i），它们有助于20S蛋白酶体复合物的完全组装。 特别地，蛋白酶体亚基β1型与其他β亚基
遗传发育所发现植物26S蛋白酶体组装参与盐胁迫应答机制
26S蛋白酶体系统通过有效降解许多关键蛋白因子而调控植物的生长发育和对环境胁迫的响应。26蛋白酶体系统由20S蛋白酶体和19S蛋白酶体两个亚复合物组成。20S蛋白酶体由多个α亚基和β亚基按照α1-7/β1-7/β1-7/α1-7方式组装成一个中空的圆柱体结构。其亚基的突变与人类许多疾病的产生密切