乙醇引起的蛋白质变性与沉淀的结果与解释
蛋白质的变性:蛋白质分子中的次级键被破坏。主要是氢键和离子键。甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂可以提供自己的羟基或羰基上的氢或氧去形成氢键,从而破坏了蛋白质中原有的氢键,使蛋白质变性。变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了,应为变性即意味着结构的永久改变。你的试验中乙醇的最终浓度是95%*1ml/3ml=32%,而且最后蛋白会再溶解。因此,这个实验不足以证明蛋白质变性。变性原因变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响,改变其分子内部结构和性质的作用。一般认为蛋白质的二级结构和三级结构有了改变或遭到破坏,都是变性的结果。能使蛋白质变性的化学方法有加强酸、强碱、重金属盐、尿素、丙酮等;能使蛋白质变性的物理方法有加热(高温)、紫外线及X射线照射、超声波、剧烈振荡或搅拌等。......阅读全文
为什么重金属会使蛋白质变性
重金属盐使蛋白质变性,是因为重金属阳离子可以和蛋白质中游离的羧基形成不溶性的盐,在变性过程中有化学键的断裂和生成,因此是一个化学变化。重金属沉淀的蛋白质常是变性的,但若在低温条件下,并控制重金属离子浓度,也可用于分离制备不变性的蛋白质。临床上利用蛋白质能与重金属盐结合的这种性质,抢救误服重金属盐中毒
已经变性的蛋白质上样溶液可以保存吗
如果是用SDS将蛋白溶液变性,4度可以保存几个月,-20度可以保存一年左右如果将变性蛋白冻干成干粉,可以保存三年没问题
蛋白质变性失去结晶能力是什么意思
蛋白质结晶是指在其溶液中由于溶剂溶解度的改变或其他原因,从原溶液中析出,通过分子间的作用力相互聚集形成的具有特定规格排列的析出物,即蛋白质晶体。故结晶的关键点在于待结晶物可析出,有结晶核,待结晶物为同种分子且空间结构相同。一般可以引起蛋白质变性的原因分为两类,分别是物理和化学因素两类。比如加热、加压
95度的酒精引起蛋白质变性可逆吗
95度的酒精引起蛋白质变性不可逆。蛋白质变性时,空间结构会受到破坏。如果变性程度比较轻,空间结构没有破坏,比如盐析时蛋白质被析出,这时空间结构没有破坏,一旦去除盐析环境,空间结构可以得到恢复,所以这部分蛋白质变性可逆。蛋白质变性也有较多不可逆的情况,比如蛋白质在高温的情况下,空间结构受到一定破坏,甚
新技术|让变性蛋白质“复活”的简便方法
圣彼得堡国立信息技术机械与光学(ITMO)大学和希伯来大学的化学家们找到了一种办法,使化学变性后的蛋白质重新恢复蛋白质结构。作者强调了该方法的通用性,它不仅适用于特定分子还适合多蛋白系统,在此以前没有人成功复原过复合酶。这项技术可简化用于阿尔茨海默症和帕金森治疗药物的生产步骤,降低生产成本。这项
变性的蛋白质离心后为什么会出现沉淀
蛋白变性后,2-4级结构被破坏,变为无序的线性结构。导致原来折叠在蛋白空间结构内部的疏水性氨基酸暴露出来。疏水性氨基酸在水溶液中会相互聚集从而产生沉淀。 这个应该是沉淀的主要原因。其实溶解是个挺复杂的过程,包括溶质与水分子的相互作用、各种基团、化学键的表现,但这些现在都不是很清楚。
重金属盐为什么会使蛋白质变性
重金属盐使蛋白质变性,是因为重金属阳离子可以和蛋白质中游离的羧基形成不溶性的盐,在变性过程中有化学键的断裂和生成,因此是一个化学变化。重金属沉淀的蛋白质常是变性的,但若在低温条件下,并控制重金属离子浓度,也可用于分离制备不变性的蛋白质。临床上利用蛋白质能与重金属盐结合的这种性质,抢救误服重金属盐中毒
蛋白质变性后会复性吗?什么条件下?
蛋白质在受到光照、热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时,次级键受到破坏,导致天然构象的破坏,使蛋白质的生物活性丧失。如果变性条件剧烈持久,蛋白质的变性是不可逆的。如果变性条件不剧烈,这种变性作用是可逆的,说明蛋白质分子内部结构的变化不大。这时,如果除去变性因素,在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和
蛋白质溶液中加入丙酮来沉淀蛋白会导致蛋白质变性吗
蛋白质溶液中加入丙酮来沉淀蛋白,这不会导致蛋白质变性蛋白质沉淀的定义:蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀(precipitation),变性蛋白质一般易于沉淀,但也可不变性而使蛋白质沉淀,在一定条件下,变性的蛋白质也可不发生沉淀。蛋白质沉淀的方法:盐析法 ——多用于各种蛋白质和酶的分离纯
利用静态多重光散射(SMLS)监测蛋白质变性过程
介绍蛋白质被用在很多领域,比如食物,制药学、生物化学、生物学,而且经常是比较高的浓度。医学领域为了药物适合长期服用或减少注射次数,蛋白浓度通常较高,这时科学仪器表征方法很大程度上受到高度浓缩的蛋白质分散性的挑战。高浓度蛋白质悬浮液出现不稳定性的影响因素有温度,盐浓度和氨基酸加量等。蛋白质的变性程度经
核酸的变性的变性温度
热变性一半时的温度称为熔点或变性温度,以Tm来表示。DNA的G+C含量影响Tm值。由于G≡C比A=T碱基对更稳定,因此富含G≡C的DNA比富含A=T的DNA具有更高的熔解温度。根据经验公式xG+C =(Tm -69.3)× 2.44可以由DNA的Tm值计算G+C含量,或由G+C含量计算Tm值。
低温下高浓度乙醇不会使蛋白质变性,对吗
问题有歧义,高浓度是多少呢?乙醇使蛋白质变性的浓度最好效果在75%左右,低温下的酒精分子的运动就缓慢,但是有一定的化学作用~~
低温下高浓度乙醇不会使蛋白质变性,对吗
乙醇使蛋白质变性的浓度最好效果在75%左右,低温下的酒精分子的运动就缓慢,但是有一定的化学作用
乙醇引起的蛋白质变性与沉淀的结果与解释
蛋白质的变性:蛋白质分子中的次级键被破坏。主要是氢键和离子键。甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂可以提供自己的羟基或羰基上的氢或氧去形成氢键,从而破坏了蛋白质中原有的氢键,使蛋白质变性。变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了,应为变性即意味着结构的永久改变。你的试验中乙醇的最终浓度是95%*1ml/3ml=3
Science推翻长期以来的定论:蛋白质变性全新理论
生物通报道:敲开一个鸡蛋,滑入热煎锅中,几乎立刻透明和滑溜的蛋清就变白,变硬,在这个过程中我们观察的煎鸡蛋过程,就是生活中十分常见的蛋白质变性这一重要的生化现象。 细胞中蛋白质则是线状分子,缠绕在一起组成蛋白质特异性结构:有些球形,有些是管状的,各不相同。这些结构都会在变性过程中崩解,蛋白质再
乙醇引起的蛋白质变性与沉淀的结果与解释
蛋白质的变性:蛋白质分子中的次级键被破坏。主要是氢键和离子键。甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂可以提供自己的羟基或羰基上的氢或氧去形成氢键,从而破坏了蛋白质中原有的氢键,使蛋白质变性。变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了,应为变性即意味着结构的永久改变。你的试验中乙醇的最终浓度是95%*1ml/3ml=3
蛋白质变性后,溶解度下降原因是什么
蛋白质变性后在水中溶解度肯定是降低的。变性会破坏了蛋白质的分子内氢键,使它的空间结构被破坏,变成了氨基酸长链,这样链与链之间容易形成分子间氢键而聚集成团,不易被溶解。 当然如果这个溶解度不是针对于水而是针对于其他溶剂,也有可能蛋白质变性后,为什么溶解度不降低反而升高。这可能和相似相溶的原理有关系。
western-blot-的蛋白质一定要变性才能和抗体结合吗
不一定。取决于选择的抗体识别的表位是什么样的。有些抗体会标明验证过哪些实验,例如WB,ELISA等,如果标有ELISA,IHC之类的,说明抗体可以识别天然状态下的蛋白,不用变性也可以检测。但是如果抗体只标注做过WB就需要当心,因为很可能这个抗体只能检测到变性以后的线性表位,如果蛋白没有变性,有高级结
western-blot-的蛋白质一定要变性才能和抗体结合吗
不一定。取决于选择的抗体识别的表位是什么样的。有些抗体会标明验证过哪些实验,例如WB,ELISA等,如果标有ELISA,IHC之类的,说明抗体可以识别天然状态下的蛋白,不用变性也可以检测。但是如果抗体只标注做过WB就需要当心,因为很可能这个抗体只能检测到变性以后的线性表位,如果蛋白没有变性,有高级结
如何将蛋白质在不变性的前提下进行浓缩
1:少量的盐(如硫酸铵、硫酸钠等)能促进蛋白质的溶解。2:如果向蛋白质水溶液中加入浓的无机盐溶液,可使蛋白质的溶解度降低,而从溶液中析出,这种作用叫做盐析。这样盐析出的蛋白质仍旧可以溶解在水中,而不影响原来蛋白质的性质,因此盐析是个可逆过程.利用这个性质,采用分段盐析方法可以分离提纯蛋白质.
什么核酸变性?
在一定理化因素作用下,核酸双螺旋等空间结构中碱基之间的氢键断裂,变成单链的现象称为变性(denaturation)。引起核酸变性的常见理化因素有加热、酸、碱、尿素和甲酰胺等。在变性过程中,核酸的空间构象被破坏,理化性质发生改变。由于双螺旋分子内部的碱基暴露,其A260值会大大增加。A260值的增加与
甲醛变性电泳
实验概要本实验介绍了RNA电泳(即甲醛变性电泳)的原理及操作步骤等。实验原理提取样品的总RNA后,一般根据RNA的凝胶电泳图来判断RNA的质量。由于RNA容易形成二级结构,因此常用甲醛变性胶来进行RNA电泳,得到的电泳图能真实反映RNA的质量状况。将RNA通过凝胶电泳使之在凝胶中分离出来,通过加入标
还原/非还原、变性/非变性SDS具体有什么不同
SDS是一种有效的变性剂,它能够断裂蛋白质分子的氢键和疏水作用,这个是SDS的一般原理,这也就是所讲的还原性SDS,这也是最有效的一种,因为键的断裂伴随的是蛋白质分子的伸展,这样我们的SDS就可以根据蛋白质的情况结合,从而把我们的蛋白质分子带上负电荷,可以电泳。有一点就是这是我们讲的还只是SDS。并
还原/非还原、变性/非变性SDS具体有什么不同
SDS是一种有效的变性剂,它能够断裂蛋白质分子的氢键和疏水作用,这个是SDS的一般原理,这也就是所讲的还原性SDS,这也是最有效的一种,因为键的断裂伴随的是蛋白质分子的伸展,这样我们的SDS就可以根据蛋白质的情况结合,从而把我们的蛋白质分子带上负电荷,可以电泳。有一点就是这是我们讲的还只是SDS。并
什么是变性DNA?
中文名称变性DNA英文名称denatured DNA定 义由于物理(如过热)或化学(如加入尿素)等因素的影响,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、双链的螺旋结构,而成为松散的和单链的结构。去除变性因素,DNA一般可以复性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
椎间盘变性的简介
椎间盘 椎间盘是位于人体脊柱两椎体之间,由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板,是透明软骨覆盖于椎体上,下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成,位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠,使纤维环成为坚实的组织,能承受较大
变性DNA的定义
中文名称变性DNA英文名称denatured DNA定 义由于物理(如过热)或化学(如加入尿素)等因素的影响,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、双链的螺旋结构,而成为松散的和单链的结构。去除变性因素,DNA一般可以复性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
什么是DNA变性?
DNA变性,是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,双链变成单链,使核酸的天然构象和性质发生改变,但不涉及其一级结构的改变。凡能破坏双螺旋稳定的因素(如加热、极端的pH、有机试剂如甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等)均可引起核酸分子变性。变性后的DNA常发生一些理化及生物学性质的改变:
方案3-多蛋白质复合体的非变性琼脂糖凝胶电泳实验
实验材料含有目标蛋白的细胞提取物试剂、试剂盒琼脂糖凝胶脱色液凝胶染色液甘油2 X 上样缓冲液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材玻璃纸锥形瓶凝胶电泳装置微量离心过滤装置小型离心机微波炉Ultrafree-DA 装置实验步骤一、非变性凝胶的制备在非变性凝胶缓冲液中,制备水平的 0.8% 琼脂糖凝胶,规格约
一文读懂Native-ESIMS如何监测SEC分离过程中蛋白质变性
尺寸排阻色谱(SEC)与非变性电喷雾电离质谱(Native ESI-MS)联用技术是研究天然蛋白质的有效工具。但已报道的研究大多集中于技术应用,并未验证蛋白质在所用分离条件下是否处于原始状态,也未评估SEC洗脱条件对蛋白质-固定相的相互作用和蛋白质变性的影响。近期发表在Analytical Ch