亲和柱的制备实验

实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是这样偶联的亲和柱多次重复使用时,将会有少量配体脱落,所以反复使用的亲和柱应考虑选择其他活化的介质。异脲键的形成伴有荷电基团的增加,将会影响离子交换作用。为了克服这一影响要在纯化时采用至少 0.1 mol/L 的缓冲盐液。该固相化方法简便廉价,并可广泛用于蛋白质、核酸和凝素。实验材料 溴化氰活化的琼脂糖凝胶试剂、试剂盒 盐酸偶联缓冲液阻断缓冲液仪器、耗材 玻璃漏斗玻璃棒真空泵实验步骤 1. 取 2 g 溴化氰活化的琼脂糖凝胶加入玻璃漏斗内 1 mmol/L 盐酸中,用玻棒轻轻搅动 20 min直至介质完全溶胀。静置待混悬的介质沉降后,用真空泵吸去液体。1 g 干凝胶可以获得 3.5 ml 溶胀胶;2. 用 200 ml 1 mmol/L 盐酸洗介质,共3次,每次洗后吸去液体;3. 用偶联......阅读全文

亲和柱的制备实验

实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是这样偶联的亲和柱多次重复使用时,将会有少量配体脱落,所以反复使用的亲和柱应考虑选择其他活化的介质。异脲键的形成伴有荷电基团的增加,将会影响离子交换作用。为了克

亲和柱的制备实验

配基固相化技术             实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是

亲和柱的制备实验_配基固相化技术

实验方法原理溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是这样偶联的亲和柱多次重复使用时,将会有少量配体脱落,所以反复使用的亲和柱应考虑选择其他活化的介质。异脲键的形成伴有荷电基团的增加,将会影响离子交换作用。为了克服

mRNA的提取及纯化实验——亲和柱层析法

实验方法原理该方法利用mRNA上的寡聚A可与较联寡聚T的纤维素柱在高盐下以碱基配对形式发生亲和吸附,而在低盐下,碱基配对能力破坏,吸附解除,而其他成分的RNA则不具该特性,因此在高盐下当RNA抽提样品流经该柱时,mRNA被挂在柱上,而其他RNA则随高盐溶液流出;当用低盐洗脱液洗柱时,mRNA随洗脱液

免疫亲和柱简介

AOKIN 霉菌毒素免疫亲和柱一.简 介霉菌毒素是由霉菌产生的有毒代谢产物,有较强的致癌性和降低免疫力作用。常见的霉菌毒素主要有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素,呕吐素素、单端孢霉烯(T-2毒素)、玉米赤霉烯酮、串珠镰刀菌素、伏马菌毒素等。粮食及饲料很容易受到霉菌毒素的污染,这一问题越来越成为现代农业生产中不

亲和柱的定义

中文名称亲和柱英文名称affinity column定  义将与纯化对象有专一结合作用的物质连接在不溶性载体上,制成亲和吸附剂后所装的柱。多用做亲和层析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

血清制备实验

抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。实验材料血仪器、耗材低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让

血清制备实验

血清制备实验             实验材料 血 仪器、耗材

制备电泳实验

洗脱 连续电泳 等电聚焦制备电泳             实验方法原理 严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品

血清制备实验

实验材料 血仪器、耗材 低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤 1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让血块固缩);3. 当血清自然析出后, 4℃,3000 转/分,离心10 分钟,分离血清,弃去不溶物;4. 将血清移至一干净试管,并分装成小份

制备电泳实验

实验方法原理 严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品通过某种电泳方法进一步分离纯化后,再用扩散洗脱或电泳洗脱收集纯样品,继而用作其他分析的需要。实验材料 凝胶切片仪器、耗材 解剖刀匀浆器实验步骤 1. 扩散洗脱扩散洗脱是用解剖刀或匀浆器将凝胶切片捣

制备克隆实验

试剂、试剂盒ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱水浴箱实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mmol/L

制备克隆实验

试剂、试剂盒 ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材 FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱 水浴箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mm

制备克隆实验

            试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶 平末

亲和柱层析法提纯mRNA

实验概要该方法利用mRNA上的寡聚A可与较联寡聚T的纤维素柱在高盐下以碱基配对形式发生亲和吸附,而在低盐下,碱基配对能力破坏,吸附解除,而其他成分的RNA则不具该特性,因此在高盐下当RNA抽提样品流经该柱时,mRNA被挂在柱上,而其他RNA则随高盐溶液流出;当用低盐洗脱液洗柱时,mRNA随洗脱液流出

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基             实验材料

细菌细胞的制备实验实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液                        

血平板制备实验

实验方法原理肉汤琼脂中加羊血或兔血均可。用血量为5-7%。在血平板上除了可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血。菌落周围成绿色为α-溶血。溶血情况可以显微镜下用低倍镜观察。实验步骤成分:牛肉浸出液:          1000 ml蛋白胨:        

巧克力平板制备实验

实验方法原理主要是蛋白胨和牛肉粉用来提供细菌生长所需的碳源、氮源、氨基酸以及维生素。氯化钠维持培养基中的渗透压,琼脂用做凝固剂。脱纤维羊血提供氯化血红素和辅酶I,为嗜血杆菌属的生长提供特殊营养。巧克力平板培养基还能够培养其他细菌,主要的原因是血液中有V、X因子,这两种因子是位于红细胞中的,一般细菌不

桥粒的制备实验

从牛舌或牛口鼻部分离桥粒 分级分离桥粒             实验材料 牛口鼻部或舌头

散剂的制备实验

示例法             实验材料 碳酸氢钠 氧化镁 试剂、试剂盒

桥粒的制备实验

从牛舌或牛口鼻部分离桥粒分级分离桥粒实验材料牛口鼻部或舌头                                                          试剂、试剂盒柠檬酸缓冲液                                                  

制备电泳实验——洗脱

蛋白质的分离纯化是研究其结构、特性和功能的基础,诸如一级结构、溶液构象、晶体结构、免疫功能和生物机理等研究都必须用一定量并具有活性的纯样品作为研究材料。本实验来源「蛋白质电泳实验技术」主编:郭尧君。实验方法原理严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品

细菌RNA制备实验

实验材料 RNA试剂、试剂盒 STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1.  培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期,加入1/20体积终止缓冲液,置于冰上。2.  于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3.

巧克力平板制备实验

实验方法原理 巧克力平板应用羊血或免血制备。因其中含有Ⅹ和Ⅴ因子,嗜血杆菌、奈瑟氏菌等生长良好,凡疑有这些菌种存在的标本,均须接种巧克力平板。血液标本培养,增苗后有细苗生长,若移种巧克力平板上,有利于分离到更多的细菌。实验步骤 成分:牛肉浸出液:              1000 ml蛋白胨:  

细菌RNA制备实验

革兰氏阴性细菌中提取 革兰氏阳性细菌中提取             实验材料 RNA 试

血平板制备实验

实验方法原理 肉汤琼脂中加羊血或兔血均可。用血量为5-7%。在血平板上除了可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血。菌落周围成绿色为α-溶血。溶血情况可以显微镜下用低倍镜观察。实验步骤 成分:牛肉浸出液:          1000 ml蛋白胨:      

制备电泳实验——等电聚焦制备电泳

实验方法原理等电聚焦制备电泳是一种非变性制备技术。由于等电聚焦电泳技术的特点,因而是一种理想的制备方法。试剂、试剂盒电极液两性电解质Ultrodex实验步骤一、液体介质垂直柱状蔗糖密度梯度等电聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制备和分析目的的等电聚焦方法。载体两性电解质在蔗糖密度梯度柱中形成 pH

呕吐毒素免疫亲和柱操作说明

【概要】脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON) 又称呕吐毒素(vomitoxin),主要是由镰刀菌的某些种产生的化学结构和生物活性相似的有毒代谢产物——单端孢霉烯族化合物中的一种。广泛存在于全球,主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物,也污染粮食制品,人和动物在误食被该毒素污染