本生详解抗体的制备方法与原理
抗血清的制备 有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。 (一)用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如般制备抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因动物反应良好,而且能够提供足够数量的血清,用于免疫的动物应适龄,健壮,无感染性疾患,-好为雄性,此外还需十分注意动物的饲养,以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔,-好用纯种新西兰兔,组三只,兔的体重以2~3kg为宜。 (二)免疫途径 免疫途径有多种多样,如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等,般常用皮下或背部多点皮内注射,每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物学活性抗原,般不宜采用静脉注射。 (三)佐......阅读全文
钙蛋白酶抑制蛋白的基本信息
中文名称钙蛋白酶抑制蛋白英文名称calpastatin定 义一种广泛分布的内源性抑制蛋白质,能特异地抑制需钙激活的中性蛋白酶。其分子质量依来源及提取方法而异,从24kDa至400kDa。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
血红蛋白和肌红蛋白的异同
肌红蛋白含18个α螺旋,三级结构就具有生物活性。含有血红素,和血红蛋白同源,与氧的结合能力介于血红蛋白和细胞色素氧化酶之间医学、教育网,可帮助肌细胞将氧转运到线粒体。 血红蛋白需要四级结构才具有生物活性,α亚基与β亚基形成十字形,运载氧气。
蛋白酶的按蛋白酶作用分类
按蛋白酶作用的最适 pH 可以分为 pH2.5-5.0 的酸性蛋白酶、pH9.5-10.5 的碱性蛋白酶、pH7-8 的中性蛋白酶。根据蛋白酶的活性中心和最适反应 pH 可以分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和活性中心有两个羧基的酸性蛋白酶。
简述染色质蛋白非组蛋白的特性
①酸碱性:组蛋白是碱性的,而非组蛋白则大多是酸性的。 ②多样性:非组蛋白占染色质蛋白的60%~70%,不同组织细胞中其种类和数量都不相同,代谢周转快。包括多种参与核酸代谢与修饰的酶类如DNA聚合酶和RNA聚合酶、HGM蛋白(high mobility group protein)、染色体支架蛋
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
试剂、试剂盒 消化缓冲液经 TPCK 处理的胰蛋白酶HCl纯的钙调蛋白实验步骤 材料经 TPCK 处理的胰蛋白酶(其干粉可从 WorthingtonBiochemicalCorp. 买到)HCl(1 mmol/L)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)试剂消化缓冲液(配方,见"试剂的配制
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验 试剂、试剂盒 消化缓冲液 经 TPCK 处理的胰蛋白酶
重组蛋白和天然蛋白有什么区别
重组蛋白是通过基因工程重组而来的,而天然蛋白提取自动物组织。重组蛋白的活性和纯度都比天然蛋白高,而且更易吸收,安全性也更好。
蛋白表达-蛋白在破碎后沉淀-怎么办
细胞破碎液离心之后目的蛋白条带更明显细胞破碎后,用缓冲液提取蛋白质,用什么方法能得到蛋蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎
蛋白质转印法检定蛋白质
蛋白质转印法检定蛋白质 蛋白质经SDS-PAGE后,胶片浸入转印缓冲液,蛋白质可被转印到硝化纤维纸(nitrocellulose) 上,先经?素洗去SDS,并使蛋白质回?原态抗原性,可使用抗体进?免疫染色 (Towbin et al, 1979)。仪器用具:电泳转印槽 (Hoefer Tra
蛋白质的蛋白质的提取技术
选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方
嗜铬粒蛋白A的蛋白质性质介绍
嗜铬粒蛋白A(chromogranin A,CGA)是一种由439个氨基酸组成的酸性、亲水蛋白质,分子质量48000,它是神经肽类家族中的一员,广泛分布于神经内分泌系统,因其半衰期长而成为评估整个神经内分泌系统活性的强有力指标,是诊断神经内分泌肿瘤的标志物,在心血管疾病中的作用也越来越受到关注。
蛋白质根据蛋白质结构进行分类
纤维蛋白(fibrous protein):一类主要的不溶于水的蛋白质,通常都含有呈现相同二级结构的多肽链许多纤维蛋白结合紧密,并为单个细胞或整个生物体提供机械强度,起着保护或结构上的作用。球蛋白(globular protein):紧凑的,近似球形的,含有折叠紧密的多肽链的一类蛋白质,许多都溶于水
人血清中白蛋白与球蛋白的分离
随着超速离心机转速的提高,用超速角式转头分离人血清中白蛋白与球蛋白的离心时间越来越短,用5—20%线性蔗糖梯度作蛋白质速率—区带(Rate—zonal)分离,样品以近等速沉降,低于分析实验结果。下面的简单分离实例有代表性。 设备:离心机:智能型超速离心机(Hitachi CP—M系列,Beckman
胰蛋白胨与蛋白胨的区别
蛋白胨是一种外观呈淡黄色的粉剂,具有肉香的特殊气息。它作为微生物培养基的主要原料,在抗生素,医药工业,发酵工业,生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大;不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽,因此存在各种蛋白胨,一般来说,用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白(酪蛋白、肉类)和植物蛋白(豆类)两种。胰酪蛋
抗人球蛋白间接抗人球蛋白试验
抗人球蛋白试验-间接抗人球蛋白试验:原理:抗人球蛋白试验(antiglobulintest,AGT),又称Coombs试验,是检查不完全抗体的一种很好方法。用人血清免疫家兔,产生抗人球蛋白抗体,即抗人球蛋白血清。将抗人球蛋白血清(AGS)加入已经致敏的红细胞盐水悬液中,红细胞表面的抗体球蛋白(即使其
周期蛋白依赖性蛋白激酶的简介
指的是cyclin-dependent kinases,周期蛋白依赖性蛋白激酶,是一组丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,和周期蛋白cyclin协同作用,是细胞周期调控中的重要因子。CDK可以和cyclin结合形成异二聚体,其中CDK为催化亚基,cyclin为调节亚基,不同的cyclin—CDK复合物,通过
白蛋白球蛋白比值偏低的临床意义
正常人很少出现白球比偏低,血液中的白蛋白与球蛋白比值不应低于1.5:1,如果低于这个值,常见于肝硬化,肝功能不全,肾病(蛋白尿)等会造成白蛋白偏低的疾病患者。 白蛋白降低会影响免疫力,影响人体对药物的代谢能力,还会造成腹水,胸腔积液,双下肢眼睑水肿等。如果不低于1.5:1,应该检查肝功能和尿常
简述突触核蛋白的伴侣蛋白样作用
Kim等发现α-突触核蛋白能够表现出类似伴侣蛋白样作用防止谷胱甘肽硫转移酶(GST)和醛缩酶在受热的条件下发生沉淀,并且还能防止二硫苏糖醇(DTT)诱导α-乳白蛋白和小牛血清蛋白的沉淀[29],这可能与α-突触核蛋白能够与发沉降过程中的蛋白质的亲水性结构域结合并稳定其结构不被破坏。
血影蛋白与肌球蛋白的功能对比
血影蛋白是类似肌球蛋白的膜的外在性蛋白之一种。是膜里侧结构蛋白质之一,除起支持双层脂质外,还有保持红细胞外形的作用,占里侧结构蛋白之60—70%。用低浓度盐溶液抽提可从膜游离出来。在37℃下抽提,则得到化学性、结构性都很相似的分子量24万的α-亚单位〔1带、构成红细胞的蛋白质多以于十二烷基硫酸钠存在
蛋白酶水解蛋白质的机理
应该从酶的结构和酶的作用机理解释。胰蛋白酶的作用中心有Zn2+,Arg127的胍基和Glu270的羧基组成。催化的第一步反应是活化水分子的亲核氧原子攻击底物的羰基碳原子,同时,Glu270作为广义碱,从Zn2+—结合水吸取一个质子,形成一个带负电的四面体过度中间物,通过Zn2+和Arg127带正电的
C反应蛋白检测介绍C反应蛋白(CRP)介绍
C反应蛋白(CRP)介绍: 在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质(1941年发现),命名为C-反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)。最早采用半定量的沉淀试验,现在制备优质的抗血清,可以建立高灵敏度、高特异性、重复性好的定量测定方法。CRP由肝细胞所合成,
染色质蛋白组蛋白的相关介绍
组蛋白是构成真核生物染色体的基本结构蛋白,富含带正电荷的Arg和Lys等碱性氨基酸,等电点一般在pH10.0以上,属碱性蛋白质,可以和酸性的DNA紧密结合,而且一般不要求特殊的核苷酸序列。 用聚丙烯酰胺凝胶电泳可以区分5种不同的组蛋白:H1、H2A、H2B、H3和H4。几乎所有真核细胞都含有这
蛋白质免疫印迹组织蛋白提取简介
1)所需器材:制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、一个大冰盒、一个1.5ml EP管盒、手套、眼科剪(最好高温高压处理)、新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织、保存于4℃冰箱的PBS(最好高温高压处理)、移液枪、吸头(最好高温高压处理)、两套研磨棒(最好高温高压处理)、掌上离
蛋白胨与胰蛋白胨的区别
一、蛋白胨(peptone)广义的讲是所有蛋白胨的总称。在国内习惯把蛋白胨特指为蛋白胨(主要原料是牛骨),价格低廉;被广大用户用于要求不太高的实验和生物发酵中。进口的蛋白胨没有专指一个具体的一种蛋白胨,如:BD、 OXOID、Pronadisa都会按照技术标准和原料的不同进行细分。蛋白胨(pepto
关于脑脊液的蛋白定量和蛋白电泳的介绍
蛋白定量 1、化脓性脑膜炎,流行性脑膜炎蛋白质含量为3-6.5g/L;结核性脑膜炎刺激症状期蛋白质含量为0.3-2.0g/L,压迫症状期为1.9-7g/L,麻痹期为0.5-6.5g/L;脑炎蛋白质含量为0.5-3.0g/L。 2、引起脑脊液循环梗阻的疾病,如脊髓蛛网膜炎与脊髓肿瘤等,其蛋白质
重组蛋白和天然蛋白有什么区别
重组蛋白一般用转基因动物的乳腺产生,产生的重组蛋白作为生物制药在医学中作用显著。利用基因工程技术,可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”。方法是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物(哺乳动物才会泌乳)的受精卵中,然后,将受精卵送入母体内,使
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
试剂、试剂盒消化缓冲液经 TPCK 处理的胰蛋白酶HCl纯的钙调蛋白实验步骤材料经 TPCK 处理的胰蛋白酶(其干粉可从 WorthingtonBiochemicalCorp. 买到)HCl(1 mmol/L)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)试剂消化缓冲液(配方,见"试剂的配制'
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验—蛋白质激酶C
试剂、试剂盒PKC 分析缓冲液组蛋白 HI 储存液磷脂酰丝氨酸甘油二油酸脂实验步骤1. 在冰浴的离心管内配制如下 20 μl 反应混合物:5X PKC 分析缓冲液 4 μl10 mg/ml 组蛋白 HI 储存液
市售“蛋白粉”蛋白质含量过低-食用未必补充蛋白质
21日,羊城晚报记者走访佛山市场发现,声称能够补充人体蛋白质的蛋白粉保健食品,有的蛋白质含量却很少——按普遍标准每百克蛋白粉需含50克蛋白质,但市面上有少数蛋白粉的蛋白质含量低于20克。 蛋白质含量差别很大 21日,记者在佛山季华五路、玫瑰西路等处的超市和药店发现,保健食品被集中放在显眼位置
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析—凝胶蛋白质激酶分析
试剂、试剂盒Tris-HClDTT盐酸胍尿素激酶分析缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤1. 准备下列材料:SDS-PAGE 要用到的所有试剂50 mmol/L Tris-HCl,室温(pH 8.0),1 mmol/L DTT6 mol/L 盐酸胍,50 mmol/L Tris-HCl,室温(p