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补平标签实验

是对差异显示技术(DD)实验和基因表达系列分析实验中实验方案A和B的补充实验现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. Johansson 翻译:赵志奇 陈军实验步骤实验方案 A1.向两个含有释放的 cDNA 标签的试管中加入:2.在 37°C 下孵育 30 min。3.加入 150ul LoTE 扩容到 200ul。4.如上所述,用等体积的 PCI 抽提,乙醇沉淀(实验方案 A,第 2 步)。5.将沉淀溶解于 4ul 的 LoTE 中。实验方案 B1.向沉淀的 cDNA 标签中加入:2.在 37℃ 下孵育 30 min。3.加入 170ul 的 LoTE 扩容到 2004。4.如上所述,用等体积的 PCI 抽提,乙醇沉淀(实验方案 A,第 2 步)。5.将沉淀溶解于 4ul 的 LoTE 中。......阅读全文

连接为双标签实验

            试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 LoTE cDNA标签 实验步骤

连接为双标签实验

是对差异显示技术(DD)实验和基因表达系列分析实验中实验方案A和B的补充实验现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. Johansson  翻译:赵志奇 陈军试剂、试剂盒溶液与缓冲液LoTEcDNA标签实验步骤实验方案 A1.此实验方案中,两部

基因表达轮廓(gene expressed profile)技术-2

经过这轮RDA过程,Tester中的目的DNA将得到第一次富集。将第一轮产物更换新接头,进行第二轮RDA过程,目的DNA可得到进一步的富集。该技术假阳性很低。但仍不能解决个体mRNA在丰度上存在巨大差异的问题,当靶序列浓度较低时,其富集受抑制。3:抑制消减杂交(suppression subtrac

CFDA:关于《胎儿染色体非整倍体检测试剂盒指导原则》

关于《胎儿染色体非整倍体(T21、T18、T13)检测试剂盒(高通量测序法)指导原则》(征求意见稿)公开征求意见的通知  各有关单位:  根据我中心2016年度医疗器械技术审查指导原则编写的任务安排,我中心组织编写了《胎儿染色体非整倍体(T21、T18、T13)检测试剂盒(高通量测序法)指导原则》(

cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验

实验步骤 ##一、 cDNA 宏阵列的样品制备培养基: I : 2 (V7 V ) Gamborg B5 培 养 基(GibcoBRL, Rockville, MD), I : 1000(V /V ) Hyponex肥 料(Hypon

cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验(二)

11.用 mRNA 纯 化 试 剂 盒(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ) 将 Poly.(A )+ RNA从总R N A 中分离出来(见注释5)。####(2) c D N A 文 库 的 构 建1.取1. 5 〜7. 5 μg poly (A )<

cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验(一)

除 cDNA 微阵列外,基于尼龙膜支持物的 cDNA 宏阵列方法是又一被广泛应用的大规模基因表达数据的收集方法。从新基因的发现到基因表达谱的分析, cDNA 宏阵列被应用于分子生物学研究领域的各个方面。尽 管 cDNA 宏阵列的点阵密度低于微阵列,但由于应用灵敏度较高的同位素标记的 cDNA 探针,

利用λ噬菌体文库筛选 DNA 结合蛋白实验

            试剂、试剂盒 ATP 结合缓冲液 变性溶液 二硫苏糖醇 EDTA 乙醇激酶 连接酶

利用λ噬菌体文库筛选 DNA 结合蛋白实验

可利用合成双链寡核苷酸筛选构建于λ噬菌体的 cDNA 表达文库,以鉴定与特异 DNA 结合蛋白质相对应的克隆(Singhetal.1988,Vinsonetal.1988)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒ATP结合缓冲液变性溶

利用λ噬菌体文库筛选 DNA 结合蛋白实验

试剂、试剂盒 ATP结合缓冲液变性溶液二硫苏糖醇EDTA乙醇激酶 连接酶缓冲液酚氯仿筛选缓冲液SDS醋酸钠TET4 噬菌体 DNA 连接酶T4 噬菌体多核苷酸激酶合成的寡核苷酸[a-32P]ATP非变性聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 烤盘结晶皿平头镊子装有防水黑墨水注射器硝酸纤维素滤膜Sephadex G

化学老师的法宝——化学顺口溜

01   为了记住元素周期表的结构,有这样一个顺口溜:   十八纵行七横行   一一四种表中装   七主七副零与八   三短三长一不全   02   在元素周期律中,元素主要化合价的奇偶性与其序数的奇偶性的关系:   "价奇序奇,价偶序偶"  

基因表达轮廓(gene expressed profile)技术-1

基因表达谱或基因表达轮廓(gene expressed profile)技术就是利用mRNA提取、cDNA合成、酶切、连接、PCR及分子杂交等分子生物学基础操作技术,将某一生物材料在某一特定阶段表达的基因全部展示出来,通过测序及与数据库比较或通过目标和对照样品中所表达基因的比较,可以找出特异表达

石蜡切片制作(苏木精-伊红对染法)

石蜡切片制作可以用于:(1)保持细胞间的正常的相互关系,能较好和较长时间地保留细胞的原貌。(2)是光学显微镜的主要制片方法。实验方法原理石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称 H.E. 对染法)是组织切片最常用的染色方法。这种方法

大道至简 平淡为归——记北大药学院王夔院士

在一切美好没有来临之前,心灵首先美好起来了;在一切平静没有来临之前,心灵首先平静下来了。经历了三次政治和社会的大震荡,三次改变研究方向的中国科学院院士王夔先生,对世事变迁和人生境遇始终淡然置之、不喜不悲,以哲人的睿智和科学家创新求变的精神探求世界的客观规律和科学真理,走过了七十五年的生命历程。王先生