GFP与YFP有哪些区别

YFP和GFP其实是序列基本相同的两种蛋白,YFP就是把Thr203以Tyr取代,GFP则不发出绿色荧光,而发出较长波长的黄色荧光,也就是YFP。因此两者最大的区别则是发射波长了。我觉得这两种蛋白标记应该都没有问题,只是有几个问题应该考虑:1. 应该标记在C端,一般的核定位序列均位于蛋白N端,如果将GFP或者YFP标记在N端很可能影响核定位;2. 取决于你的核探针,如果是红色的探针,选用GFP比较经典,两者叠合的橙色也是很多文献上常采用的。但如果是蓝色的探针,则选用黄色比较容易区分一点,比较好看,不过做这个的好像也不太多。最后还有一点就是GFP的质粒比较多,很多还有EGFP序列,比如我们实验室的EGFP荧光就非常好看,所以我还是建议你选经典的GFP\EGFP。祝实验顺利。......阅读全文

生物医学研究新工具:FLIMFRET生物传感器

荧光寿命成像(FLIM)与Förster共振能量转移(FRET)相结合,已被证明非常有利于生物医学研究中各种结构和细胞动态变化的研究。因为FRET信号强烈依赖于FRET配体和受体的距离,所以FRET允许监测分子相互作用。这允许研究分子的相互作用,如配体-受体复合物,蛋白质-蛋白质相互作用、效应蛋白与

FLIMFRET生物传感器介绍

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Verification-of-In-...

实验概要Environmental stresses often trigger rapid generation of reactive oxygen species (ROS) in plants. Excessive amount of ROS can cause damage to

绿豆虫害快速检测与抗性品种筛选

在高通量、规模化的植物/作物表型平台中,各种无损的表型成像分析技术是必不可少的。叶绿素荧光、多光谱荧光、红外热成像、高光谱成像等成像分析技术已经是目前最先进也最重要的无损植物表型检测与分析技术,尤其适用于植物各种生物与非生物胁迫的检测、预报与响应机理研究。同时,这些技术也可以直接用于种子本身的病虫害

清华大学仪器共享平台MACSQuant-VYB流式细胞仪

仪器名称:流式细胞仪MACSQuant VYB仪器编号:15025505产地:德国生产厂家:Mmiltenyi型号:MACSQuant出厂日期:201405购置日期:201512样品要求:上机样品为单细胞悬液,并过300目或40um的细胞筛,细胞没有团块。预约说明:1.请使用自己的账号进行预约,如特

流式细胞仪的应用分类都有哪些

一、免疫表型分析  1993年在波士顿召开的人类白细胞分化抗原会议(leukocytedifferentiationantigen,HLDA)  将CD抗原(clusterofdifferentiation)分为T细胞、B细胞、髓细胞、血小板、内皮细胞、自然杀伤细胞、活化抗原、黏附因子、细胞因子和细

酶标仪在植物领域的三种应用总结(二)

三、利用酶标仪进行植物信号分析 除了一些常见分子的分析和定量之外,常见的植物信号,如报告基因、蛋白蛋白相互作用和 ROS 分析等,也都可以用酶标仪 进行高通量的分析。3.1 报告基因分析基于 β-葡萄苷酸酶 (β-glucuronidase) 的 GUS报告基因系统利用了在高等植物中 β-glucu

生物医学研究新工具:FLIMFRET

目前,大多数生物探针都是基于荧光。荧光探针亮度的增加或减少取决于其浓度。但是,荧光强度不仅受研究对象浓度的影响,还受照明强度、光漂白以及基质吸收和阴影效应等。为了尽量避免这些问题,科学家倾向于优先选择比率染料(ratio-dyes),因为其允许对背景的干扰进行校准。尽管如此,基于荧光强度的测量并不是

流式细胞仪的应用分类都有哪些

自七十年代出现流式细胞仪以来,随着计算机技术、电子制造技术、激光技术及荧光素合成技术的不断发展,现代流式细胞仪已今非昔比,制造工艺、功能、精确度有了质的飞跃。流式细胞仪应用分类大致如下:  一、免疫表型分析  1993年在波士顿召开的人类白细胞分化抗原会议(leukocytedifferentiat

定量western-blot疑问解答:为什么需要验证抗体?

验证抗体对于结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而,抗体与抗

个人型流式细胞仪的原理、特点及应用领域

摘要:Handyem在2013推出了革命性的新一代个人型流式细胞仪HPC-100。HPC-100由加拿大国家光学研究所与加拿大航空航天局共同研发,用于空间站宇航员的健康监测。其核心技术是采用光纤微流体设计的“F3FiberFlowFluidics™”流动室,可以实现无鞘液,超小型,防震动等性能。 目

Nikon-Ti2E全自动活细胞显微成像系统共享

仪器名称:Nikon Ti2-E全自动活细胞显微成像系统仪器编号:22009067产地:日本生产厂家:Nikon型号:Nikon Ti2-E出厂日期:购置日期:2022-06-09所属单位:医研院>生物医学测试中心>细胞生物学平台>细胞平台光镜机组放置地点:医学科学楼C119固定电话:固定手机:固定

上海生科院等利用谱系示踪技术揭示心脏cKit+细胞的命运

  12月4日,Cell Research在线发表了中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所心脏发育与再生实验室的研究论文:Genetic lineage tracing identifies in situ Kit-expressing cardiomyocytes。该研究利用谱系示踪技术揭示心

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(五)

SNAP-tag技术在STED超高分辨率显微成像中的应用近十年中,显微成像技术得到了飞跃的发展,填补光学显微镜(~200 nm)到电子显微镜(~0.1 nm)分辨率缺口,打破光学衍射极限的超高分辨率显微镜也越来越趋于成熟化。其中,德国马普研究所的Stefan Hell教授凭借其研发的受激发射

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Nature新文章解答干细胞长期疑惑

  定位在肠隐窝中的静态细胞是否是干细胞,长期以来存在很大的争议。答案似乎可以说是也可以说不是,这取决于你对于“干细胞”这一术语的定义。   小肠上皮细胞层是哺乳动物机体的自我更新支持者,它的生命周期只有4-5天。结合其特征性的隐窝-绒毛结构,这一上皮细胞成为了研究哺乳动物干细胞的选择模型。肠隐窝

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双光子荧光显微镜的技术特点和使用技巧

双光子激发的基本原理是:在高光子密度的情况下,荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子,在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后,发射出一个波长较短的光子;其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。双光子激发需要很高的光子密度,为了不损伤细胞,双光子显微镜使用高能量锁模脉冲激光器。

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  双光子荧光显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的一种新技术。  双光子激发的基本原理是:在高光子密度的情况下,荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子,在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后,发射出一个波长较短的光子;其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。双

Use-of-the-B.D.-FACS-or-Calibur-Flow-Cytometers

Reservations:Schedule time on a cytometer (FACS or Calibur) by filling in the calendar at the flow lab. Don't grossly overbook since we have to pa

双光子显微镜简介

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转录因子Sp9参与神经纹状体苍白球发育过程(二)

         对Sp9LacZ突变体中β-gal+和β-gal+/Foxp1+细胞数目统计,发现数量显著减少。由于Sp9主要在纹状体苍白球细胞中表达。所以,Sp9的缺失影响了纹状体苍白球MSNs的产生。  对E16.5期的纹状体MSNs中10个纹状体MSN markers进行原位RNA杂交检

解读《环境保护部推进绿色制造工程工作方案》

  绿色制造的终端在绿色消费。环境保护部近期发布的《环境保护部推进绿色制造工程工作方案》(以下简称《方案》)中提出,抓紧落实《关于加快推动生活方式绿色化的实施意见》,倡导消费者选择绿色产品,实现可持续消费,引领生活方式向绿色化转变。  作为引领绿色可持续消费的重要抓手之一,环境标志如何在消费端助力环

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  纤毛(也称鞭毛)作为一种真核生物突出在细胞表面的保守细胞器,可以行使感受、分泌和运动等功能。生殖细胞精子的单根鞭毛和原生生物如衣藻的双根鞭毛可以通过摆动产生的动力来推动细胞体的定向游动。分布在人体呼吸道、输卵管和脑室细胞表面成簇的多纤毛可通过协调性的摆动推动细胞表面的液体定向流动,从而分别完成粘

EcoTech植物表型成像分析全面解决方案(一)

FluorCam叶绿素荧光成像技术红外热成像技术高光谱成像技术PlantScreen植物高通量表型成像分析技术FluorCam叶绿素荧光成像技术方案作物产量的提高需要同步化综合评估作物形态性状和生理性状,高通量定量化作物生理状态测量分析技术尤为重要,而叶绿素荧光成像技术是监测作物生理性状表型的最适合

GFPTrap如何设计成功的IP实验?

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