钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
试剂、试剂盒 消化缓冲液经 TPCK 处理的胰蛋白酶HCl纯的钙调蛋白实验步骤 材料经 TPCK 处理的胰蛋白酶（其干粉可从 WorthingtonBiochemicalCorp. 买到)HCl(1 mmol/L)纯的钙调蛋白（干粉；无盐（0.1~1 mg)试剂消化缓冲液(配方，见"试剂的配制'，PP.82~83)操作程序1) 称重 0.1~1mg 胰蛋白酶于 1.5-ml 离心管，并溶于 1mmol/LHCl 中，终浓度为 1 mg/ml。置冰上。2) 用消化缓冲液溶解钙调蛋白，终浓度为 1 mg/ml 置冰上。3) 加一等分胰蛋白酶于钙调蛋白。该等分含胰蛋白酶的重量应为钙调蛋白总量的 1/100。例如，对 0.5 mg 钙调蛋白，加 5ug 胰蛋白酶（5ullmg/ml 胰蛋白酶储液)。4) 盖紧离心管，反应混合物于 37°C 孵育 2 h。5) 在消化反应正在进行的同时，置剩余的胰蛋白酶储液于冰上。2 h......阅读全文
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
试剂、试剂盒 消化缓冲液经 TPCK 处理的胰蛋白酶HCl纯的钙调蛋白实验步骤 材料经 TPCK 处理的胰蛋白酶（其干粉可从 WorthingtonBiochemicalCorp. 买到)HCl(1 mmol/L)纯的钙调蛋白（干粉；无盐（0.1~1 mg)试剂消化缓冲液(配方，见"试剂的配制
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
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钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
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钙调蛋白的溴化氰裂解实验
试剂、试剂盒甲酸纯的钙调蛋白溴化氰乙腈实验步骤材料甲酸（市售最髙级（如AldrichChemicalCo.，Inc.)纯的钙调蛋白（干粉；无盐（0.1~1 mg)溴化氰（CNBr)(晶体）（如AldrichChemicalCo.，Inc.)乙腈（如Burdick&Jackson或J,T.Baker)
钙调蛋白的溴化氰裂解实验
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钙调蛋白的溴化氰裂解实验
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钙调蛋白样品的测活实验
试剂、试剂盒 MLCK 的底物肽ATP钙调蛋白储液 MLCK 酶磷酸丙酮（任选）MLCK 测活缓冲液仪器、耗材 聚丙烯微量离心管 Whatman*P81 磷酸纤维素纸（切成条)玻璃烧杯加样器闪烁瓶闪烁计数器吹干机（任选)实验步骤 材料与设备聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽（10m
钙调蛋白的苯基Sepharose－层析实验
钙调蛋白的苯基-Sepharose 层析实验 试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分 CaCl2(固体)
钙调蛋白的苯基Sepharose－层析实验
试剂、试剂盒含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤材料与设备含钙调蛋白的组分，从 DEAE 柱收集后合并所得（见实验 4)透析袋（标称截留分子量
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试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材 透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱 蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤 材料与设备含钙调蛋白的组分，从 DEAE 柱收集后合并所得（见实验 4)透析袋（标称截
钙调蛋白样品的测活实验
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钙调蛋白样品的测活实验
钙调蛋白样品的测活实验 试剂、试剂盒 MLCK 的底物肽 ATP 钙调蛋白储液
钙调蛋白的定义
钙调蛋白（calmodulin, CaM）又称钙调素，是一种普遍存在于各种真核细胞内，并能与钙离子结合的多功能蛋白质。 钙调蛋白参与细胞内多种信号转导途径，并在Ca2+依赖性信号转导途径中起到关键作用，是动态Ca2+传感器，能够响应广泛的Ca2+浓度，并向下游传递信号。 钙调蛋白分子是由
从鸡胗提取钙调蛋白实验
试剂、试剂盒 鸡胗2-巯基乙醇缓冲液 H(10X)仪器、耗材 聚丙烯烧杯匀浆器聚碳酸酯离心管超速离心机带刻度的聚丙烯量筒粗棉布聚丙烯漏斗实验步骤 材料与设备鸡胗（25 个；保存于-20°C)(如，Pel-Freez,Inc.)2-巯基乙醇（2-ME; 分子量 78.13Da; 密度 1.114)聚丙
从鸡胗提取钙调蛋白实验
试剂、试剂盒鸡胗2-巯基乙醇缓冲液 H(10X)仪器、耗材聚丙烯烧杯匀浆器聚碳酸酯离心管超速离心机带刻度的聚丙烯量筒粗棉布聚丙烯漏斗实验步骤材料与设备鸡胗（25 个；保存于-20°C)(如，Pel-Freez,Inc.)2-巯基乙醇（2-ME; 分子量 78.13Da; 密度 1.114)聚丙烯烧杯
从鸡胗提取钙调蛋白实验
从鸡胗提取钙调蛋白实验 试剂、试剂盒 鸡胗 2-巯基乙醇 缓冲液 H(10X)
钙调蛋白的粗分级分离实验
试剂、试剂盒 上清固体硫酸铵浓硫酸Tris 碱缓冲液 B仪器、耗材 聚丙烯烧杯磁力搅拌器与搅拌子聚碳酸酯离心管超速离心机带刻度的聚丙烯量筒粗棉布聚丙烯漏斗橡皮淀帚 刮勺透析袋实验步骤 材料与设备上清，得自实验 2(约 700~1000 ml)固体硫酸铵聚丙烯烧杯（2x4000-ml)磁力搅拌器与搅拌
钙调蛋白的粗分级分离实验
钙调蛋白的粗分级分离实验 试剂、试剂盒 上清 固体硫酸铵 浓硫酸 Tris
钙调蛋白的粗分级分离实验
为纯化钙调蛋白，对平滑肌组织提取物的粗分级分离采取了两步不同的操作：硫酸铵沉淀和等电点沉淀。这两步操作利用了钙调蛋白的两个不同的性质，即它在中性以上 pH 条件下的高溶解度和它的酸性等电点。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒上清固体硫酸铵浓硫酸Tris 碱缓冲液 B仪器
组织的分离实验_胰蛋白酶消化消化分离法
实验方法原理胰蛋白酶适于消化细胞间质较小的软组织，如胚胎组织、羊膜、上皮组织、肝、肾等软组织，对传代细胞也非常好。用于消化纤维性组织或较硬的癌组织则较差。Ca2+和Mg2+对胰蛋白酶的活性有一定抑制作用，故需用不含这些离子的BSS 配制。血清有抑制胰蛋白酶活性的作用，因此在做细胞传代时，用胰蛋白酶消
钙调蛋白基本介绍
Ebashi 等在 1965 年报道了细胞中存在介导钙信号的钙结合蛋白，随后 Cheung 将这一类能结合钙离子的磷酸二酯酶（PDE）激活蛋白命名为“钙调蛋白”（calmodulin，简称 CaM）。 [4] 钙调蛋白是一种广泛存在于真核细胞中，进化上高度保守的一类钙离子受体蛋白。钙调蛋白是由
钙调蛋白的功能特点
钙调蛋白是细胞第二信使系统的重要成分，在Ca信号系统传导中起着关键的作用，调控生理代谢及基因表达，控制细胞正常的生长和发育。钙调蛋白作为第二信使在植物信号转导中的作用一直是植物生理、细胞生物学和发育生物学研究的热点。Ca/CaM是有机体进化过程中最保守的信号转导级联反应系统，这一信号途径广泛存在于真
关于钙调蛋白的结构介绍
钙调蛋白的外形似哑铃，有两个球形的末端，中间被一个长而富有弹性的螺旋结构相连，长度为 6.5nm，每个末端有两个Ca2+结构域，每个结构域可以结合一个Ca2+，这样一个钙调蛋白可以结合4个Ca2+ ，每个位点都是由12个氨基酸残基组成的套环，门冬氨酸和谷氨酸的侧链提供 Ca2+结合基团。其中C端
神经胶质细胞培养实验_胰蛋白酶消化法
实验材料大鼠试剂、试剂盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤一、原代培养1. 选用生后1周的新生大白鼠，用碘酒,酒精棉球消毒，断头取其大脑皮层组织。 2. 解剖显微镜下，剥离脑膜，切除大脑髓质部分。 3. 将大脑皮质在无Ca2+、Mg2+Hanks液(CM
关于酶消化法的胰蛋白酶消化的基本介绍
1、加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞最好，在37℃培养箱消化2min。 2、显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若细胞质回缩，细胞间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。 3、加入培养液：更换吸管，加入新鲜的培养
钙调蛋白调节微管解聚简介
微管的组装需要微管结合蛋白和 Tau因子的共同作用，由于依赖于钙调蛋白激酶的底物而彻底被磷酸化，导致微管解聚。当体系中存在一定的 Ca2+的时候，钙调蛋白就会与微管 Tau 因子竞争结合，微管的聚合就会被抑制，细胞的生理活动恢复正常。利用显微注射法注入钙调蛋白，可以有效的延长有丝分裂中期持续的时
关于钙调蛋白的作用机理介绍
钙调蛋白分子本身无酶的活性，在无Ca2+的情况下，也无生物学活性；但在胞内Ca2+结合后，钙调蛋白发生构型上的变化，暴露疏水区，疏水区与依赖于 钙调蛋白的靶酶相互作用而调节酶的活性。 [4] 作为一个多功能的Ca2+传感器，钙调蛋白能够应对不同Ca2+浓度。结合Ca2+后，钙调蛋白会发生构象转变
蛋白质胰蛋白酶磷酸肽图谱制定实验——固相蛋白消化
试剂、试剂盒甲醇PVP-360（溶于乙酸）50 mmol L 碳酸氢铵pH 8.0仪器、耗材PVDF 膜／硝酸纤维素膜保鲜膜／聚酯薄膜实验步骤1. 用 SDS-PAGE 凝胶电泳分离 32P 标记的样品，用标准的湿式或半干式蛋白质转移方法将蛋白质转移到 PVDF 或硝酸纤维素膜上。2. 将膜晾干并用
怎样配置胰蛋白酶消化液
1．D．Hanks液高压灭菌之后，晾至室温，4℃保存备用。2．称取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中(夏天时研磨器应放在冰浴中)，加入少量D－Hanks液研磨1 000次左右，调制成糊状。再放入4℃预冷的适量D-Hanks液中，4℃下磁力搅拌使完全溶解。3．用NaHC03干粉将胰酶溶液的pH值调至8.0左
Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶分析实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 1 mg ml 钙调蛋白（- 70℃ 小量储存）