前沿显微成像技术专题——转盘式共聚焦显微镜（1）
传统的荧光显微技术在生物成像领域有两个难以克服的挑战：一是对生物样品的结构做3D成像。在传统宽场荧光显微镜中，照明光会照亮光路上的整个样品，来自非焦平面的杂散光信号也会被成像物镜收集到（图1），干扰所要观察的样品信号，不但降低横向分辨率，轴向分辨率也只能达到2.5µm左右，比大多数生物结构都要大，因此很难对样品3D结构清晰而准确地成像；另一个挑战是对样品内部结构清晰成像。在观察细胞内部活动时，细胞膜的荧光信号会对成像产生极大的干扰。图1 小鼠肾脏切片（厚度20µm）分别在 (a) 宽场和 (b) 荧光共聚焦显微镜下的成像效果。哺乳动物上皮细胞（厚度50µm）分别在 (c) 宽场和 (d) 荧光共聚焦显微镜的成像效果。Scale bar: 20µm。(Adapted from Jonkman and Brown 2015)如何排除这些来自非焦平面的干扰信号呢？早在1953年，美国学者马文·明斯基就提出了“共聚焦”的构想。经过30年......阅读全文
奥林巴斯－－SpinSR－转盘共聚焦显微成像系统
仪器名称：奥林巴斯SpinSR转盘共聚焦显微成像系统仪器编号：21019132产地：日本生产厂家：奥林巴斯型号：SpinSR出厂日期：购置日期：2021-09-08样品要求：样品为玻片、细胞皿或多孔板。使用仪器前，请保持样品清洁；使用仪器时，请脱下手套。预约说明：麦戈文转盘共聚焦显微镜每月最后一周的
快速转盘共聚焦显微镜
什么是快速转盘共聚焦显微镜？它有什么特点？又能够应用于什么领域呢？快速转盘共聚焦显微镜，是一种利用高速旋转的多尺寸空间针孔阵列（转盘）过滤掉非焦平面光线，利用高精度 Z 轴扫描部件对样品进行高度方向扫描，从而快速获得样品表面三维形貌的显微镜。
前沿显微成像技术专题－——－转盘式共聚焦显微镜（2）
上一篇文章介绍了转盘式共聚焦显微镜的基本原理和技术特点，本篇主要介绍一些不同的转盘共聚焦系统。常见转盘共聚焦系统目前市场上最常见的是由日本Yokogawa（横河电机）公司生产的 CSU系列转盘系统，主流转盘共聚焦显微镜多使用的是这一系列。正如在前文中提到的，它由两个同轴排列的针孔圆盘组成，中间装有一
前沿显微成像技术专题——转盘式共聚焦显微镜（1）
传统的荧光显微技术在生物成像领域有两个难以克服的挑战：一是对生物样品的结构做3D成像。在传统宽场荧光显微镜中，照明光会照亮光路上的整个样品，来自非焦平面的杂散光信号也会被成像物镜收集到（图1），干扰所要观察的样品信号，不但降低横向分辨率，轴向分辨率也只能达到2.5µm左右，比大多数生物结构都要大，因
共聚焦显微镜中荧光团的共定位
在多标荧光样品图像中，因两个或多个荧光团在显微结构中距离很近，经常会有发射信号叠加，这种效应就称为共定位。目前，高特异性合成荧光团和经典免疫荧光技术的应用、精密光切技术的应用、共聚焦和多光子显微镜提供的数字图像处理技术等大大提高了生物样品中共定位检测的能力。
Evident－SpinSR－超分辨转盘共聚焦显微镜
仪器名称：SpinSR 超分辨转盘共聚焦显微镜仪器编号：A23000109产地：日本生产厂家：Evident型号：SpinSR出厂日期：20230401购置日期：20221226样品要求：容器底壁需为0.17mm厚玻璃材质，如玻片（盖玻片封片）、共聚焦小皿、共聚焦孔板、或其他共聚焦专用容器，或联系仪
SpinSR－高分辨转盘共聚焦显微镜共享
仪器名称：高分辨转盘共聚焦显微镜（SpinSR）仪器编号：A23000089产地：日本生产厂家：日本型号：SpinSR出厂日期：20231008购置日期：20231008样品要求：共聚焦拍摄的样品均可。预约说明：1. 全固体5色激光器：405nm，488nm，561nm，640nm，514nm，
SpinSR－超分辨转盘共聚焦显微镜共享
仪器名称：SpinSR 超分辨转盘共聚焦显微镜仪器编号：A23000109产地：日本生产厂家：Evident型号：SpinSR出厂日期：20230401购置日期：20221226所属单位：医研院>生物医学测试中心>共享仪器平台>共享平台光镜机组放置地点：生物技术馆1102B固定电话：010-6279
Operetta－CLS高内涵快速转盘共聚焦成像分析系统共享
仪器名称：Operetta CLS高内涵快速转盘共聚焦成像分析系统仪器编号：A23000059产地：英国生产厂家：PerkinElmer型号：Operetta CLS出厂日期：20230817购置日期：20221227所属单位：医研院>生物医学测试中心>细胞生物学平台>细胞平台光镜机组放置地点：医学
快速转盘共聚焦显微镜－Smartproof5－的特点
快速转盘共聚焦显微镜 Smartproof5 的特点：高速扫描，扫描速度大大快于基于点扫描原理的激光共聚焦显微镜极大的操作简便性与新一代软件图形界面拥有各种国际标准的分析测量软件，能够满足材料表面表征和分析的需求稳固设计，卓越的光学性能，精确的测量结果快速转盘共聚焦显微镜在工业领域有着广泛的应用，如
清华大学仪器共享平台奥林巴斯SpinSR转盘共聚焦显微成像系统
仪器名称：奥林巴斯SpinSR转盘共聚焦显微成像系统仪器编号：21019132产地：日本生产厂家：奥林巴斯型号：SpinSR出厂日期：购置日期：2021-09-08所属单位：生命学院>清华-IDG/麦戈文脑科学共享仪器开放实验室放置地点：生物医学馆U6039固定电话：010-62798607固定手机
共聚焦图中对荧光团共定位
正如上面所讨论的，在共聚焦图中对荧光团共定位的定量测定，可通过散点图和感兴趣区域的信息获得。从整个散点图的信息，可获得很多变量值。Pearson′s 系数就是用于分析整个散点图的诸多变量中的一个，为描述两幅图之间重叠程度，在识别一幅图像和另一幅图像的匹配程度上， Pearson′s, R(r)系数是
共激光扫描共聚焦显微镜
共激光扫描共聚焦显微镜（Laser scanning confocal microscope，LSCM）是一种先进的分子生物学和细胞生物学研究仪器。它在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置，结合数据化图像处理技术，采集组织和细胞内荧光标记图像，在亚细胞水平观察钙等离子水平的变化，并结合电生理等技术
清华大学仪器共享平台Andor－转盘共聚焦显微镜（Dragonfly）
仪器名称：Andor转盘共聚焦显微镜（Dragonfly）仪器编号：22015934产地：英国生产厂家：ANDOR型号：Dragonfly出厂日期：购置日期：2022-09-15样品要求：拍摄长时程需将细胞贴壁培养于玻底厚度为0.17微米的共聚焦小皿中，最佳小皿直径为35mm。对悬浮细胞拍摄前优先进
再度升级！安捷伦－BioTek－共聚焦微孔板成像检测系统引入水镜和新型共聚焦转盘技术
安捷伦近日宣布在 BioTek Cytation C10 共聚焦微孔板成像检测系统中引入水镜和新型共聚焦转盘技术。这些技术通过减少对活细胞样品的有害影响来提高组织和 3D 细胞球体等较厚样品的成像清晰度，从而改善图像质量和数据结果。在光学显微镜中，水镜技术是在物镜和样本之间自动注水并形成稳定持续的水
激光扫描共聚焦荧光显微镜的成像原理和基本结构
激光扫描共聚焦荧光显微镜是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、先进的分子细胞生物学的分析仪器。主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化，定量分析，以及实时定量测定等。 成像原理 采用点光源照射标本，在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点，该点被照射后发出的
显微成像小课堂丨告别非焦平面信息干扰
虽然我们常说的分辨率指的焦平面上的分辨率（即XY方向），决定分辨率高下的决定因素是物镜的数值孔径，但是其实在宽场荧光显微镜中，样本中整个被照亮的区域都会发射出荧光，这些非焦平面上的荧光其实对于焦平面上发射出的荧光，也就是我们真正关注的信息来说就是一种干扰，这也可以理解为在Z方向上，也是有分辨率的
共聚焦显微镜之转盘式扫描与单点扫描的区别
共焦显微镜从产生至今获得了巨大的发展，扫描方式从最初的狭缝扫描方式（扫描速度较快，图像分辨率不高），到阶梯式扫描技术（提高了图像分辨率，标本制备要求太高），再到驱动式光束扫描器（扫描速度较快，符合共聚焦原理）。至今又产生了新的类型，如针孔阵列盘式（简称转盘式）激光共聚焦显微镜。 转盘式激光共聚焦
共聚焦显微镜的共焦显微技术
共聚焦显微镜有较高的分辨率，而且能观察到样本随时间的变化。因此，共聚焦显微技术在生物学研究领域起着不可或缺的作用。以下为共焦显微技术的几个主要应用方面： （1）组织和细胞中荧光标记的分子和结构的检测： 利用激光点扫描成像，形成所谓的“光学切片”，进而可以利用沿纵轴上移动标本进行多个光学切片的叠加
关于共聚焦激光扫描显微的不同类型介绍
1、共聚焦激光扫描显微镜使用多个镜子（通常沿x轴和y轴线性扫描2或3个）来扫描样品上的激光，并通过固定的针孔和检测器“扫描”图像。 2、旋转盘（Nipkow盘）共焦显微镜在盘上使用一系列移动针孔来扫描光点。由于一系列针孔平行扫描一个区域，因此与激光扫描显微镜相比，允许每个针孔在特定区域上悬停更
共聚焦扫描显微镜的成像原理
采用点光源照射标本，在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点，该点被照射后发出的荧光被物镜收集，并沿原照射光路回送到由双向色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔，分别称为照明针孔和探测针孔。两者的几何尺寸一致，约100-200nm；相对于焦平面上的光点，两者是共
共焦显微镜的原理及成像技术
从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上，如果物体恰在焦点上，那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源，这就是所谓的共聚焦，简称共焦。其意义是：通过移动透镜系统可以对一个半透明的物体进行三维扫描。共聚焦显微镜能提供无比准确的三维成像，以及对亚细胞结构和动力学过程的准确测试。共焦显微镜在反射光的
用普通共聚焦显微镜实现超分辨率单分子荧光成像
传统的细胞及其内部分子显微观察通常使用荧光染料，然后再用不同分辨率的显微术照亮单个分子和与其互动的其他物质。如下图所示，普通共聚焦显微镜和超分辨率显微镜的精准度差异一目了然。（普通共聚焦显微镜观察图，比例尺10μm。图片来自发表文章DOI: 10.1038/s41467-017-00688-0）（随
共聚焦显微镜成像景深大的特点
本次实验所使用的KeyenceVK-250XCOLOR 3D激光扫描共聚焦显微镜可同时使用普通的光学成像模式与共聚焦模式对样品进行成像，故通过对比两种模式下成像的差异，来验证共聚焦显微镜成像景深大的特点。同时仪器亦可同时使用激光与传统光源成像，也对比在特殊样品下，使用激光光源的单色光成像的优异性。通
双色同步成像在荧光共定位等成像实验中的应用（二）
双色同步成像——一台Flash 4.0 LT相机作两台用 采用W-View GEMINI这样的双色分光附件将两种颜色的信号成像到一台相机的一个感光芯片上很好地解决了同步成像的时间问题，但对于绝大多数的相机，整个感光芯片只能设置一个曝光时间，当两个颜色的信号强度相差较大时将很难同时将两个颜色的成像信噪
双色同步成像在荧光共定位等成像实验中的应用（三）
扩展阅读：GCaMP钙离子成像中，视网膜上两个神经细胞表现出相反的钙离子浓度变化（A浓度高的时候B浓度低，B浓度变高时A浓度下降），如何采用Reslice方法在平面图中反映出这种关系，敬请参阅链接中文章第14-16步：点击进入了解>> W-View GEMI
双色同步成像在荧光共定位等成像实验中的应用（一）
荧光的共定位是当今生物显微成像中一个极为常见的技术，两个或者更多种不同颜色的荧光探针被用来标记不同的结构/位点，使得其相互关系得以明晰地在合并的图像上展现。随着研究者对于实验的要求越来越高，这些荧光共定位的成像逐渐被希望能用于荧光强度高速变化或者样品本身位置不断变化的实验中，比如活动的斑马鱼、线虫体
共聚焦显微镜和普通荧光显微镜
共聚焦显微镜的优势：1、高分辨率16bit。由于是激光和荧光的共聚焦成像以及Pinhole的应用阻止了焦点以外的干扰衍射光和散射光，共聚焦显微镜的分辨率远非普通荧光显微镜所能及，这也是国际上共聚焦显微镜大为流行的原因之一。2、断层扫描共聚焦采取电动马达自动控制步距，使得Z轴上的最小移动步距可精确到4
共聚焦成像
共聚焦成像常规扫描速度达到16幅/秒（512X512分辨率），为显微镜行业最高速度，对于测钙、血流、心肌收缩等活细胞及活组织成像实验具有非常大的优势。4个荧光通道及1个DIC成像通道，可同时扫描和实时叠加；电动Z轴调焦步进 10nm，保证最精确的Z扫描，重建三维图像。
一文读懂|高内涵筛选缘何成为新药研发的宠儿
众所周知，新药研发的成本日益增高，虽然前期筛选多已采用高通量筛选技术，但其检测模型均建立在单个药物作用靶分子的基础上，在后期临床实验中仍面临很高的失败风险。显微荧光标记、数码影像分析以及图像数据处理技术的快速发展，使以高通量方式对细胞的多个生理环节进行检测成为可能，有力推动了高内涵筛选（High