胶体金的制备常用方法
胶体的制备一般采用还原法,常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。2.1柠檬酸三钠还原法制备金溶胶取0.01%氯金酸水溶液100mL加热至沸,搅动下准确加入1%柠檬酸三钠(Na3C6H5O7·2H2O)水溶液0.7mL,金黄色的氯金酸水溶液在2min内变为紫红色,继续煮沸15min,冷却后以蒸馏水恢复到原体积,如此制备的金溶胶其可见光区最高吸收峰在535nm,Alcm/535=1.12。金溶胶的光散射性与溶胶颗粒的大小密切相关,一旦颗粒大小发生变化,光散射也随之发生变异,产生肉眼可见的显著的颜色变化,这就是金溶胶用于免疫沉淀或称免疫凝集试验的基础。金溶胶颗粒的直径与制备时加入的柠檬酸三钠量是密切相关的,保持其他条件恒定,仅改变加入的柠檬酸三钠量,可制得不同粒径的金溶胶,也就是不同颜色的金溶胶,......阅读全文
生物大分子制备常用的样品浓缩方法
1、减压加温蒸发浓缩通过降低液面压力使液体沸点降低，减压的真空度愈高，液体沸点降得愈低，蒸发愈快，此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。 2、空气流动蒸发浓缩空气的流动可使液体加速蒸发,铺成薄层的溶液，表面不断通过空气流；或将生物大分子溶液装入透析袋内置于冷室，用电扇对准吹风，使透过膜外的溶剂不沁
常用DAN探针制备的方法介绍末端标记
末端标记(end labeling)是利用酶学方法或化学方法将标记物,如同位素、生物素、荧光素等标记到核苷酸链的5'或3'端制备探针。酶学方法中常用的酶有:经枯草杆菌蛋白酶水解大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ形成具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性
常用免疫组织化学方法的原理免疫胶体金技术
免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶，它能迅速而稳定地吸附蛋白，对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此，用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针，就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位，甚至定量研究。由于胶体金
常用样品制备技术
色谱样品采集后要尽快的制备成适合色谱分析的样品，以便进行色谱分析。适合色谱分析的样品是指制备好的样品能满足：①所选用色谱柱的进样要求；②所选用色谱方法的分离能力（即能将欲测组分和其他组分分离开，如分离不开，则要进行预分离）；③所选用色谱方法的检测能力。样品制备就是采用一些物理化学的方法去处理采集到的
扫描电镜生物样品制备常用干燥方法
1. 自然干燥法 自然干燥法是指样品中的水分在大气中自然蒸发，或样品经脱水处理后脱水剂自然挥发而干燥的方法。 对干种子、果壳、某些干花粉、昆虫标本等来说，自然干燥法是一个简易实用有效的方法，虽然在自然干燥过程中，样品体积有所收缩，但却保留了样品的基本形态。适用于外表坚硬的样品，如外表有壳的昆虫，木材
浅谈常用纯化制备纯水的六种方法
实验室纯水的制备方法有多种，最常用的为离子交换、活性炭吸附、微孔过滤、超滤、反渗透、紫外线照射等六种。1、离子交换法离子交换法是以圆球形树脂（离子交换树脂）过滤原水，水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透（RO）处理之前，先将水
胶体金制备方面的小Tick总结
1、鉴定胶体金烧制的质量一般有三种：（1）目测直观法：金胶溶液不浑浊，无漂浮物，无颗粒沉淀物，在日光灯下观察溶液中无微小颗粒。或用光电笔透过金溶液成一条直线，无散光现象。（2）分光光度计光谱测定：波峰越尖，峰宽越窄，说明颗粒更均一、分散性越好。（3）透射电镜对金颗粒的形貌进行表观，直接反映金颗粒溶液
纯水在胶体金制备过程中的应用
胶体金快速诊断试剂在瘦肉精检测中的应用： 瘦肉精是一类动物用药，它可以起到减少脂肪增加瘦肉的作用。目前在中国瘦肉精主要为克仑特罗(clenbuterol)，它属于β-兴奋剂（β-agonist）药物。克仑特罗有很危险的副作用，轻则导致心律不整，重则导致心脏病发作。 目前检测瘦肉精的技术
免疫胶体金技术的使用优点及颗粒制备
使用优点 (1)使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在15分钟内完成； (2)成本低，不需要特殊的仪器设备； (3)应用范围广，可适应多种检测条件； (4)可嗄以进行多项检测，若阳性样本比较难获得，多项检测可以节省样品，降低成本； (5)标记物稳定，标记样品在4℃贮存两年年
纯水中影响胶体金制备的因素分析
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态。免疫胶体
实验室六种常用纯化制备纯水的方法
实验室纯水的制备方法有多种，最常用的为离子交换、活性炭吸附、微孔过滤、超滤、反渗透、紫外线照射等六种。 1 .离子交换法 离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水，水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透
常用DAN探针制备的方法介绍光敏生物素标记
光敏生物素标记(photobiotin labeling)是Forster(1985)等报道的核酸探针制备方法。光敏生物素是一种可用光照活化的生物素衍生物,它的乙酸盐很容易溶于水,在水溶液中将光敏生物素乙酸盐与需要标记的核酸混合,用强的可见光照射,就可将生物素标记在单链或双链的 DNA 或 RNA
胶体金制备注意事项及应用
一、胶体金的稳定性及免疫胶体金的贮存胶体金具有很高的动力学稳定性，在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢，可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。 金溶胶必须有少量电解质作稳定剂，但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质
白磷还原法制备胶体金分散颗粒
胶体金可用多种方法制备，其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂，使金离子还原为金原子，可用于制备胶体金的还原剂有50余种，但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等。 白磷还原法的建立已有近百年的历史，由于此法操作较
白磷还原法制备胶体金分散颗粒
胶体金可用多种方法制备，其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂，使金离子还原为金原子，可用于制备胶体金的还原剂有50余种，但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等。白磷还原法的建立已有近百年的历史，由于此法操作较为简便，制备出来的
滴丸制备的常用载体有哪些
（1）水溶性：聚乙二醇（PEG） 类，以PEG4000或6000为宜。它们的熔点低（55-60℃），毒性较低，化学性质稳定（在100℃以上才分解）。能与多数药物配伍，具有良好的水溶性，亦能溶于多种有机溶剂，能使难溶性药物以分子状态分散于载体中。在溶剂蒸发过程中，粘度逐渐增大，可阻止药物分子聚集。（2
常用试剂的性质与制备纯化
常用试剂的性质与制备纯化有机化学实验经常用到大量的试剂，包括无机试剂和有机试剂，市售的试剂有分析纯（A.R）、化学纯（C.P）、工业级（T.P）等级别，其中分析纯的纯度较高，工业级则带有较多的杂质。在某些有机反应中，对试剂或溶剂的要求较高，即使微量的杂质或水分的存在，也会对反应的速率、产率和产品纯度
胶体金的质量鉴定方法
胶体金制备完毕后须经电镜下质量鉴定才能应用。一、胶体金颗粒直径测定用预先处理好的覆有Formvar膜的镍网浸入胶体金溶液内，取现放在空气中干燥或37℃烤箱烤干。然后在透射电镜下观察，主要观察金颗粒的大小，符合不符合所需要的颗粒直径，金颗粒是否均匀一致，有无椭圆形及多角形金颗粒存在。理想的金颗粒是大小
常用的免疫胶体金检测技术斑点免疫金渗滤法
斑点免疫金渗滤法应用微孔滤膜（如膜）作载体，先将抗原或抗体点于膜上，封闭后加待检样本，洗涤后用胶体金标记的抗体检测相应的抗原或抗体。
免疫胶体金的制备及其在医学检验中的应用
摘要免疫胶体金技术是四大免疫标记技术之一，问世二十多年来发展十分迅速，在生物医学各研究领域特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。本文从胶体金技术的基本原理、制备方法、标记技术和实际应用等几个方面对胶体金技术作了较系统介绍。 1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学，此
胶体金分散颗粒制备实验——白磷还原法
胶体金可用多种方法制备，其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂，使金离子还原为金原子，可用于制备胶体金的还原剂有 50 余种，但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等，因此将重点介绍这三种还原剂制备胶体金分散颗粒的具体方法和步骤。
实验常用试剂的制备与储藏（一）
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（amm
实验常用试剂的制备与储藏（三）
二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 电泳缓冲液 50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液 5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液 染料 1％溴酚蓝（bromophenol blue） 加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。 1％二甲苯青FF（xylene
实验常用试剂的制备与储藏（二）
100×Denhardt试剂（Denhardt's regent） 依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20℃贮存。 10×标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端连接） 将配制好的缓冲
实验常用试剂的制备与储藏（四）
三.常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。 SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 用水补足体积到1L。分成100
常用试剂的性质与制备纯化（四）
21．钾在处理钾时必须非常小心，要在装有石油醚的研钵中切金属钾，不要用易碎的烧杯或培养皿。切开外面的氧化层，然后用镊子将碎屑放入另一装有石油醚的研钵中。用镊子将刚切的钾夹到滤纸上，快速吸干，然后加到已知质量的装有石油醚的烧杯中，称量。将称量后的钾加到反应物中。钾碎屑不应久置，应立即分解掉，可将装有钾
常用试剂的性质与制备纯化（二）
9．N,N-二甲基甲酰胺（DMF） 沸点149～156℃，密度d＝0.9487，折光率n 20D ＝1. 4305，无色液体，能与多数有机溶剂和水互溶，是优良的有机溶剂。市售的DMF含有少量水、胺和甲醛等杂质。在常压蒸馏时有些分解，产生二甲胺与一氧化碳，若有酸或碱存在时，分解加快，在加入固体氢氧化
常用试剂的性质与制备纯化（三）
17．高碘酸商品的高碘酸一般有95%和50%两种规格。高碘酸可对相邻碳原子上有两个羟基或一个羟基和一个氨基的化合物进行选择性氧化。即：C－C键断裂。RCH（OH）CH（OH）R'+ HIO4 → RCHO + R'CHO + HIO3 + H2ORCH（OH）CH（NH2）R'
免疫胶体金技术的方法原理
免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶，它能迅速而稳定地吸附蛋白，对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此，用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针，就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位，甚至定量研究。由于胶体金
胶体金分散颗粒制备实验——白磷还原法（改进）
实验方法原理白磷还原法一般只能制备出单一颗粒直径的胶体金。因此，用于电镜双重标记或多重标记时此法显得有些不足，还需结合其他方法。Henegouwen 等（1986）发展了传统的白磷还原法，可制备出多种不同直径的胶体金，取得了良好的效果。这一方法的特点是通过循环还原的引入使原白磷还原法的适用范围得到扩