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关键蛋白调节大脑发育

正常的大脑发育需要神经元和非神经元(也称为神经胶质)细胞之间的相互作用。筑波大学的研究人员在一项新研究中揭示了蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)1的丧失如何导致神经胶质细胞破裂并影响大脑的正常发育。 PRMT修饰其他蛋白质的特定氨基酸,从而调节细胞的关键功能,例如存活,增殖和发育。在迄今为止已确定的PRMT家族的许多成员中,PRMT1是常见的成员之一,它控制组织的发育和寿命以及应激反应。由于PRMT1的完全敲除(即发育过程中所有组织中蛋白质的损失)会导致胚胎发育失败,因此近对PRMT1的组织特异性敲除进行了越来越严格的研究,以了解PRMT1如何促进组织发展。“我们以前发现PRMT1在大脑发育过程中对于一种神经胶质细胞少突胶质细胞的功能至关重要,”该研究的通讯作者深水明吉教授说。 “这项研究的目的是了解我们在PRMT1条件性基因敲除小鼠中观察到的其他神经胶质细胞可能如何导致髓鞘发育不良。” 为了实现他们的目标,......阅读全文

蛋白质纯化的内容提要

  一、亲和纯化样品的前处理  1. 菌液体积-起始目的蛋白量  2. 细菌裂解获得可溶蛋白  · BugBuster Master Mix 蛋白抽提方法  · 机械破碎(如超声等)Ni-NTA 树脂纯化  二、亲和纯化步骤  1. Ni-NTA树脂的兼容性  2. 天然条件纯化  · 柱层析  ·

蛋白质微阵列技术

微阵列技术在单个实验中能同时分析数千个参数。捕获分子微点在固体支持物上固定成行列并暴露在含相应结合分子的样品中。基于荧光、化学发光、质谱、放射性或电化学的读出系统能检测每个微点形成的复合物。这些微小化和平行的结合分析高度灵敏,方法的分析能力又能被微阵列基因表达分析所放大。在这些系统中,检测固定的DN

阿尔茨海默病的谜团

笔者在上一篇文章阿尔茨海默病的新药研发困局中写过阿尔茨海默病的历史,三种主流的假说,以及主流药物的研发历程。本文将重点介绍最近几年内阿尔茨海默病领域的理论和新药研发进展以及未来的发展方向。哥伦比亚作家马尔克斯在《百年孤独》中写过这样几段话:何塞·阿尔卡蒂奥·布恩迪亚意识到失眠症已经侵入镇子,于是便召

包涵体的纯化-4

9、什么叫复性成功 复性效果的检测: 根据具体的蛋白性质和需要,可以从生化、免疫、物理性质等方面对蛋白质的复性效率进行检测。 1,凝胶电泳:一般可以用非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳可以检测变性和天然状态的蛋白质,或用非还原的聚丙烯酰胺电泳检测有二硫键的蛋白复性后二硫键的配对

白话胶体金系列——第二话<标记>上篇

(一)基本概念为了方便新人与老司机交流,需要掌握一些基本名词和概念,以便准确的表述问题。这些知识不考试,写作时间也有限,关键还没有稿费,所以随便写写,没有咬文嚼字,如果意思表达错了请指正,形式上就不用对着教科书抠字眼了,谢谢。1.抗原、抗体,和二抗:抗原(半抗原):能够诱导产生抗体(免疫原性)并且和

自噬流的检测方法

  自噬是真核细胞降解长寿蛋白、错误折叠蛋白和受损细胞器的重要生物学过程。细胞自噬由多个步骤组成, 其中包括: ① 吞噬泡的形成; ② 自噬体的形成; ③ 自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶体; ④ 自噬溶酶体的降解。自噬流是这些步骤在细胞内连续出现的动态过程, 自噬流中的任一环节出现障碍自噬将无法完成

Cell;背靠背 | 相分离促进紧密连接形成的机制

  细胞连接(cell junction) 是指相邻细胞之间、细胞与细胞外基质之间在质膜接触区域特化形成的连接结构。细胞连接在加强细胞间的机械联系,维持组织结构的完整性和协调不同细胞功能方面起着重要的作用。细胞连接可分为紧密连接(tight junction)、锚定连接和通讯连接三种类型。其中紧密连

Cell;背靠背 | 相分离促进紧密连接形成的机制

  细胞连接(cell junction) 是指相邻细胞之间、细胞与细胞外基质之间在质膜接触区域特化形成的连接结构。细胞连接在加强细胞间的机械联系,维持组织结构的完整性和协调不同细胞功能方面起着重要的作用。细胞连接可分为紧密连接(tight junction)、锚定连接和通讯连接三种类型。其中紧密连

特定蛋白项目的临床应用与检测的质量控制

目前已用于临床诊断的特定蛋白多达40~50种,涉及免疫球蛋白及补体系列、风湿及类风湿系列、尿微量蛋白系列、急性炎症蛋白系列等。通过专业的特定蛋白分析仪或生化分析仪对其分析,为临床提供有效的病理生理指标,并作为临床诊断、治疗效果和分析预后的依据。血浆蛋白成分至少有1000多种,已分离出的具有临床意义的

形形色色的蛋白标签(一)

  一提到蛋白研究,首先跳入脑海的当然是抗体。的确,很多蛋白实验都离不开抗体。然而,即使抗体公司时不时推出新产品,但许多蛋白还是没有相应的抗体,我们只能望电脑兴叹。而且,也有很多抗体无能为力的情况,比如观察蛋白在细胞内的运输。所幸,各种各样的蛋白标签让我们能够从容应对这些挑战。   遗传标签  

细数铁蛋白临床价值多面性

铁蛋白主要存在于肝脏、脾脏和大脑的锥体外侧束的细胞核中,构成铁蛋白的两个亚型:一个是L亚型,相对分子质量19000,另一个是H亚型,相对分子质量21000。H和L亚型组成比例不同会产生不同的异铁蛋白,H和L比例取决于组织类型,同时随着炎症和感染情况而改变。血清铁蛋白是体内较为稳定的铁的贮存形式,在多

蛋白质纯化武器——工艺篇(二)

(2)包涵体溶解    看了包涵体洗涤部分,怎么溶解包涵体应该心中有数了。无非就是pH,变性剂,还原剂,表面活性剂等等的组合。经典的包涵体溶解液的配方为:pH8.0,20mM Tris,8M Urea。说它经典,是因为我用的最多,嘻嘻。再根据个性蛋白纯化的需要往这

热点!多篇文章聚焦淀粉样蛋白研究新进展!

  本文中,小编整理了多篇重要研究成果,共同聚焦科学家们在淀粉样蛋白研究领域取得的新进展,分享给大家!  图片来源:Si Lab, Stowers Institute for Medical Research  【1】Science:反常!一种淀粉样蛋白非但不致病,而且还有助于储存记忆  doi:1

蛋白质组最新研究进展

  蛋白质组(Proteome)的概念最先由Marc Wilkins提出,指由一个基因组,或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。 蛋白质组的概念与基因组的概念有许多差别,它随着组织、甚至环境状态的不同而改变。 在转录时,一个基因可以多种mRNA形式剪接,一个蛋白质组不是一个基因组的直接产物,蛋白质组中蛋

用于蛋白质表达的标签实验

实验步骤 一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素 亲和力和可溶性的选择 在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启

蛋白标准品(Marker)知识汇总

相关专题 蛋白Marker可分为:一、未预染的Marker即宽分子 量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。在western blot 过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着

蛋白纯化经验指南-1

蛋白纯化经验指南生物谷整理 http://www.bioon.com  原创:Chromatography weixingui@263.net, 推荐书籍:《蛋白纯化与实验鉴定指南》、《生物工程下游技术》、《酶工程》、《酶制剂工业》 1) 我现在手头

【盘点】定量蛋白组学将在未来10年飞速发展

  人类基因组计划的成功实施,我们已初步掌握了自身的遗传信息。但阐明人类基因组整体功能的功能基因组学仍任重而道远。蛋白质作为生命活动的"执行者",自然成为生命科学研究的新"宠儿"。几乎在所有生命科学领域内,科学研究工作者都需要对细胞、组织或完整生物体的蛋白进行定性描述或定量检测。对一种细胞、组织或完

凝胶迁移实验(EMSA)——凝胶迁移

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)可以:(1)研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用;(2)可用于DNA定性和定量分析;(3)用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。实验方法原理一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初

新技术!蛋白-DNA交互作用在单分子水平迎来重要突破!

  ChIP-seq、ATAC-seq等都是常见的研究体内蛋白质与DNA相互作用的有力工具,但这些传统方法都无法获得每一个大片段DNA分子上蛋白结合的真实状态,无法进行DNA复杂结构域蛋白-DNA交互作用的分析,使得蛋白-DNA交互作用在单分子水平的研究受到限制。  近日,华大基因唐冲博士团队在bi

镍柱上的咪唑

为什么咪唑可以把镍柱上的组氨酸蛋白洗脱下来?(1) 发布时间:2018-11-09 蛋白纯化 分子筛。 随着分子生物学的发展,越来越多的科研人员熟练掌握了分子生物学的各种试验技术,并研制成套试剂盒,使基因克隆表达变得越来越容易。但分子生物学的上游工作往往并非是最终目的,分子克隆与表达的

抗体和重组蛋白的使用及保存方法,有哪些?

无论是保存还是运输,请避免反复冻融。反复冻融,冰晶会破坏抗体和重组蛋白的空间结构,导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象改变,从而降低抗体的结合能力,也加快了抗体球蛋白和重组蛋白的降解速度。抗体和重组蛋白保存得当与否,直接决定了抗体和重组蛋白的活性使用效果,如果保存得当,抗体和重组蛋白活性大部分都可以

“点亮了生物学”的故事

  荧光蛋白标记神经细胞是研究大脑的一项重要的工具,带动了脑彩虹等技术的发展。刚刚去世的华裔科学家钱永健则为改造绿色荧光蛋白做出了重要的工作,改变了荧光蛋白分子的一个氨基酸,使其发光更强、更稳定。  美国乔治城大学吴建永教授曾在2014年介绍脑彩虹技术时着重介绍了荧光蛋白的故事。为纪念钱永健博士对科

抗体和重组蛋白使用保存方法

无论是保存还是运输,请避免反复冻融。反复冻融,冰晶会破坏抗体和重组蛋白的空间结构,导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象改变,从而降低抗体的结合能力,也加快了抗体球蛋白和重组蛋白的降解速度。抗体和重组蛋白保存得当与否,直接决定了抗体和重组蛋白的活性使用效果,如果保存得当,抗体和重组蛋白活性大部分都可以

常用生物软件(windows)全面介绍

常用生物软件(windows)全面介绍一、基因芯片1、基因芯片综合分析软件。 ArrayVision 7.0 一种功能强大的商业版基因芯片分析软件,不仅可以进行图像分析,还可以进行数据处理,方便protocol的管理功能强大,商业版正式版:6900美元。 Arraypro 4.0

Nature:揭示伴侣蛋白ClpB清理有毒蛋白聚集物机制

  细胞如何解开聚集在一起的蛋白?在一项新的研究中,来自荷兰国家原子分子研究所(AMOLF)和德国癌症研究中心的研究人员如今发现伴侣蛋白ClpB可强行拉开蛋白链中暴露的环状结构(loop),随后将它们从蛋白聚集物中拉取出来。相关研究结果于2020年1月29日在线发表在Nature期刊上,论文标题为“

无细胞蛋白表达系统的选择

图1.  与细胞内蛋白表达相比,无细胞蛋白表达系统能够显著地节约时间。 与基于细胞的蛋白表达系统相比较,无细胞蛋白表达系统具有独特的优势,包括节约时间、提高具有功能的、可溶的、全长蛋白的总体产量。本文介绍了根据模板类型、期望产率以及下游实验等因素来选择无细胞蛋白表达系统的标

细胞生物学名词解释(五)

9. 带3蛋白(band 3 protein)与血型糖蛋白一样都是红细胞的膜蛋白,因其在PAGE电泳分部时位于第三条带而得名。带3蛋白在红细胞膜中含量很高,约为红细胞膜蛋白的25%。由于带3 蛋白具有阴离子转运功能,所以带3蛋白又被称为“阴离子通道”。带3蛋白是由两个相同的亚基组成的二聚体,

珠蛋白生成障碍性贫血——血液病诊断及疗效标准

诊断标准国内诊断标准珠蛋白生成障碍性贫血(thalassemia)又称地中海贫血或海洋性贫血。1987年11月在上海召开的全国溶血性贫血专题学术会议和1988年10月在洛阳召开的全国小儿血液病会议讨论、制定了本病各型的诊断标准。现根据以上诊断标准,结合有关文献拟订诊断标准如下。一、β珠蛋白生成障碍性

热休克蛋白HSP对细胞凋亡的调节作用

  细胞凋亡是生物发育过程中或在正常生理状态下清除衰老及受损细胞的一种普遍现象。细胞凋亡的发生受胞外或胞内的多种刺激源所诱导,其中热休克蛋白(热激蛋白)是细胞凋亡的调控因子之一。细胞是通过调节自身的防御系统来适应环境胁迫,并且根据胁迫程度的强弱,利用自身遗传机制或调控自身状态抵抗胁迫,或主动诱发细胞