EGTA能溶解在蒸馏水中吗
我今天也用到了EGTA，在蒸馏水中几乎不溶。EGTA的溶解度随着pH值的增大而增加。既可以用1M的氢氧化钠溶解的，之后再用Buffer稀释，有可能会有部溶物产生，之后再超声2分钟即可。......阅读全文
苏州医工所开发出新型荧光碳点应用于细胞内钙离子检测
钙是维持生物体生命活动的必需元素之一。它在骨骼生长、肌肉活动、酸碱平衡、神经活动中起着不可替代的作用。作为通用的第二信使，钙离子调节多种重要的细胞功能，如分化、增殖、生长和基因转录等。近期的研究还表明，癌细胞中的钙离子状态与肿瘤的发生、转移，以及血管生成均有关。因此检测钙离子浓度，特别是检测细胞
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
实验材料细胞试剂、试剂盒Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材电子显微镜实验步骤1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消化步骤，每 107 个细胞最少要用 1 ml 缓冲液，以后减半
苏州医工所开发出新型荧光碳点应用于细胞内钙离子检测
钙是维持生物体生命活动的必需元素之一。它在骨骼生长、肌肉活动、酸碱平衡、神经活动中起着不可替代的作用。作为通用的第二信使，钙离子调节多种重要的细胞功能，如分化、增殖、生长和基因转录等。近期的研究还表明，癌细胞中的钙离子状态与肿瘤的发生、转移，以及血管生成均有关。因此检测钙离子浓度，特别是检测细胞
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结...
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构实验实验材料 细胞试剂、试剂盒 Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材 电子显微镜实验步骤 1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消
Methanol－Fixation－for－Immunofluorescence
Methanol fixation works by precipitating proteins, and as such it is a quick method (2-5)minutes is enough time for most antibodies/proteins). Diffuse
CSF－Extract－Prep－for－Spindle－Assembly
This protocol is essentially as described by Murray (1991), Cell Cycle Extracts. In Methods in Cell Biology, B.K. Kay and B. Peng, eds. (San Diego: Ac
乙二醇双2氨基乙醚四乙酸的基本信息
中文名称乙二醇双2-氨基乙醚四乙酸英文名称ethylene glycol bis (2-aminoethyl ether) tetraacetic acid;EGTA定 义与乙二胺四乙酸相似，能与二价金属离子结合的一种螯合剂，但对钙离子有更高亲和性。可专门用做需要钙离子的蛋白酶(如BAL31)的抑
细胞内钙测定
式中Kd为 Fura-2与Ca 结合反应的介离常数，37℃时其值为224nmol/L,Fmax是细胞内Fura-2全部为Ca饱和时的荧光比值（采用Ca 载体），Fmin为Fura-2完全未结合Ca 时的荧光比值。通过向介质中加入过量的EGTA将细胞内外的游离Ca 螯合，此时测得的最小荧光值。F为实验
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构 从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构 细胞核的预先分离 实验材料
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构细胞核的预先分离实验材料细胞 试剂、试剂盒Tritron X-100
质粒DNA的去磷酸化实验
实验方法原理 去除 5' 端的磷酸基可防止质粒 DNA 的自身连接和环化。在体外连接反应中，DNA 连接酶可在邻近的两个分子间形成磷酸二酯键。但只有当一个分子的 5' 端带有磷酸基另一分子的 3' 端带有羟基时，这一反
Crystallization－of－Kinesin－Family－Motor－Proteins
Motor proteins of several kinesin family groups have now been crystallized: monomeric Kinesin-1 motor domains from human, rat andNeurospora (Kull et a
3，52ClPADAT分光光度法测定矿石中的微量钴
一、方法要点测定矿石中的微量钴，在磷酸盐缓冲液(pH 5)时，钴与3，5-2Cl-PADAT5-[(3，5-二氯-2-吡啶)偶氮]-2，4-二氨基甲苯形成红紫色络合物，再加盐酸酸化后溶液呈紫色络合物，在波长590nm处，以试剂空白作参比，测定吸光度。二、试剂与仪器(1)3，5-2C1-PADAT：0
Negative－Stain－Electron－Microscopy－of－Microtubules
Negative staining is a rapid, qualitative method for analyzing microtubule structure at the EM level. Because negative staining involves deposition of
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验
实验材料 PRSETB 细菌表达质粒HeLa 细胞株试剂、试剂盒 苯甲基横酰基氟化物EGTA 缓冲液氯化钙缓冲液仪器、耗材 超声发生器荧光光谱仪实验步骤 本文中描述的方法涵盖了变色子在细菌及真核细胞里的克隆与表达（见 4.3.1 )，变色子的生物化学和生物物理特征鉴定（见 4.3.2 )，以及通过
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂 实验材料 PRSETB 细菌表达质粒 HeLa 细胞株
c3肾炎因子(c3nef)的检查
C3肾炎因子（C3Nef）是旁路途径C3转化酶（C3b，Bb）的一种IgG类自身抗体，C3Nef与C3b、Bb按1∶1∶1比例结合，可以使此酶稳定，免遭C3b-INA和B1H的灭活，从而导致C3和其他补体成分经旁路途径活化。检测C3Nef时，一般将正常人血清与待测血清在EGTA存在下共育，如正常
Nif对白皮松花粉萌发和花粉管生长的调节
实验概要本研究以白皮松花粉为实验材料，用不同浓度钙通道抑制剂Nif处理花粉和花粉管，结合Fluo-3AM荧光标记探讨Ca2 在白皮松花粉萌发和花粉管生长过程中的作用。此外运用Ca2 螯合剂及外加钙调素研究Ca2 包括细胞壁钙库对白皮松花粉萌发和花粉管生长作用。主要试剂1. 蔗糖、CaCl2和硼酸均用
透化细胞和退化细胞器中蛋白质的磷酸化实验—试剂制备
试剂、试剂盒胞外缓冲液胞内缓冲液透化缓冲液标准裂解缓冲液裂解缓冲液SDS-PAGE 加样缓冲液双向-PAGE 裂解緩冲液实验步骤这些试剂在后面许多地方要用到，应在进行下述实验前配好。1. 胞外缓冲液（pH 7.2，37℃）110 mmol/L NaCl10 mmol/L KCI1 mmol/L Mg
Fixation－of－Embryos
MEMFA Fix10xMEMFA Salts1 part 10x MEMFA salts1 M MOPS1 part 37% formaldehyde20mM EGTA8 parts water10mM MgSO410x salts can be autoclaved and stored. Tu
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验
钙调素（CaM) 是普遍分布的蛋白质，参与钙介入的信号转导。当 Ca2+ 流入时，CaM 获得强亲和力，结合各种带有一个或多个CaM 识别序列的胞内蛋白，启动或终止 Ca2+ 调控的信号串联。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。实验材料PRSETB 细菌表达质
透化细胞和退化细胞器中蛋白质的磷酸化实验
试剂的制备单层培养细胞的透化悬浮培养细胞的透化用分离的亚细胞组分分析蛋白质的磷酸化用分离的亚细胞组分进行激酶分析试剂、试剂盒胞外缓冲液 胞内缓冲液
Whole－mount－TUNEL－analysis－of－Xenopus－embryos
Fixation and pretreatmentDejelly albino embryos carefully in 2% Cystein (pH 7.8).Remove the vitellin membrane with two pairs of tweezers (or c
从用紫杉醇稳定的微管中分离基于微管的运动蛋白
实验材料脑组织试剂、试剂盒PME 缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤一、分离驱动蛋白1. 以每克组织 1.5 ml PME 缓冲液的比例进行组织匀浆，匀浆物在 39000 g 离心 30 分钟。PME 缓冲液：0.1 mol/L PIPES，pH 6.92 mmol/L EGTA1 mmol/L MgS
武汉植物园在钙调控草坪草抗冷机理研究中取得新进展
狗牙根(Cynodon dactylon (L). Pers.)作为一种抗性较强的草坪草，其应用前景广泛。然而狗牙根是一种暖季型草坪草，对冷冻害比较敏感。如何提高狗牙根对冷冻害胁迫的抗性，以使其四季长青，对草坪草研究具有重要的现实意义。 钙在植物生理活动中起重要作用，各种外界和内在的信
透化细胞和退化细胞器中蛋白质的磷酸化实验
试剂的制备 单层培养细胞的透化 悬浮培养细胞的透化 用分离的亚细胞组分分析蛋白质的磷酸化 用分离的亚细胞组分进行激酶分析
高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用
核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统，既包含蛋白质，又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。1. 大鼠肝脏
高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用
核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统，既包含蛋白质，又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。 本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。 1. 大鼠肝脏(
高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用
核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统，既包含蛋白质，又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。 本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。 1. 大鼠肝脏
关于氨羧络合剂的基本信息介绍
分子中含有氨基（一NH3）和羧基（一COOH）的络合剂。试剂分子中含有多个配位原子（O与N），能与大多数金属离子形成稳定的螫合物（chelate），常用于络合滴定，最常用的氨羧络合剂是乙二胺四乙酸（EDTA）。 氨羧络合剂为一两个或多个的羧酸基接于氨基氮上而符合于下列化学通式的络合剂。 其中