DAPI染色法的步骤
原来用dapi是用做原位杂交的配置的时候用灭菌水配置就可以了，以前用的浓度时1ml里面加2ul就可以了配置好的溶液保存在4℃就行，尽量避光，原液要用黑色的或锡箔纸包好放到-20℃为好原来是染载玻片上的染色体，直接滴到载玻片上就好了，之后用缓冲液洗净注意事项就是别沾到手上了，那个东西还是很毒的，染色的时候尽量避光，用个盖子之类的遮一下比较好......阅读全文
染色体显带技术_－显带（偏端霉素二脒基苯基吲哚显带)
Distamydn-DAPI 显带（偏端霉素-二脒基苯基吲哚显带)实验材料空气晾干的分裂中期染色体玻片试剂、试剂盒McIlvaine 缓冲液Distamycin A 染色液DAPI染色液镜油弱荧光仪器、耗材湿盒（如装有湿纸巾的Petri盘）盖玻片配有合适滤光片和物镜的荧光显微镜实验步骤展开
荧光信号放大TSA优秀替代品—PSA技术（二）
多种PSA™多重染色 PSA™系统经过设计，可与其他荧光发生器，细胞和组织染色技术以及其他PSA™成像套件兼容，从而可以同时可视化多个目标。与TSA和荧光二抗相比，PSA™的检测阈值较低，还可以检测在同一宿主物种中产生的，但信号之间无明显串扰的两个靶标。PSA™成像兼
Protocol－to－Count－Cell－Number－of－Preimplantation－Embryos
Protocol to Count Cell Number of Preimplantation Embryos using Nuclear Staining with Hoechst 33342 or DAPI Introduction The following is a simple pro
流式细胞计量术（DNA含量）实验_非固定细胞的无洗染色
实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶NST-DAPI 缓冲液MFM柠檬酸缓冲液DNA 染色 裂解溶液仪器、耗材尼龙筛实验步骤一、组织培养细胞的染色1. 通过对悬浮培养中的细胞倾析或对单层培养的细胞蛋白酶消化来收获细胞。计数细胞，800 g 慢速离心 3 分钟沉淀细胞。2. 细胞染色。3. 在 NST-DA
荧光检测技术及其配套软件Spectrum－Manager的应用
在生命科学领域，随着科研水平和实验手段不断的提高，荧光染色方法以其特异性强，使用相对于放射性元素更安全，检测越来越灵敏等特点，受到越来越多的研究人员的认可，并且在实验室中广泛应用，成为经常性的实验方法。 检测荧光方法和手段根据不同的实验要求和目的也多种多样，使用最多的还是荧光显微镜，荧光酶标仪，流式
如何进行免疫荧光三标？
做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。 一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标
一招变身检测荧光达人
在生命科学领域，随着科研水平和实验手段不断的提高，荧光染色方法以其特异性强，使用相对于放射性元素更安全，检测越来越灵敏等特点，受到越来越多的研究人员的认可，并且在实验室中广泛应用，成为经常性的实验方法。 检测荧光方法和手段根据不同的实验要求和目的也多种多样，使用最多的还是荧光显微镜，荧光酶标仪，流
微载体细胞计数的难题与解决方案
细胞和病毒生产的放大培养面临挑战。当需要生产量增加千倍时，细胞培养瓶对于工业规模生产是不可行的。微载体为生物反应器中贴壁细胞的生长提供了方便， 微载体充当贴壁细胞可附着的支架，允许它们增殖，而生物反应器使细胞-微载体复合体自由悬浮在培养基中。因此，贴壁细胞也可以像悬浮细胞那样生长，从而简化了放大培养
荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有：HO 33342 (Hoechst 33342），HO 33258 (Hoechst 33258),DAPI。三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的
CGH－Protocols－（四）
CGH Image acquisitionImages were acquired through a Zeiss Axiophot fluorescence microscope using a Plan NEOFLUAR oil objective x63, N.A. 1.25 (Zeiss,
与做荧光染色的同学共享些经验
Hoechst 33258染色固定液 50 ml Hoechst 33258染色液 50 ml 抗荧光淬灭封片液 5 ml 说明书 1 份 保存条件： 4℃保存，Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。本试剂盒自订购之日起六个月内有效。 注意事项： Ø 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。 Ø
如何选择最亮的荧光染料荧光染料亮度排行汇总（二）
荧光标记染料 图4.将 HeLa细胞与（Tubulin +）或不与（Tubulin-）小鼠抗微管蛋白一起孵育，然后与iFluor™488山羊抗小鼠IgG缀合物（绿色，左）或AlexaFluor®488山羊抗小鼠IgG缀合物（绿色，右）。细胞核用Hoechst 33
荧光显微镜最常用的滤光片
dapi紫外激发，看见的蓝色荧光；gfp的蓝激发，看见的绿色荧光；rfp的绿激发，红色荧光短波长激发出长波长的荧光紫外---蓝---绿---红---红外，波长越来越长
免疫荧光－玻片泡酸处理多长时间
第一天：1.在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；2.用4%的多聚甲醛固定爬片15min，PBS浸洗玻片3次，每次3min；3.0.5%TritonX-100(PBS配制)室温通透20min（细胞膜上表达的抗原省略此步骤）；4.PBS浸洗玻片3次，每次3min，吸水纸吸干PBS
荧光染料的科研应用
荧光染料，由于灵敏度高，操作方便，逐渐取代了放射性同位素作为检测标记，其广泛应用于荧光免疫，荧光探针，细胞染色等。包括特异性的DNA染色，用于染色体分析、细胞周期、细胞凋亡等相关研究。另有很多核酸染料在多色染色系统中是非常有用的复染剂，可作为背景对照，标记细胞核使细胞内结构的空间关系一目了然。免疫分
冰冻切片免疫荧光
实验概要冰冻切片免疫荧光实验原理抗原抗体结合主要试剂固定液、梯度蔗糖、磷酸盐缓冲液、封闭液、一抗、荧光标记的二抗、DAPI、荧光抗淬灭封片剂主要设备冰冻切片机、荧光显微镜或激光共聚焦显微镜实验材料组织切片实验步骤切片1.提取新鲜组织置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脱水：10%-20%-30%；3
细胞爬片免疫荧光实验步骤
第一天：1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min， PBS浸洗玻片3次，每次3min；3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min（细胞膜上表达的抗原省略此步骤）；4. PBS浸洗玻片3次，每次3 min
冰冻切片免疫荧光
实验原理抗原抗体结合主要试剂固定液、梯度蔗糖、磷酸盐缓冲液、封闭液、一抗、荧光标记的二抗、DAPI、荧光抗淬灭封片剂主要设备冰冻切片机、荧光显微镜或激光共聚焦显微镜实验材料组织切片实验步骤切片提取新鲜组织置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脱水：10%-20%-30%；3.冰冻包埋剂包埋并切片，切片
荧光染料的科研应用
荧光染料，由于灵敏度高，操作方便，逐渐取代了放射性同位素作为检测标记，其广泛应用于荧光免疫，荧光探针，细胞染色等。包括特异性的DNA染色，用于染色体分析、细胞周期、细胞凋亡等相关研究。另有很多核酸染料在多色染色系统中是非常有用的复染剂，可作为背景对照，标记细胞核使细胞内结构的空间关系一目了然。免疫分
细胞免疫荧光实验步骤
细胞免疫荧光主要用于蛋白定位研究和细胞内信号转导，细胞免疫荧光技术是利用免疫技术和荧光标记技术相结合，原理就是利用抗原-抗体反应之后，采用荧光标记，标记完成后，显微镜下观察细胞内某种抗原成分的多少，从而做出一个定位研究，也可以为细胞内信号传导提供一个明确的指导，细胞免疫荧光具有敏感性强、特异性高、速
细胞免疫荧光步骤
实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 多聚甲醛70%甲醇丙酮PBSTriton BSADAPI染液DABCOTris甘油仪器、耗材 玻片实验步骤 细胞爬片免疫荧光实验步骤第一天：1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min， PBS浸洗玻片3次
神经细胞培养前怎样用多聚赖氨酸包被6孔板
神经细胞培养前怎样用多聚赖氨酸包被6孔板。第一天：1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min， PBS浸洗玻片3次，每次3min；3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min（细胞膜上表达的抗原省略此步骤）
immunofluorescence－of－rabbit－antimurine－RELMα－by－Peprotech
实验概要The following protocol provides a method of immunofluorescence of rabbit anti-murine RELMα by Peprotech.实验步骤The following protocol used B6 mice
Cardiomyocyte－immun...
实验概要The following protocol provides a method describing a suggested protocol for sarcomeric actinin, ANP, ER and ERb fluorescent staining of car
Yeast－Nuclei－Isolation
This method gives yeast nuclei which look nearly purified microscopically. Nuclei isolated in this way do not give active transcription extracts when
认识荧光显微镜的光立方
什么是荧光? 荧光即为物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态，再回到低能状态时释放出的光，是非温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光，进入激发态, 发射出的长波光。 无论是物质的自发荧光、荧光染料还是融合表达的荧光蛋白，均需经过特定波长的光激发(激发光Excitation)，电子发
RNA－FISH－on－cultured－cells－in－interphase2
Post-labeling DNA processing and purificationQiagen PCR clean up to get rid of unused oligonucleotides;Add 20µl cot1DNA, 10µl ssDNA to compete for rep
StrataQuest定量分析方法：探索胞内原生生物与宿主细胞...1
StrataQuest定量分析方法：探索胞内原生生物与宿主细胞的关系探究宿主-病原体相互作用的特点是研究微生物与免疫学方向学科的重要方法。宿主细胞吞噬病原体后其表征将会改变。利用实时PCR仪或者ELISA的技术，测量与基因编码蛋白相关的行为是消除病原体还是免疫逃逸。多数研究都利用主要宿主细胞或者细胞
Cultex细胞暴露技术建立呼吸道过敏反应的人肺体外模型－2
图3：免疫细胞化学（A-C）和流式（D）的表面标记。A，B：ECs（A）和AMs（B）DAPI染色（蓝色信号）和抗-proSP-C（红色）。在ECs上检测到ProSP-C，但是在AMs上检测不到。C：DCs DAPI染色（蓝色信号）和CD86（红色）。大部分细胞CD86呈阴性（箭头）。 D：DCs
LSCM多重荧光标记
由于大部分实验都需同时观测两个或多个细胞内的组分，需要对细胞进行多重荧光标记。这时，研究者需要综合考虑实验目的、所使用的激光共聚焦显微镜配置和已有的实验材料。通常，激光共聚焦显微镜配备 4 个激光器(405nm 半导体固体激光器、氩离子激光器、543nm 氦/氖激光器或 561nm半导体固体激光器和