免疫亲和柱荧光计快速测定法

(1)试剂与设备 ①4-系列真菌毒素专用荧光计。 ②均质器(250mL)。 微量移液器(0.5mL)。 涡流混合器。 ⑤塑料注射器(60mL)。 ⑥VICAM T-2毒素亲和柱。 ⑦聚乙二醇(PEG),相对分子质量8000。 色谱级甲醇。 ⑨PBS缓冲液。 ⑩氯化钠。 ⑪VICAM T-2毒素衍生液。 ⑫VICAM T-2毒素标定用溶液(红色)。 ⑬0.02%吐温/PBS 缓冲液:0.1mL 吐温+9.99mL PBS 缓冲液+490mL 水。 (2)样品的提取与过滤 ①称取50g 样品、5g 氯化钠、10g PEG 置于均质杯中。 加入150mL 25%的甲醇,高速均质1min。 ③用折叠式滤纸过滤,用干净的烧杯收集25mL的滤液。 ④用25mL 的水将滤液稀释1倍。 ⑤将 T-2毒素亲和柱与60mL 塑料注射......阅读全文

博纳艾杰尔黄曲霉毒素M1B1检测方案

  天津博纳艾杰尔科技有限公司,基于自身技术优势,及对乳品、饲料行业检测多年来的认知,整合出一套黄曲霉毒素检测的综合解决方案,可以提供黄曲霉检测几乎全部所需关键产品。   目前,关于乳品中黄曲霉毒素、食品中黄曲霉毒素的检测,有很多标准,GB、SN,归纳起来,多数采用免疫亲和柱净化-HPLC法检测,

免疫学技术专题:斑点金免疫渗滤测定法(DIGFA)

基本原理斑点金免疫渗滤测定法是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。试剂及材料1. 渗滤装置:为一塑料小盒(4x3x0.6cm

黄曲霉毒素及其检测方法综合介绍(二)

七、黄曲霉毒素检测——“免疫亲和柱法”方法简介为了开发一种简单、快速、灵敏、准确的分析方法,美国 VICAM(维康)公司与哈佛大学、麻省理工学院、约翰-霍普金斯大学、AOAC、FDA、FGIS、美国农业部等著名大学和政府机构通力合作,发明研制了一系列以单克隆免疫亲和柱为分离手段,用荧光计、紫外灯作为

呕吐毒素常用检测方法对比

呕吐毒素DON又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇,是单端孢菌素烯烃中的一种。作为一种常见的真菌毒素,呕吐毒素在自然界中广泛存在于小麦等粮谷类农作物中,在世界范围内存在着较高的污染率。小麦一旦被呕吐毒素产毒霉菌株污染,在适宜生长环境(水分活度Aw>0.87)中,产毒菌株会迅速生长,产生呕吐毒素,而小麦中的呕吐毒素

伏马毒素的快速分析技术的操作规范

       试验准备       (1)标定荧光计。(2)配制甲醇/水(80:20 体积比)溶液(每周配制一次,或根据需要配制)。(3)配制1倍 PBS 洗液缓冲液:取100mL 的10倍 PBS,加入到900mL 纯水中,即为1倍PBS缓冲液溶液。(4)配制1倍 PBS/0.1%吐温-20洗液缓

《药典》中的旋转黏度计测定法

《药典》2015版中规定,黏度的测定用黏度计。黏度计有多种类型,本法采用平氏毛细管黏度计、乌氏毛细管黏度计和旋转黏度计三种测定方法。毛细管黏度计适用于牛顿流体运动黏度的测定;旋转黏度计适用于牛顿流体或非牛顿流体动力黏度的测定。具体的来说下旋转黏度计测定法:旋转黏度计测定法是通过测定转子在流体内以一定

脲酶的测定实验——光度计测定法

实验方法原理实验材料脲酶试剂、试剂盒磷酸钾脲ADPNADHα-酮戊二酸谷氨酸脱氢酶脲酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 脲酶 25℃、340 nm 处吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其他试剂:

莲子中黄曲霉毒素B1,B2,.G1,G2检测

《中国药典》对部分中药材中AFB1的限量规定为5µg/kg,黄曲霉毒素总限量为10µg/kg。 目前来讲,黄曲霉毒素AFT的检测方法有高效液相色谱法(HPLC),酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测中药材中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲

HPLC对花生中黄曲霉毒素的测定

方案优势       灵敏、准确和实用               采用标准       相关标准           方法/原理/步骤         目前,常用的黄曲霉毒素检测方法主要有薄层色谱法(TLC)、酶联免疫吸附法(ELISA)和碘化荧光

废水中痕量汞的原子荧光测定法

摘要: 目的建立废水中痕量汞的原子荧光测定方法。方法在盐酸介质中, 以硼氢化钾为还原剂, 使汞离子生成原态汞蒸气, 由氩气带入原子荧光光谱仪中进行检测。同时, 还研究了酸度、硼氢化钾浓度、载气流量等分析条件对测定汞的影响。结果在优化的条件下, Hg 在0~20 ng/ml 浓度范围内线性关系良好(

高效液相色谱法检测牛奶,奶粉等产品中黄曲霉毒素M1...

高效液相色谱法检测牛奶,奶粉等产品中黄曲霉毒素M1操作规程1. 仪器高效液相色谱仪配荧光检测器,震荡器(或高速搅拌器),高速离心机 2. 试剂与试液色谱甲醇,蒸馏水,乙腈+水(25+75),石油醚,2.5 10%乙腈, 氢氧化钠溶液(0.5mol/L),玻璃纤维滤纸(PriboFast免疫亲和柱免费

免疫荧光技术

  免疫荧光技术是标记免疫技术中发展最早的一种.它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记抗体获得成功。经过几十年的发展,该技术已相当成熟。  用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的

免疫荧光原理

  免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。  直接法  将

间接免疫荧光

实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA试剂、试剂盒新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂实验步骤1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻片,置于合适的培养皿中。如 13 mm 盖玻片可用24 孔

间接免疫荧光

实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片                                                                  产生一抗种属的二抗                                

免疫荧光概述

  免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。  用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用

间接免疫荧光

方案16.11 间接免疫荧光实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA试剂、试剂盒新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂实验步骤1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻片,置于合适的培养皿中。如 1

直接免疫荧光

中文名称直接免疫荧光英文名称direct immunofluorescence定  义直接用荧光标记抗体来研究特异性抗原在细胞内定位的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

免疫荧光原理

免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。

荧光免疫技术介绍

  荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantib

间接免疫荧光

中文名称间接免疫荧光英文名称indirect immunofluorescence定  义直接免疫荧光技术的改进。待检细胞首先用未标记的抗体处理,使之与特异的抗原形成复合物,然后再用抗抗体的荧光标记抗体着色,即可检测出特异抗原在细胞中的存在部位,具有荧光增强效应。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞

免疫荧光技术

免疫荧光技术1)  直接法1.标本经固定后,PBS洗涤3×3分钟。2.加荧光素标记的抗体,湿盒内37℃孵育50分钟。3.PBS洗涤3×3分钟。4.0.1%伊文氏兰复染。5.PBS洗3次,蒸馏水洗2次,每次3分钟,以除去NaCl结晶。6.缓冲甘油封片,镜检。 2)  间接法1.标本固定后,PBS洗涤3

免疫荧光技术

实验方法原理 直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应,形成抗原—荧光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度,确定相应抗原的存在与否及其所在部位。实验材料 抗体试剂、试剂盒 PBS伊文氏兰仪器、耗材 显微镜实验步骤 1. 标本经固定后,PBS洗涤3×3 分钟;2. 加荧光素标记的抗体,湿

免疫荧光简介

  免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。

荧光免疫分析原理

  荧光免疫检测技术具有专一性强、灵敏度高、实用性好等优点,因此它被用于测量含量很低的生物活性化合物,例如蛋白质(酶、接受体、抗体)、激素(甾族化合物、甲状腺激素、酞激素)、药物及微生物等  作为免疫分析法的一种,FIA同样存在两种模式,即竞争型和夹心型。其中竞争型(以标记抗原的竞争型为例)的测定原

免疫荧光技术

基本原理  将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。试剂与仪器l          磷酸盐缓冲盐水(PBS):

酶联免疫吸附测定法的概述

  酶联免疫测定方法是以抗原和抗体分子为测定 靶标的方法,亦是目前最为常用的实验室诊断方法之一。  从理论上说,一种 生物或生理活性物质,只要有办法得到其特异的抗体,就可以建立这种物质的酶联免疫测定方法。在以前看来一些难以进行质量测定的微量生物活性物质,如受体、 细胞因子以及酶等均可使用酶联免疫测定

循环免疫复合物补体相关测定法

  IgG和IgM类抗体与抗原结合后,重链CH2区的补体结合点暴露,可以固定C1q并激活补体的系列反应,这是利用补体有关技术检测免疫复合物的基础。  1.C1q结合试验:将待检血清先行加热56℃30min,以灭活其中的补体和破坏已与CIC结合的C1q,空出补体结合点。CIC与C1q的结合可用多种方法

酶联免疫吸附测定法的原理

酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用的免疫学检测技术,用于定量或定性检测样品中的抗原或抗体。基本原理是将抗原或抗体固定在固相载体(如 96 孔酶标板)表面,然后加入待检测的样品,使其中的抗原或抗体与固相载体上的抗原或抗体结合。

酶联免疫吸附测定法呕吐毒素

呕吐毒素的介绍脱氧雪腐镰刀菌烯醇,又称为呕吐毒素,属单端孢霉烯族化合物。该毒素是F.镰刀菌霉(主要是 F.graminearum h 和 F.culmorum)的二级代谢产物,化学名为3α,3β,7α,15-四羟基镳草镰刀菌-9-烯-8-酮。这类真菌大多在低温、潮湿和收割季节,在谷物庄稼中慢慢生长。