GFP与YFP有哪些区别
YFP和GFP其实是序列基本相同的两种蛋白,YFP就是把Thr203以Tyr取代,GFP则不发出绿色荧光,而发出较长波长的黄色荧光,也就是YFP。因此两者最大的区别则是发射波长了。我觉得这两种蛋白标记应该都没有问题,只是有几个问题应该考虑:1. 应该标记在C端,一般的核定位序列均位于蛋白N端,如果将GFP或者YFP标记在N端很可能影响核定位;2. 取决于你的核探针,如果是红色的探针,选用GFP比较经典,两者叠合的橙色也是很多文献上常采用的。但如果是蓝色的探针,则选用黄色比较容易区分一点,比较好看,不过做这个的好像也不太多。最后还有一点就是GFP的质粒比较多,很多还有EGFP序列,比如我们实验室的EGFP荧光就非常好看,所以我还是建议你选经典的GFP\EGFP。祝实验顺利。......阅读全文
Yeast基因文库的分类和选择
自1995 年成立以来,Dharmacon 提供各种用于批量研究基因功能的工具,支持最多从全基因组范围到信号通路、基因家族方面研究基因与疾病、表型、分子机理对应的关系。近年来随着高端酶标仪、高通量显微镜、自动化流式细胞仪、高内涵等设备的普及和技术更新,Dharmacon 文库在各个领域中
光学磁扭仪和荧光诱导活细胞细胞核蛋白的分解
实验概要机械力在生物过程中发挥着显著作用。这些机械力可以通过骨架长丝网络传送到细胞,诱导胞浆内不同的生化反应。虽然已经有充足的报告显示,细胞质酶可被细胞表面的局部应力直接激活,但一直没有证据表明,机械力可以直接改变核功能,包括卡哈尔体蛋白质复合物的结构变化。本实验描述了通过利用磁场扭曲力改变,流式细
AVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达敲除应用与分析
AAV-TBG-Cre/GOI系统简介: l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。 Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子,用于肝脏特异性转外源基因表达。 Ø Cre重组酶是
AAVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用...
AAV-TBG-Cre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用与优势分析AAV-TBG-Cre/GOI系统简介:l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子
不依赖基因型的青花菜高效遗传转化体系建成
近日,《植物科学前沿》(Frontiers in Plant Science)分别在线发表了中国农业科学院蔬菜花卉研究所甘蓝青花菜课题组的两项科研成果。 一项研究最终获得了普适性受体纯合材料(19B42),使得根癌农杆菌介导的青花菜转基因和基因编辑(CRISPR/cas9)效率提升至26.92
我国学者发现肺脏支气管肺泡干细胞具有双向分化潜能
1月7日,国际学术期刊Cell Discovery在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)周斌研究组的科研成果“Bi-directional differentiation of single bronchioalveolar stem cells durin
LSCM多重荧光标记
由于大部分实验都需同时观测两个或多个细胞内的组分,需要对细胞进行多重荧光标记。这时,研究者需要综合考虑实验目的、所使用的激光共聚焦显微镜配置和已有的实验材料。通常,激光共聚焦显微镜配备 4 个激光器(405nm 半导体固体激光器、氩离子激光器、543nm 氦/氖激光器或 561nm半导体固体激光器和
显微成像技术在干细胞研究中的应用
干细胞涉及到个体发育、器官移植、延缓衰老、癌症治疗等方方面面。单个的干细胞是如何分裂、分化成新的细胞、组织或器官呢?在成体中,干细胞又是如何完成细胞修复更新的使命呢?在下面的文章中,我们将介绍如何借助共聚焦、双光子等显微成像分析技术一一解决在干细胞研究中的这些问题。激光共聚焦扫描显微镜可以精确可控的
高通量筛选的FLIPR荧光检测法介绍
近年来,光学测定技术在美、英两国研究人员在高通量筛选检测中,努力进行了光学测定方法的研究,建立了大量的非同位素标记测定法,如用分光光度检测法筛选蛋白酪氨酸激酶抑制剂、组织纤溶酶原激活剂等,均获得成功。 放射性检测技术美国学者GanieSM在高通量药物筛选研究中,应用放射性测定法,特别是亲和闪烁
上海药物所发现抗多发性骨髓瘤的UPP通路抑制剂
靶向抑制泛素-蛋白酶体降解通路(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)已成功应用于多发性骨髓瘤的治疗。中国科学院上海药物研究所李佳课题组通过建立Ub-G76V-YFP的UPP报告基因细胞筛选模型,发现麻风树来源的Curcusone D是UPP通路抑制剂,在多发性骨髓瘤
dek35编码PPR蛋白影响玉米籽粒的线粒体nad4基因内...(一)
dek35编码PPR蛋白影响玉米籽粒的线粒体nad4基因内含子1的顺式剪接和发育农林RNA测序助力玉米籽粒dek35突变体研究该研究与前几天RNA测序在玉米籽粒dek2突变体中分子机制的研究应用相似,研究的主角依然是上海大学生命科学学院,该工作主要由陈鑫泽博士完成。研究对象由dek2突变体变为了de
高内涵——基于FRET分析活细胞中的ERK信号转导
Extracellular signal-regulated kinase(ERK)是胚胎发生,细胞分化,细胞增殖和细胞死亡调控的关键组成部分。ERK途径起源于质膜中的活化受体,并通过Ras/Raf/MEK至ERK(图1)。 图1. Ras/Raf/MEK/ERK信号级联将信号从细胞表面受体如EGF
chromotekGFP和RFP常见问题解答
1、GFP-Trap®可识别的GFP衍生物类型有哪些?(1) eGFP, wtGFP, GFP S65T(2) TagGFP(3) eYFP, YFP, Venus, Citrin(4) CFP不能识别:TurboGFP,所有的RFPs2、RFP-Trap®可识别的RFP衍生物类型有哪些?(1) m
常用内参抗体和标签抗体
Anti-β-Tubulin,Anti-β-Actin,Anti-GAPDH,Anti-GFP Tag,Anti-RFP Tag 等Epitope Biotech Inc. 公司定制生产高品质的对特定表位有特异性的小鼠单克隆抗体,与其他公司生产的同类产品相比,具有最高的灵敏度和最高的特异性,并且性价
模块式多光谱荧光成像技术方案
其主要特点如下:可选配从紫外光到远红光不同波段的光源板可进行植物对不同波段光源光合作用与生理生态响应实验叶绿素荧光成像分析:可运行Fv/Fm、Kautsky诱导效应、荧光淬灭分析、光响应曲线等protocols多光谱荧光成像分析:包括BG荧光(蓝色波段和绿色波段)成像和RFr荧光(红色荧光和远红荧光
蔬菜病害初期的快速检测与鉴定
叶绿素荧光、UV-MCF多光谱荧光、红外热成像、以NDVI归一化植被指数为代表的反射光谱等成像分析技术已经是目前最先进也最重要的无损植物表型检测技术,尤其适用于植物各种生物与非生物胁迫的检测、预报与响应机理研究。德国莱布尼茨蔬菜和观赏植物研究所IGZ的Sandmann研究组对此进行了多年的研究。他们
BLT小课堂丨植物蛋白互作技术(一)
植物蛋白互作技术我们的世界物种多种多样,而与我们人类生存关系最密切的就是植物。随着时间的推移与科技的进步,人类在逐步揭示自身基因真相的同时,也在不断探寻植物基因的种种功能。其中,蛋白质是植物生命活动的主要承担者。因此,在植物学相关研究中,蛋白质之间的相互作用是研究的重要基础和手段。目前,研究蛋白质-
活细胞成像系统在实际应用上有哪些功能?
活细胞成像系统是用于活细胞长时间、高清晰度、高灵敏度成像的设备。当用活细胞染料标记细胞内特定生物大分子,或者使用荧光蛋白标记体内特定蛋白时,使用该荧光染料或者荧光分子特定的激发光线激发,通过探测其特用的发射光线即可探测到该生物大分子。活细胞成像系统一方面控制细胞生存的外部环境,提供合适的温度、适度
干细胞磁珠分选和流式分选的区别
简单说一下原理:现在流式分选一般都是电荷式分选,即对感兴趣的目标细胞所在的液滴充上电荷,液滴经过电极板,通过电场作用发生偏转,从而实现分选。磁珠分选首先使用磁珠偶联的抗体去标记细胞,然后把标记好的细胞过柱子(柱子周围连磁铁),带磁珠的细胞就留在柱子上,不带磁珠的细胞就流走了,从而实现分选。现在可以比
Science文章:植物的体细胞到生殖细胞
与人类和动物不同,植物的生殖细胞是在花的生殖器官(雌蕊和雄蕊)中从体细胞重新演变的。植物的早期胚胎发育,并没有为将来的配子(生殖细胞)产生预留专门的细胞系。 被选中的体细胞的细胞分裂模式从有丝分裂转变为减数分裂,以减少染色体的数量,方便基因重组。在恰当的部位,恰当的时间,将体细胞变为生殖细胞,
董梦秋发现线粒体的“超氧炫”频率可以预测线虫的寿命
2014年2月12日,北京生命科学研究所董梦秋实验室与北大分子医学研究所程和平实验室在《自然》杂志在线发表题为“Mitoflash frequency in early adulthood predicts lifespan in Caenorhabditis elegans”的文章,报
美谷新品:智能共聚焦成像分析系统亮相细胞生物学大会
分析测试百科网讯,2021年4月13日,中国细胞生物学学会2021年全国学术大会在重庆悦来国际会议中心盛大开幕。美谷分子仪器(上海)有限公司在本次展览上展台上发布了新品ImageXpress Confocal HT.ai 智能化共聚焦高内涵成像分析系统。
干细胞磁珠分选和流式分选的区别
应管理员要求,我来比较一下流式分选和磁珠分选的优缺点,本来想列一个表,但表格可能表述不清楚,还是用通俗的语言写啊,个人体会欢迎拍砖。简单说一下原理:现在流式分选一般都是电荷式分选,即对感兴趣的目标细胞所在的液滴充上电荷,液滴经过电极板,通过电场作用发生偏转,从而实现分选。磁珠分选首先使用磁珠偶联的抗
干细胞磁珠分选和流式分选的区别
应管理员要求,我来比较一下流式分选和磁珠分选的优缺点,本来想列一个表,但表格可能表述不清楚,还是用通俗的语言写啊,个人体会欢迎拍砖。简单说一下原理:现在流式分选一般都是电荷式分选,即对感兴趣的目标细胞所在的液滴充上电荷,液滴经过电极板,通过电场作用发生偏转,从而实现分选。磁珠分选首先使用磁珠偶联的抗
USP21通过调控去泛素化来稳定FOXP3及维持Treg特有基因表达
FOXP3+调节性T细胞(Treg)具有免疫抑制作用,在维持自身免疫过程中具有重要作用。因此,对Treg细胞在体内的分子机制研究也具有重要意义。关于FOXP3+ Treg细胞稳定性的争论从最近的一些工作报道中也是愈演愈烈。在这些研究中,稳定Treg细胞在炎症反应以及成淋巴反应中具有T-effec
USP21通过调控去泛素化来稳定FOXP3以及维持Treg特有基因
FOXP3+调节性T细胞(Treg)具有免疫抑制作用,在维持自身免疫过程中具有重要作用。因此,对Treg细胞在体内的分子机制研究也具有重要意义。关于FOXP3+ Treg细胞稳定性的争论从最近的一些工作报道中也是愈演愈烈。在这些研究中,稳定Treg细胞在炎症反应以及成淋巴反应中具有T-effec
天津大学最新Nature子刊文章
来自天津大学,南开大学生命科学学院的研究人员发表文章报道称增强型绿色荧光蛋白的荧光会由于激光而被关闭,这种特殊的激光即飞秒激光,是人类目前在实验室条件下所能获得最短脉冲的技术手段,研究人员还通过癌细胞的系列离子进程验证了这一点,相关成果公布在Nature Photonics杂志(影响因子为29.2)
滨松sCMOS相机的优势与功能对比与应用实例分析
做成像的小伙伴大抵都了解,在单分子成像中,信号往往是极弱的,如何从背景噪声中pick出有效信号,是关键所在。为减小背景荧光(来自细胞的自发荧光等等)的影响,一般会采用“TIRF技术+科研级相机”进行成像。并较一般的成像应用,在灵敏度方面,单分子成像对相机的性能要求更为苛刻。 EMCCD相机在很长段时
多肽FRET荧光标记技术
荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染,操作简
USP21通过调控去泛素化来稳定FOXP3以及维持Treg特有基因...
USP21通过调控去泛素化来稳定FOXP3以及维持Treg特有基因的表达研究背景FOXP3+调节性T细胞(Treg)具有免疫抑制作用,在维持自身免疫过程中具有重要作用。因此,对Treg细胞在体内的分子机制研究也具有重要意义。关于FOXP3+ Treg细胞稳定性的争论从最近的一些工作报道中也是