EGTA能溶解在蒸馏水中吗
我今天也用到了EGTA，在蒸馏水中几乎不溶。EGTA的溶解度随着pH值的增大而增加。既可以用1M的氢氧化钠溶解的，之后再用Buffer稀释，有可能会有部溶物产生，之后再超声2分钟即可。......阅读全文
流式细胞计量术（基于荧光的蛋白质分析）实验
活细胞表面抗原的荧光染色（直接免疫荧光）实验材料细胞初始抗体试剂、试剂盒PBS 溶液叠氮化钠实验步骤1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，轻摇，收获细胞。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。2. 用 4 ml PBS+0.1% 叠氮化钠和 1
中间丝的分离方法实验——从组织中分离中间丝
实验材料牛舌试剂、试剂盒解聚缓冲液组装缓冲液匀浆缓冲液抽提缓冲液柱缓冲液PEM 缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、从牛舌上皮分离角蛋白中间丝1. 从当地屠宰场拿到新鲜牛舌。一条舌头通常可以产出几十毫克纯化了的角蛋白中间丝。2. 用刀片切刮，把舌中的肌肉和黏膜分开。舌黏膜片（大约 1cmx1 cm )
ICPAES测试稀土元素
电感耦合等离子体发射光谱法 ( ICP-AES) 具有检测限低、线性范围宽和多元素同时测定的优点 , 目前已成为稀土元素分析的主要手段。计算机控制单道扫描 ICP-AES , 由于其选线灵活方便在测定稀土元素中得到普遍应用。实验部分： 仪器设备与工作条件： HK-8100 单道扫描式发射光谱仪。波长
高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用
核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统，既包含蛋白质，又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。1. 大鼠肝脏
常见细胞裂解液及其组分
在许多细胞内蛋白表达、纯化及蛋白-蛋白互作等免疫实验（如WB、IP、Co-IP、ChIP）中，细胞裂解是关键一步。 图片源自于网络 基本介绍 根据不同细胞类型、蛋白定位及下游应用，需要不同的细胞裂解液进行细
看完这些你就知道什么是TEV蛋白酶了
TEV蛋白酶是来源于烟草蚀纹病毒的nla蛋白酶中27kda的活性结构域，其氨基酸序列。tev蛋白酶具有很强的位点特异性，能够识别exxyxq(g/s)七氨基酸序列，常用序列的是glu-asn-leu-tyr-phe-gln-gly(或enlyfqg)，其切割位点在谷氨酰胺gln(p1)和甘氨酸gl
流式细胞计量术（基于荧光的蛋白质分析）实验
活细胞表面抗原的荧光染色（直接免疫荧光） 活细胞表面抗原的荧光染色（间接免疫荧光） 实验材料 细胞
流式细胞计量术（基于荧光的蛋白质分析）实验
活细胞表面抗原的荧光染色（直接免疫荧光） 活细胞表面抗原的荧光染色（间接免疫荧光） 实验材料 细胞
Preparation－of－human－platelets
Preparation of human platelets 1. Human blood was taken from drug-free volunteers on the day of the experiment using acidic citrate dextrose
B因子溶血活性的检测
将RRBC加入正常人血清中，可使B因子活化，激活补体旁路途径致使BRBC溶解。将正常人新鲜血清加热使B因子丧失活性（简称RB），旁路途径不能激活，当加入RRBC时不发生溶血。此时再加入含有B因子的待测血清，旁路途径即被激活，RRBC发生溶血反应。根据溶血程度可测定待测血清中B因子的活性。1、兔红细胞
在紫杉醇这种微管稳定剂存在时通过组装的方法分离微管
实验材料组织匀浆试剂、试剂盒PME 缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 对感兴趣的组织匀浆，每克组织加 1 ml PME 缓冲液。PME 缓冲液：0.1 mol/L PIPES，pH 6.92 mmol/L EGTA1 mmol/L MgSO41 mmol/L DTT ( 或 DTE)0.5 mmo
膜片钳技术在神经药理方面的应用（3）
２． 溶液的组成 (1) 电极液：根据记录的电流不同电极液的成分也不同。基本要求是等张的KCI 溶液，Ca2+ 浓度为10~100nmol (pCa 7~8)，pH 值7~7.4。这里介绍一个在全细胞记录模式时，通过改变保持电位，能分别记录到Na+、K+、Ca2+ 电流的电极液成分(mmol/
Urea－Lysis－Protocol
Urea lysis buffer 9M Urea, 2.5mM EDTA, 2.5mM EGTA, 1% DTE, 4% CHAPS make 10ml and aliquot 10x1ml, freeze at -70°C Lysate prepara
质粒DNA的去磷酸化实验
实验方法原理 去除 5' 端的磷酸基可防止质粒 DNA 的自身连接和环化。在体外连接反应中，DNA 连接酶可在邻近的两个分子间形成磷酸二酯键。但只有当一个分子的 5' 端带有磷酸基另一分子的 3' 端带有羟基时，这一反应才能完成。实验材料 小牛肠碱性磷酸酶（CIP) 或
去－H1－的寡聚核小体的凝胶过滤实验
实验材料精核微球菌核酸酶试剂、试剂盒MSBHSBNaClLSBCaCl2EGTA无蔗糖的 HSBSDS透析缓冲液仪器、耗材匀浆器冷冻超速离心机MWCO 透析袋梯度制备装置（用于离心）针头管子实验步骤1. 用 40 ml MSB 重悬约 2 ml 精核。4℃，10 000 g 离心 10 min（用
戊二醛固定细胞【Harvard－University】
Yu-Li Wang Lab,University of massachusetts Medical School(UMASS)http://ylwang.umassmed.edu/protocol/cfs/glutar.htmMaterials
免疫学实验C3肾炎因子介绍
C3肾炎因子介绍： C3肾炎因子(C3Nef)是旁路途径C3转化酶(C3b，Bb)的一种IgG类自身抗体，C3Nef与C3b、Bb按1∶1∶1比例结合，可以使此酶稳定，免遭C3b-INA和B1H的灭活，从而导致C3和其他补体成分经旁路途径活化。检测C3Nef时，一般将正常人血清与待测血清在EG
流式细胞计量术（基于荧光的蛋白质分析）实验2
活细胞表面抗原的荧光染色（间接免疫荧光）实验材料细胞试剂、试剂盒PBS 溶液叠氮化钠实验步骤1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，收获细胞。此程序比通常的胰蛋白酶消化时间长。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。操作始终在冰上进行。2. 用 4
临床化学检查方法介绍C3肾炎因子介绍
C3肾炎因子介绍： C3肾炎因子(C3Nef)是旁路途径C3转化酶(C3b，Bb)的一种IgG类自身抗体，C3Nef与C3b、Bb按1∶1∶1比例结合，可以使此酶稳定，免遭C3b-INA和B1H的灭活，从而导致C3和其他补体成分经旁路途径活化。检测C3Nef时，一般将正常人血清与待测血清在EGTA
Isolation－of－Microtubules－(Bovine－Brain)
LEVEL IIMaterialsFreshly removed bovine brain 2Wire sieve (tea strainer)Microtubule buffer (MT buffer)0.1 M MES (2-(N-Morphilino)ethanesulfonic acid)1
磷酸酶制备—蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP1和PP2A)
实验材料细胞试剂、试剂盒缓冲盐清洗液抽提缓冲液实验步骤一、组织/细胞制备和提取1. 配制下列溶液：(1) 缓冲盐清洗液：20 mmol/L 的 MOPS 缓冲液，pH 7.5（配成 100 ml）5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2) 抽
去－H1－的寡聚核小体的离心实验
实验材料精核微球菌核酸酶试剂、试剂盒MSBHSBNaClLSBCaCl2EGTA无蔗糖的 HSBSDS透析缓冲液仪器、耗材匀浆器冷冻超速离心机MWCO 透析袋梯度制备装置（用于离心）针头管子实验步骤1. 用 40 ml MSB 重悬约 2 ml 精核。4℃，10 000 g 离心 10 min（用
去－H1－的寡聚核小体的溶解和纯化实验
实验方法原理 实验材料 精核微球菌核酸酶试剂、试剂盒 MSBHSBNaClLSBCaCl2EGTA无蔗糖的 HSBSDS透析缓冲液仪器、耗材 匀浆器冷冻超速离心机 MWCO 透析袋梯度制备装置（用于离心）针头管子实验步骤 1. 用 40 ml MSB 重悬约 2 ml 精核。4℃，10 000 g
磷酸酶制备实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 缓冲盐清洗液抽提缓冲液实验步骤 一、组织/细胞制备和提取1. 配制下列溶液：(1) 缓冲盐清洗液：20 mmol/L 的 MOPS 缓冲液，pH 7.5（配成 100 ml）5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2
质粒DNA的去磷酸化实验
去除 5' 端的磷酸基可防止质粒 DNA 的自身连接和环化。在体外连接反应中，DNA 连接酶可在邻近的两个分子间形成磷酸二酯键。但只有当一个分子的 5' 端带有磷酸基另一分子的 3' 端带有羟基时，这一反应才能完成。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理
Routine－Culturing－of－ES－Cells
Cell are normally passaged every 2-3 days, this is important to avoid differentiation.Signs of differentiation are:-i) colonies are surrounded by flat
磷酸酶制备实验
蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A)膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）实验材料细胞 试剂、试剂盒缓冲盐清洗液
磷酸酶制备实验
蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP） 实验材料 细胞
通过组装/解聚从缺少组装驱动成分的缓冲液中分离微管
实验材料脑组织试剂、试剂盒PME 缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 收集脑组织（几百克）(1) 如果从屠宰场取脑（猪）① 只要美国地方检察官允许，在宰杀后尽快收集脑（猪 )。② 把脑一个一个地放在薄塑料袋里，立即浸入冰水混合物中，运到实验室。③ 在冰库里，研究者带着橡胶手套取出脑、表面的血管、血凝
梅特勒托利多DP5－光度电极
DP5 光度电极产品详细说明 描述 DP5 PhototrodeTM 是梅特勒-托利多公司出品的成熟的DP550和DP660光度电极的新型研发成果。DP5 PhototrodeTM 的独有特性开始滴定前操作人员可以选择不同的波长，便于指示不同的滴定应用，从而实现使用1支DP5 Phototrod