脲酶的测定实验——光度计测定法
实验方法原理实验材料脲酶试剂、试剂盒磷酸钾脲ADPNADHα-酮戊二酸谷氨酸脱氢酶脲酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 脲酶 25℃、340 nm 处吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.62.0 mol/L 脲(Mr=60.0;12 g 溶于 100 ml 0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.6)25 mmol/L ADP(二钠盐,Mr=471.2;118 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.6)10 mmol/L NADH(二钠盐,Mr=709.4;71 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/L 磷酸钾,pH7.6)0.1 mol/L α-酮戊二酸(单钠盐,Mr=168.1;168 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/L 磷......阅读全文
脲酶的测定实验——光度计测定法
实验方法原理实验材料脲酶试剂、试剂盒磷酸钾脲ADPNADHα-酮戊二酸谷氨酸脱氢酶脲酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 脲酶 25℃、340 nm 处吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其他试剂:
脲酶的测定实验
pH 稳定计法 光度计测定法 实验方法原理 实验材料 脲酶
脲酶的测定实验
实验方法原理 实验材料 脲酶试剂、试剂盒 脲HCl仪器、耗材 pH 稳定计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」9 ml 0.2 mol/L 脲0.2 ml 脲酶自动滴定管充满 0.1 mol/L HCl,通过 pH 稳定计使得 pH 保持在 6.1,大约每 10 min 记录一次通过自动滴定管每
脲酶的测定实验——pH-稳定计法
实验材料脲酶试剂、试剂盒脲HCl仪器、耗材pH 稳定计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」9 ml 0.2 mol/L 脲0.2 ml 脲酶自动滴定管充满 0.1 mol/L HCl,通过 pH 稳定计使得 pH 保持在 6.1,大约每 10 min 记录一次通过自动滴定管每次滴定的体积。注意事项
酶测定法实验
试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液DEAE-纤维素(DE81) 纸片P04 清洗缓冲液乙醇反应液仪器、耗材 水浴锅实验步骤 材料与设备核心 RNA 聚合酶 (2.3 mg/ml)纯σ32 标准品 (
酶测定法实验
在本单元中,用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液
酶测定法实验
酶测定法实验 试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶 纯σ32 标准品 纯化的 σ32 样品
脲酶Km值的简易测定
步骤1.脲酶的提取:称取大豆粉1克,加入30%的乙醇25mL,充分摇匀后,置于冰箱中过夜,次日用2000rpm离心3分钟,取上清液备用。2.标准曲线的制作:按下表加入各种试剂单位:mL立即摇匀各管,于460nm下比色,1号管为参比。3.酶促反应速度的测定:按下表操作
蛋白酶的测定实验——Anson-测定法
实验方法原理血红蛋白不是很贵,被用来做这个实验。由于处于天然结构的蛋白质通常可以抵制蛋白酶的攻击,因此首先用尿素使血红蛋白失活。分离非水解蛋白质后,利用 Folin-Ciocaheau 试剂的上清液测量消化产物。这种试剂优先识别色氨酸和酪氨酸,但是也可以识别半胱氨酸和组氨酸。'实验温度取决于
蛋白酶的测定实验——酪蛋白测定法
实验方法原理实验中的氨基酸由蛋白酶从酪蛋白中水解下来。在分离出 TCA 沉淀中未分解的蛋白质后,用分光光度测定的方法对其上清液分析,氨基酸来自于酪蛋白。依据酪蛋白校准曲线,已对其量化。这个鉴定不是很敏感。实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸L-酪氨酸酪蛋白底物仪器、耗材分光
发光免疫测定法的实验目的
中文名称发光免疫测定英文名称luminescent immunoassay;LIA定 义以发光物质标记抗原或抗体,免疫反应后引发发光反应,根据发光强度对抗体或抗原进行的测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
Fe(II)EDTA保护测定法实验
方案5.9 Fe(II)-EDTA保护测定法 实验方法原理 Fe(II)-EDTA 能够催化 RNA 或 DNA 的断裂,是 RNase 保护分析的一个补
Fe(II)EDTA保护测定法实验
实验方法原理 Fe(II)-EDTA 能够催化 RNA 或 DNA 的断裂,是 RNase 保护分析的一个补充方法,其优点是很少或没有碱基序列的特异性,其沿着整个长度的 RNA 或 DNA 链的剪切几乎是一致的,它可被用于解释一些 RNA 的较高级的折叠方式。试剂、试剂盒 RNA洗脱缓冲液退火缓冲液
Fe(II)EDTA保护测定法实验
Fe(II)-EDTA 能够催化 RNA 或 DNA 的断裂,是 RNase 保护分析的一个补充方法,其优点是很少或没有碱基序列的特异性,其沿着整个长度的 RNA 或 DNA 链的剪切几乎是一致的,它可被用于解释一些 RNA 的较高级的折叠方式。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方
脲酶的简介
CAS编码 9002-13-5英文通用名称 Urease中文通用名称 脲酶用途 用于葡萄酒中分解残存的脲和抑制氨基甲酸乙酯的形成。毒理学性质 GRAS(FDA,§184.1924,1994)
麻醉大鼠动脉血压的测定实验(直接测定法)
实验材料 大鼠试剂、试剂盒 氨基甲酸乙酯戊巴比妥钠普鲁卡因注射液肝素仪器、耗材 大鼠实验台聚乙烯医用塑料导管压力换能器多通道生理信号采集记录仪器实验步骤 (1)颈总动脉测量动脉血压:取体重为200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥钠注射液0.2
麻醉大鼠动脉血压的测定实验(直接测定法)
实验材料大鼠试剂、试剂盒氨基甲酸乙酯戊巴比妥钠普鲁卡因注射液肝素仪器、耗材大鼠实验台聚乙烯医用塑料导管压力换能器多通道生理信号采集记录仪器实验步骤(1)颈总动脉测量动脉血压:取体重为200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥钠注射液0.2ml/1
蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法
实验方法原理酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)三氯乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液
蛋白酶的测定实验——茚三酮测定法
实验方法原理茚三酮反应是一种灵敏度高的蛋白实验。游离的氨基酸可以被高敏感性检测出来。这个方法可以被用来继续蛋白质的酶降解。上述的酪蛋白降解在这个实验系统中用作蛋白酶反应。未水解的蛋白质被三氯乙酸沉淀下来,而茚三酮反应发生在上清液。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸酪蛋
维生素B2-(核黄素)-荧光测定法实验_荧光测定法2
实验方法原理核黄素在pH 4~9 的条件下,用450 nm波长的光激发,可发出波长为520 nm的荧光。在核黄素的含量为0.1~10 μg范围内,荧光的强度,与核黄素浓度成正比,硫代硫酸钠可消除核黄素的荧光性。实验材料核黄素试剂、试剂盒荧光红钠 硫代硫酸钠 盐酸仪器、耗材荧光分光光度计 容量瓶实验步
维生素B2-(核黄素)-荧光测定法实验_荧光测定法1
实验方法原理核黄素能形成一种具有黄绿色荧光的黄色溶液。它在稀溶液中,440~500 nm波长下测定的荧光强度与核黄素的浓度成正比。根据其在还原后的荧光差数,可测定核黄素的含量。实验材料核黄素试剂、试剂盒高锰酸钾溶液 荧光红钠 硫代硫酸钠 冰醋酸仪器、耗材荧光分光光度计 玻璃器实验步骤溶液配制:1.
利福平的测定法
临用新制或存放于2~8℃条件下6小时内使用。取本品适量,精密称定,加乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液;精密量取适量,用乙腈-水(1:1)定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液,作为供试品溶液,精密量取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取利福平对照品适量,精密称定,同法测定。按
熔点测定法的测定原理
熔点是指一种物质按照规定的方法测定,由固相熔化成液相(有时会伴随分解)时的温度范围,是物质的一种物理常数。依法测定熔点可以鉴别药物,也可以检查药物的纯杂程度。根据被测物质的不同性质,《中国药典》二部附录“熔点测定法”项下列有3种不同的测定方法:第一法,用于测定易粉碎的固体药物;第二法,用于测定不易粉
余氯测定法
沉淀滴定法(氯离子的测定)1、所用试剂氯化钠标准溶液:(1毫升=1毫克Cl¯):取基准试剂或优级纯氯化3—4克至于瓷坩埚中,于高温炉升温至500℃灼烧10分钟,然后在干燥器内内冷却至室温;准确称取1.649克氯化钠,现用少量蒸馏水溶解,再用蒸馏水稀释至1000毫升。硝酸银标准溶液(1毫升=1毫克Cl
熔点测定法
依照待测物质的性质不同,测定法分为下列3种。各品种项下未注明时,均系指第一法。折叠第一法测定易粉碎的固体药品取供试品适量,研成细粉,除另有规定外,应按照各药品项下干燥失重的条件进行干燥。若该药品为不检查干燥失重、熔点范围低限在135℃以上、受热不分解的供试品,可采用105℃干燥;熔点在135℃以下或
馏程测定法
馏程系指一种液体照下述方法蒸馏,校正到标准压力[101.3kPa(760mmHg)]下,自开始馏出第5滴算起,至供试品仅剩3~4ml或一定比例的容积馏出时的温度范围。某些液体药品具有一定的馏程,测定馏程可以区别或检查药品的纯杂程度。用国产19标准磨口蒸馏装置一套。A为蒸馏瓶;B为冷凝管,馏程在130
细胞周期测定实验——流式细胞仪测定法
实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。
脲酶的基本信息
CAS编码 9002-13-5英文通用名称 Urease中文通用名称 脲酶用途 用于葡萄酒中分解残存的脲和抑制氨基甲酸乙酯的形成。毒理学性质 GRAS(FDA,§184.1924,1994)
脲酶的基本信息
脲酶(Urease)一种催化尿素水解成氨和二氧化碳的酶。具有高度专一性。广泛存在于微生物和动植物组织中,是最早得到结晶并被证明是蛋白质的一种酶。一般从刀豆中提取。是分析测定尿素时的工具酶
脲酶的性质和分布
一种含镍的寡聚酶。 Mr约为483000。 pI4.8,最适pH值 7.4,具有绝对专一性,特异性地催化尿素水解释放出氨和二氧化碳。CO(NH2)2+H2O →CO2 +2NH3能将尿素(脲)分解为氨和二氧化碳或碳酸铵的酶。广泛分布于植物的种子中,但以大豆、刀豆中含量丰富。也存在于动物血液和尿中。某