前沿显微成像技术专题之:光片荧光显微镜(三)

关于光片显微镜,通过前面第一,第二期的介绍,相信大家已经有了较为全面的了解。在本期中,我们将介绍另外几种光片显微技术,它们和第二期最后介绍的晶格光片显微镜一样,都是对传统光片显微技术的改进,以满足更高的成像要求。最后,我们将为大家总结如何挑选适合光片显微镜的科学相机。倒置平面照明显微镜 (d)iSPIM双向倒置平面照明显微镜(Dual-view inverted SPIM,diSPIM)是由NIH的Hari Shrof 实验室和 Applied Scientific Instrumentation (ASI) 公司合作开发的。它本质上是L-SPIM,通过柱形透镜来产生光片,不同的是它是倒置的,两个相互垂直,规格相同的物镜位于样品上方,浸入介质中,轮流进行照明和成像,可以达到各个方向上相同的分辨率(330nm)。iSPIM (inverted SPIM)与之原理相同,只是采用单向照明与成像,因此和其他传统光片系统一样,轴向分辨率要......阅读全文

前沿显微成像技术专题之:光片荧光显微镜(二)

上一篇简单介绍了光片荧光显微镜的一些基本知识,光片显微镜的诞生大大拓展了生命科学的研究视野,但它也有一些需要克服的天生缺陷和技术难点。本期就让我们从这里开始,一步步追寻光片显微镜的发展足迹。静态光片和技术难点正如我们在上一期提到的那样,传统的光片是由高斯光束通过一个柱形透镜来实现的。 最初,只用一个

前沿显微成像技术专题之:光片荧光显微镜(一)

在过去二十多年中,光学显微成像技术发展迅速,不断突破传统极限。生命科学研究,要求成像系统在不影响生物活性的前提下,实现更大视野,更高分辨率,更高速度的三维成像。这也意味着对成像探测器 - 科研相机的要求也越来越高。从本周开始,我们将为大家带来前沿显微成像技术专题系列,和大家一起探讨前沿的显微成像技术

前沿显微成像技术专题之:光片荧光显微镜(三)

关于光片显微镜,通过前面第一,第二期的介绍,相信大家已经有了较为全面的了解。在本期中,我们将介绍另外几种光片显微技术,它们和第二期最后介绍的晶格光片显微镜一样,都是对传统光片显微技术的改进,以满足更高的成像要求。最后,我们将为大家总结如何挑选适合光片显微镜的科学相机。倒置平面照明显微镜 (d)iSP

光片成像模块升级共聚焦显微镜:成像更快速光毒性更低

对生物样品进行快速可靠的原位成像以揭示与复杂的多细胞生物相关的动态过程一直都是光学成像的一大目标。传统的激光共聚焦显微镜虽然具有优异的3D荧光成像功能,提供了非常高的空间分辨率,但是在某些实验中,成像速度不够快和光漂白问题依然不容忽视。光片技术的提出就很好地解决了这些问题,同时还保有优异的空间分辨率

荧光成像与高光成像区别

荧光成像与高光成像区别如下:1、原理:荧光成像是利用荧光标记的分子在激发后发出特定波长的光来成像,而高光成像是基于样本的反射或透射光强度的差异来成像。2、样本处理:荧光成像需要在样本中引入荧光标记物,通常是通过染色或基因工程技术来实现,而高光成像则不需要对样本进行特殊处理,直接观察样本的自然反射或透

微型光片发生器可用于大脑活动光片成像

  让神经科学家能够记录和量化活体大脑功能活动的工具需求量很大。传统上,研究人员使用功能磁共振成像等技术,但这种方法不能记录高空间分辨率的神经活动或运动的受试者。近年来,光遗传学工具利用光来控制神经元,并记录组织中的信号,这些组织经过基因改造后可以表达光敏和荧光蛋白。然而,现有的脑光信号成像技术在大

荧光显微镜:内置了照明和滤光片用于成像

荧光显微镜的基础荧光显微镜非常适用于测量和分析各种光波长的吸收和激发。内置荧光显微镜设置利用平板分光器将照明器的光源转折平行光学路径。从机械的角度来说,此设置的复杂程度低于其他数字视频显微镜系统,其设置就如图1所示。与大多数光学系统一样,此系统同样具备了传感器、光学组件以及受检测物体。基于本次讨论目

荧光显微镜:内置了照明和滤光片用于成像

相机技术的发展进步使生物应用和工业应用中的显微镜发生了革命性的变化。因此,生物学家或工程师再也无需耗费数小时使用目镜进行观察和不断地对焦。此外,当今的数字视频显微镜系统也简化了数据记录和数据分析的流程。更多有关此系统类型的一般信息,请参阅数字视频显微镜调整件设置。要真正了解数字视频显微镜系统的好处,

光学显微镜落射光激发的荧光法成像光路系统的调整方法介绍

  光学显微镜落射光激发的荧光法简称为落射荧光法,是近代显微镜检术中新发展出来的一种强有力的反差增强法。它将激发荧光用的光源改在物镜的上方,光由物镜上方经反光镜射入物镜去激发样品,从样品上被激发的荧光经物镜成像并穿透反光镜而由目镜观察。该方法较简便,效率高,50W的光源强度比透射荧光法的250W还强

光学显微镜成像光路系统的调整

p.p1 {margin: 0.0px 0.0px 0.0px 0.0px; line-height: 19.0px; font: 13.0px 'Helvetica Neue'}显微镜成像光路系统的调整,是根据不同显微镜检术的需要而进行的。所谓显微镜检术(microscopy),概括而言就是以显微

平铺光片显微镜如何实现均一高分辨率成像

随着组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展,3D荧光成像技术实现了快速获取3D组织信息的能力。光片显微镜由于其独特的3D成像能力以及更快的成像速度逐渐成为生命科学研究中3D荧光成像的强有力工具。光片显微镜的实现方式是将激发光片限制在探测焦平面内,使得激发光对样品的光漂白和光毒性降到最低,具有高的三维

认识荧光显微镜的光立方

什么是荧光? 荧光即为物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态,再回到低能状态时释放出的光,是非温度辐射光——冷光。即:物质吸收短波光,进入激发态, 发射出的长波光。 无论是物质的自发荧光、荧光染料还是融合表达的荧光蛋白,均需经过特定波长的光激发(激发光Excitation),电子发

认识荧光显微镜的光立方

什么是荧光?荧光即为物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态,再回到低能状态时释放出的光,是非温度辐射光——冷光。即:物质吸收短波光,进入激发态, 发射出的长波光。无论是物质的自发荧光、荧光染料还是融合表达的荧光蛋白,均需经过特定波长的光激发(激发光Excitation),电子发生迁移后,能

光片显微镜的前世今生

光片荧光显微镜(Light Sheet Fluorescence Microscopy, LSFM)的概念产生于1903年,但此后很长时间并无太多发展。上世纪九十年代,华盛顿大学的Francis Spelman实验室为了对小鼠毛细胞的结构和耳蜗的其他特性进行定量测量,发展了一系列实验方法

植物荧光成像仪——荧光成像简介

  荧光是自然界常见的一种发光现象。荧光是光子与分子的相互作用产生的,这种相互过程可以通过雅布隆斯基(Jablonslc)分子能级图描述:大多数分子在常态下,是处于基态的最低振动能级So,当受到能量(光能、电能、化学能等等)激发后,原子核周围的电子从基态能级So跃迁到能量较高的激发态(第一或第二激发

植物荧光成像仪——荧光成像原理

  荧光是自然界常见的一种发光现象。荧光是光子与分子的相互作用产生的,这种相互过程可以通过雅布隆斯基(Jablonslc)分子能级图描述:大多数分子在常态下,是处于基态的最低振动能级So,当受到能量(光能、电能、化学能等等)激发后,原子核周围的电子从基态能级So跃迁到能量较高的激发态(第一或第二激发

植物多光谱荧光成像系统UV紫外光激发多光谱成像技术

  UV紫外光激发多光谱荧光成像技术:长波段UV紫外光(320nm-400nm)对植物叶片激发,可以产生具有4个特征性波峰的荧光光谱,4个波峰的波长为蓝光440nm(F440)、绿光520nm(F520)、红光690nm(F690)和远红外740nm(F740),其中F440和F520统称为BGF,

x光成像和电子显微镜成像原理一样吗

电子显微镜是根据电子光学原理,用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜,使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器.电子显微镜的分辨能力以它所能分辨的相邻两点的最小间距来表示.20世纪70年代,透射式电子显微镜的分辨率约为0.3纳米(人眼的分辨本领约为0.1毫米).现在电子显微镜最大放大倍率超过30

荧光显微镜是什么光路系统?

在显微镜下,由于某些物质的光学特性,普通正置显微镜不能看清楚其内部结构,而其拥有另外一种特性,比如细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,利用这种物质的光学特性,研发出了专业的显微显示设备,即荧光显微

荧光显微镜的落射光装置

  新型的落射光装置是从光源来的光射到干涉分光滤镜后,波长短的部分(紫外和紫蓝)由于滤镜上镀膜的性质而反射,当滤镜对向光源呈45。倾斜时,则垂直射向物镜,经物镜射向标本,使标本受到激发,这时物镜直接起聚光器的作用。同时,滤长长的部分(绿、黄、红等),对滤镜是可透的,因此,不向物镜方向反射,滤镜起了激

光学显微镜透射光相差法成像光路系统的调整方法介绍

  透射光相差法是现代显微镜检术中的一种反差增强法。  一、基本部件:相差物镜、明视野与相差兼用的多用途聚光镜、对中望远镜、绿色滤光片。  二、调整方法:  a. 在库勒照明系统调整好的基础上,用明视野方法把样品调焦清晰;  b. 把聚光镜转到Ph1对准转盘刻度线位置,选用10×相差物镜,换上待观察

ZEISS-Lightsheet-7光片显微镜共享

仪器名称:ZEISS Lightsheet 7光片显微镜仪器编号:A23000102产地:德国生产厂家:ZEISS型号:Lightsheet7出厂日期:20230510购置日期:20231010所属单位:医研院>生物医学测试中心>共享仪器平台>透明化制样与成像机组放置地点:生物技术馆4110固定电话

荧光显微镜成像质量的决定因素

荧光光学系统的成像质量主要取决于像的衬度和像的亮度,像的衬度是由样品中激发出的荧光与背景上观察到的光之比决定的。背景光包括透过截止激发光的滤色片的杂散激发光,样品组织成分的自发荧光和光学系统的自发荧光和杂散光,在荧光显微术中尽全力要解决的是既获得最佳的像衬度,同时又维持像有足够亮度,这两者往往是矛盾

光学显微镜的主要观察方法之荧光观察

荧光现象荧光是指荧光物质在特定波长光照射下,几乎同时发射出波长更长光的过程(图1)。当特定波长(激发波长)的光照射一个分子(如荧光团中的分子)时,光子能量被该分子的电子吸收。接着,电子从基态(S0)跃迁至较高的能级,即激发态(S1’)。这个过程称为激发①。电子在激发态停留10-9–10-8秒,在此过

荧光成像系统

对完全校准好的荧光成像系统,当用不同的滤色镜组时,样品上一个点在检测器上精确成像为一个点,也就是像素对像素。然而,不同颜色的通道 merge 时,物镜的色差校正不够、滤镜光路没有完全对准都会使得荧光信号之间的记录有差错。对具有复杂图案的图像或明暗信号相混的图像,这个可能就检测不到。会得出这样的结论:

荧光成像系统

用荧光显微镜进行3D球状体荧光成像时,需要进行仪器设置优化和使用高级功能才能得到更好的成像结果。对球状体进行Z轴层扫时,需要选择合适的物镜并进行合适地聚焦才能拍出更清晰的图片。EVOS细胞成像系统和配套的CellesteTM成像分析软件可以完美地对球状体的大小、结构和蛋白表达水平进行定性和定量分析。

荧光显微镜的落射光装置简介

  新型的落射光装置是从光源来的光射到干涉分光滤镜后,波长短的部分(紫外和紫蓝)由于滤镜上镀膜的性质而反射,当滤镜对向光源呈45。倾斜时,则垂直射向物镜,经物镜射向标本,使标本受到激发,这时物镜直接起聚光器的作用。同时,滤长长的部分(绿、黄、红等),对滤镜是可透的,因此,不向物镜方向反射,滤镜起了激

如何选择合适的光源获得优质的荧光成像

  荧光显微镜是利用特定波长的激发光照射被检物体产生荧光进行镜检的显微光学观测技术,已有100多年历史。在生物医学领域应用广泛,大多数实验室都有配备高端或者常规的显微成像系统,荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有

光控荧光染料的超分辨成像研究获新进展

  近日,华东理工大学费林加诺贝尔奖科学家联合研究中心与中科院上海药物研究所、国家蛋白质中心、美国得克萨斯大学奥斯丁分校以及英国巴斯大学合作,在酶激活型光控荧光染料的超分辨成像研究中取得重要进展,研究成果以“光致变色荧光探针策略实现生物标志物超分辨成像”为题发表于《美国化学会志》。 酶是人体不可

显微成像小课堂丨宽场荧光显微镜

  在活体细胞成像应用中,宽场荧光显微镜有助于观察放置于显微镜载物台上特定的环境室中生长的粘附细胞的动力学特性。在最基本的配置中,配备有EPI荧光照明的标准倒置组织培养显微镜与区域阵列检测器系统(通常是CCD摄像机)、合适的荧光滤色片和光闸系统耦合,以限制细胞过度暴露于有害的激发光。基本荧光显微镜依