免疫亲和柱荧光计快速测定法

(1)试剂与设备 ①4-系列真菌毒素专用荧光计。 ②均质器(250mL)。 微量移液器(0.5mL)。 涡流混合器。 ⑤塑料注射器(60mL)。 ⑥VICAM T-2毒素亲和柱。 ⑦聚乙二醇(PEG),相对分子质量8000。 色谱级甲醇。 ⑨PBS缓冲液。 ⑩氯化钠。 ⑪VICAM T-2毒素衍生液。 ⑫VICAM T-2毒素标定用溶液(红色)。 ⑬0.02%吐温/PBS 缓冲液:0.1mL 吐温+9.99mL PBS 缓冲液+490mL 水。 (2)样品的提取与过滤 ①称取50g 样品、5g 氯化钠、10g PEG 置于均质杯中。 加入150mL 25%的甲醇,高速均质1min。 ③用折叠式滤纸过滤,用干净的烧杯收集25mL的滤液。 ④用25mL 的水将滤液稀释1倍。 ⑤将 T-2毒素亲和柱与60mL 塑料注射......阅读全文

关于蛇毒的免疫学测定法介绍

  光学免疫分析(oia)基于spr原理,将单分子层薄膜涂在硅芯片基质表面,蛇毒与薄膜的特异性结合会导致入射白光产生金黄色至蓝紫色的反射光。免疫学测定法可对血、尿等生物样品中的4种类型的蛇毒的原型同时进行定性和半定量检测,lod为0.2~1.6 μg/l。荧光免疫技术结合了荧光检测的高灵敏度和免疫法

化学发光免疫测定法介绍

化学发光免疫测定(CLIA)亦称化学发光标记免疫测定,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体(化学发光剂标记物),与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应,通过磁场把结合状态(沉淀部分)和游离状态的化学发光剂标记物分离开来,然后加入发光促进剂进行发光反应,通过对发光强度的检测进行定量或定性检测

放射免疫测定法测定睾酮

放射免疫测定法:睾酮主要产生于睾丸小叶曲精管之间的间质细胞,此外肾上腺皮质也能合成。当标本中加入H睾酮和睾酮抗体即产生竞争抑制作用,在反应系统中,当H睾酮和其抗体量保持恒定,则标记抗体复合物的形成量受未标记抗原量所制约,用葡聚糖加膜活性炭进行分离,使结合标记抗原与游离标记抗原分开,测定沉淀的结合部分

循环免疫复合物补体相关测定法

  IgG和IgM类抗体与抗原结合后,重链CH2区的补体结合点暴露,可以固定C1q并激活补体的系列反应,这是利用补体有关技术检测免疫复合物的基础。  1.C1q结合试验:将待检血清先行加热56℃30min,以灭活其中的补体和破坏已与CIC结合的C1q,空出补体结合点。CIC与C1q的结合可用多种方法

酶联免疫吸附测定法的概述

  酶联免疫测定方法是以抗原和抗体分子为测定 靶标的方法,亦是目前最为常用的实验室诊断方法之一。  从理论上说,一种 生物或生理活性物质,只要有办法得到其特异的抗体,就可以建立这种物质的酶联免疫测定方法。在以前看来一些难以进行质量测定的微量生物活性物质,如受体、 细胞因子以及酶等均可使用酶联免疫测定

酶联免疫吸附测定法的原理

酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用的免疫学检测技术,用于定量或定性检测样品中的抗原或抗体。基本原理是将抗原或抗体固定在固相载体(如 96 孔酶标板)表面,然后加入待检测的样品,使其中的抗原或抗体与固相载体上的抗原或抗体结合。

黄曲霉毒素检测方法和各方法特点介绍

黄曲霉毒素的检测方法包括:薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)(液液提取和固相提取)、微柱筛选法、酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫亲和柱-荧光分光光度法、免疫亲和柱-HPLC 法等。TLC 虽然分析成本较低,但操作步骤多,灵敏度差;HPLC 虽然灵敏度高,但样品处理烦琐,操作复杂,仪器

关于免疫荧光技术—荧光免疫测定的基本介绍

  荧光免疫测定与酶免疫测定一样,可分均相和非均相法。均相法常利用荧光的某些特性,如荧光的激发、吸收、猝灭等设计试验,无需作结合的与游离的标记物分离。双标记法即为均相荧光免疫测定的一种类型,检测试剂为FITC标记的抗原和罗丹明标记的抗体,当两种标记物标记的抗原和抗体特异性结合后使两种荧光素靠近,由于

亲和柱的制备实验

实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是这样偶联的亲和柱多次重复使用时,将会有少量配体脱落,所以反复使用的亲和柱应考虑选择其他活化的介质。异脲键的形成伴有荷电基团的增加,将会影响离子交换作用。为了克

亲和柱的制备实验

配基固相化技术             实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是

病毒免疫荧光实验_​荧光抗体染色

实验材料细胞小玻片标本试剂、试剂盒荧光抗体实验步骤荧光抗体染色按不同反应机制,可有以下几种:1.直接法 用已知特异性病毒抗体与荧光素结合,制成荧光特异性抗体,直接与细胞或组织中相应病毒抗原结合,在荧光显微镜下即可见病毒或病毒抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异简便,但一种荧光抗体只能检查一种抗原,特

荧光免疫技术的荧光物质有哪些?

(一)荧光色素1.异硫氰酸荧光素(FITC):呈现明亮的黄绿色荧光。2.四乙基罗丹明(RB200):呈橘红色荧光。3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):呈橙红色荧光。4.藻红蛋白(R-RE):呈明亮的橙色荧光。(二)其他荧光物质1.镧系螯合物:其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围

荧光免疫技术的荧光物质有哪些?

(一)荧光色素1.异硫氰酸荧光素(FITC):呈现明亮的黄绿色荧光。2.四乙基罗丹明(RB200):呈橘红色荧光。3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):呈橙红色荧光。4.藻红蛋白(R-RE):呈明亮的橙色荧光。(二)其他荧光物质1.镧系螯合物:其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围

荧光免疫技术荧光的基本知识

荧光的基本知识:1.荧光偏振。2.荧光寿命:荧光物质被激发后产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间称为荧光寿命。3.荧光:某些物质受到一定波长光的激发后,在极短时间内发射出的波长大于激发光波长的光。4.激发光谱:固定检测发射光荧光波长,用不同波长的激发光照射样品所记录到的相应的荧光发射强度谱图。5.发

荧光免疫技术荧光的基本知识

荧光的基本知识:1.荧光偏振。2.荧光寿命:荧光物质被激发后产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间称为荧光寿命。3.荧光:某些物质受到一定波长光的激发后,在极短时间内发射出的波长大于激发光波长的光。4.激发光谱:固定检测发射光荧光波长,用不同波长的激发光照射样品所记录到的相应的荧光发射强度谱图。5.发

2020版《中国药典》睿科中药材中黄曲霉毒素测定的解决方案

1、介绍黄曲霉毒素(Aflatoxins, AF)是一类由黄曲霉和寄生曲霉产生的代谢产物,具有诱发人体致畸、致癌、致突变的作用,主要的污染物有黄曲霉毒素B1, B2, G1, G2。中药材大多以天然植物为基源,在储存不当或因其他外界条件影响时,易受霉菌污染产生黄曲霉毒素。因此对中药材进行黄曲

快速了解酸度计与离子计

  酸度计是测定溶液pH值的仪器。酸度计的主体是精密的电位计。测定时把复合电极插在被测溶液中,由于被测溶液的酸度(氢离子浓度)不同而产生不同的电动势,将它通过直流放大器放大,zui后由读数指示器(电压表)指出被测溶液的pH值。  离子计是用于测量水溶液中离子浓度含量的电化学仪器,它采用蓝色背光、双排

免疫亲和色谱法-技术的应用

1)免疫萃取(innunoextraction)IAC 技术最简单的应用就是单纯作为样品的预处理手段,即制备免疫亲和柱,也称为离线(off-line)IAC。现在市场上已有克伦特罗、黄曲霉毒素等多种免疫亲和柱出售,使用效果非常好。2)IAC 联用技术IAC 联用技术也可称为在线 IAC。将 IAC

IACSEP®黄曲霉毒素总量免疫亲和柱IAC103使用说明

使用对象IAC-SEP®黄曲霉毒素总量免疫亲和柱能够特异性的纯化与浓缩样品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。黄曲霉毒素免疫亲和柱广泛地应用于粮食、食品、饲料、坚果、花生、酱油、醋、辣椒、胡椒、药材和酒类等样品的提取,该方法速度快、操作简单、准确性高,对准确灵敏的测定样品中的黄曲霉毒素B1、B2、

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

自动化荧光免疫分析系统—荧光偏振免疫分析仪

  荧光偏振免疫分析仪  荧光偏振免疫测定(FPIA)为一种均相荧光免疫测定方法,荧光强度与荧光标志物质在溶液中旋转的速度与分子大小成反比,分子大,转动速度慢,荧光强度大;分子小,转动速度快,荧光强度小。常采用抗原抗体竞争反应原理,适用于小分子半抗原(如药物浓度)的检测。  第四节  自动化酶联免疫

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

间接免疫荧光和直接免疫荧光染色方法的异同

免疫荧光细胞化学方法的原理是根据抗原抗体反应的规律,把已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗原或抗体,然后以它作为探针来检测组织或细胞内的相应物质。方法具体种类有直接法、间接法、夹心法和补体法等。在荧光显微镜下,根据其形成复合物所发的荧光,来确定判断检测物的来源、性质和部位。 1、直接法:这是最早

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

黄曲霉毒素-M-族免疫亲和柱(AFMIAC)使用说明

黄曲霉毒素 M 族免疫亲和柱(AFM-IAC)1. 产品介绍黄曲霉毒素 M1(AFM1)、M2(AFM2)是一种致癌性、致突变性强物质,属于黄曲霉毒素之一,对人类健康造成极大威胁,因此各国对乳及乳制品中黄曲霉毒素 M 族含量均有严格限量标准。本产品将特异性黄曲霉毒素 M1(AFM1)、M2(AF

黄曲霉毒素的检测方法有哪些?

黄曲霉毒素的检测方法包括:薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)(液液提取和固相提取)、微柱筛选法、酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫亲和柱-荧光分光光度法、免疫亲和柱-HPLC 法等。

荧光计的工作原理

荧光计的工作原理是光源氙弧灯发出的光通过切光器使其变成断续之光以及激发光单色器变成单色光后,此光即为荧光物质的激发光,被测的荧光物质在激发光照射下所发出的荧光,经过单色器变成单色荧光后照射于测样品用的光电倍增管上,由其所发生的光电流经过放大器放大输至记录仪。

维生素B2-(核黄素)-荧光测定法

实验方法原理 核黄素能形成一种具有黄绿色荧光的黄色溶液。它在稀溶液中,440~500 nm波长下测定的荧光强度与核黄素的浓度成正比。根据其在还原后的荧光差数,可测定核黄素的含量。实验材料 核黄素试剂、试剂盒 高锰酸钾溶液 荧光红钠 硫代硫酸钠 冰醋酸仪器、耗材 荧光分光光度计 玻璃器实验步骤 溶液配

维生素B1(硫胺素)的荧光测定法

实验原理 维生素B1(硫胺素)属于水溶性维生素,在碱性高铁氰化钾通夜中,能被氧化成一种蓝色的荧光化合物-硫色素,在紫外线下,硫色素发出荧光。在给定条件下,以及没有其他荧光物质干扰时,此荧光之强度与硫色素的浓度成正比。利用人造沸石对维生素B1的吸附作用去除样品中的干扰荧光测定的杂质,然后洗脱维生素