常用的免疫胶体金检测技术斑点免疫金渗滤法
斑点免疫金渗滤法应用微孔滤膜(如膜)作载体,先将抗原或抗体点于膜上,封闭后加待检样本,洗涤后用胶体金标记的抗体检测相应的抗原或抗体。......阅读全文
常用的免疫胶体金检测技术斑点免疫金渗滤法
斑点免疫金渗滤法应用微孔滤膜(如膜)作载体,先将抗原或抗体点于膜上,封闭后加待检样本,洗涤后用胶体金标记的抗体检测相应的抗原或抗体。
常用的免疫胶体金检测技术胶体金免疫层析法
胶体金免疫层析法将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上,胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上,当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在
斑点金免疫渗滤试验原理
斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗
常用的免疫胶体金检测技术
(1)免疫胶体金光镜染色法细胞悬液涂片或组织切片,可用胶体金标记的抗体进行染色,也可在胶体金标记的基础上,以银显影液增强标记,使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面,可明显增强胶体金标记的敏感性。免疫胶体金电镜染色法可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合,然后进行负染。可用于
斑点金免疫渗滤测定(DIGFA)实验
实验方法原理斑点金免疫渗滤测定实验是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。实验材料细胞样品试剂、试剂盒 PBS吐温-20BSA特异
斑点金免疫渗滤测定(DIGFA)实验
实验方法原理 斑点金免疫渗滤测定法是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 PBS吐温-20BSA
免疫学技术专题:斑点金免疫渗滤测定法(DIGFA)
基本原理斑点金免疫渗滤测定法是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。试剂及材料1. 渗滤装置:为一塑料小盒(4x3x0.6cm
胶体金在快速斑点渗滤技术中的应用
ELISA法在临床实验室已得到普遍的应用,特别是用于各型肝炎标志物的检测。但ELISA法由于操作程序复杂,时间较长,需要洗板机、酶标检测仪等贵重仪器。给实验室带来不便。ELISA法需时较长的主要原因,是由于液相中的抗原(或抗体)需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反应,不适当地缩短反应时间,将使灵敏度降
常用的免疫胶体金检测技术免疫胶体金光镜染色法
细胞悬液涂片或组织切片,可用胶体金标记的抗体进行染色,也可在胶体金标记的基础上,以银显影液增强标记,使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面,可明显增强胶体金标记的敏感性。免疫胶体金电镜染色法可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合,然后进行负染。可用于病毒形态的观察和病毒检测。
胶体金快速斑点免疫分析2
四、胶体金块快速免疫结合分析的应用应用领域很广,可分为临床应用与非临床应用两类。目前应用多以前者为主。1、临床应用 已应用于临床的很多领域。由于目前它还是定性分析,故主要用以检测正常体认中不存在的生物活性物质(如传染病的抗原及抗体),以及正常情况下体液中含量很低而在某些疾病中升高的生物活性物质。
胶体金快速斑点免疫分析1
随着免疫分析日益广泛应用于以临床为主以及非临床领域的诊断工业(diagnostic industry),免疫分析向两个方向发展:一类为全自动化的免疫分析;另一类为以硝酸纤维膜为载体的快速免疫分析。前者需要价格昂贵的全自动仪器及与仪器严格配套的各种试剂盒,目前只能在医疗及检测中心应用,虽也能较快速
金免疫技术(斑点免疫层析试验)
一、原理金免疫技术是免疫标记技术之一,金盐被还原成原子金后形成金颗粒悬浮(胶体金),这种金颗粒呈红色,并能与蛋白质等大分子物质结合,因此,可用胶体金作为标记物来检测标本中的抗原或抗体。典型的测定方法有斑点买免疫渗滤试验和斑点免疫层析试验等。二、材料1 、HCG金标试纸条2、妊娠尿液 正常尿液三、方法
斑点免疫渗滤试验(dotymmunogoldfiltrationassay,DIGFA)
斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗滤
斑点免疫渗滤试验(IFA)的原理
用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标记物等,以及用于检测尿液HCG的“金标”早孕诊断试剂。 原理:将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上,将膜贴于吸水材料上,依次在膜上滴加标本、免疫胶体金及洗涤液等试剂进行抗体或抗原反应,过量试剂很快渗入吸水材料中。 抗原抗体反应后,形成大分子胶体金复合物,
斑点免疫渗滤试验的方法类型
1.双抗体夹心法测抗原:用抗体结合在微孔滤膜中央,滴加待检标本,抗原抗体反应后,滴加金标抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。 2.间接法测特异性抗体:用抗原包被在微孔滤膜上,滴加待测标本,滴加洗涤液洗涤后,滴加金标抗抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。该法由于血清标
斑点免疫渗滤试验(IFA)的原理
用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标记物等,以及用于检测尿液HCG的“金标”早孕诊断试剂。原理:将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上,将膜贴于吸水材料上,依次在膜上滴加标本、免疫胶体金及洗涤液等试剂进行抗体或抗原反应,过量试剂很快渗入吸水材料中。抗原抗体反应后,形成大分子胶体金复合物,从而使阳性结
电镜免疫胶体金―银法染色技术
免疫胶体金―银染色(immunogold-sliverstaining)技术系20世纪80年代Holgate将免疫 金染色和银显影方法结合而建立的一种新型检测技术,亦可用于电镜包埋前染色。其基本原理是先进行免疫胶体金染色标记抗原,使其结合在组织细胞抗原所在位置,然后进行物理显影,当显影剂中的对
免疫学技术专题:雌二醇的免疫胶体金试纸法检测
雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分,为防止儿童性早熟等问题,食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显变化,所以它可以取代酶标记抗体〔1,2〕
免疫胶体金技术简介
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,英文缩写为:GICT。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳
免疫胶体金技术3
为了得到颗粒均一的免疫金试剂,可将上述初步纯化的结合物再进一步用10%~30%蔗糖或甘油进行密度梯度离心,分带收集不同梯度的胶体金与蛋白的结合物。(2)凝胶过滤法:此法只适用于以BSA作稳定剂的胶体金蛋白结合物的纯化。将胶体金蛋白结合物装入透析袋,在硅胶中脱水浓缩至原体积的 1/5~1/10。再
免疫胶体金技术2
(3)配制胶体金溶液的pH以中性(pH7.2)较好。(4)氯金酸的质量要求上乘,杂质少。最好是进口的。(5)氯金酸配成1%水溶液在4℃可保持数月稳定,由于氯金酸易潮解,因此在配制时,最好将整个小包装一次性溶解。 (三) 胶体金标记蛋白的制备 胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在
免疫胶体金技术简介
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,英文缩写为:GICT。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳
免疫胶体金技术介绍
一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质
免疫胶体金技术1
(一) 原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与
胶体金检测常用检测技术
免疫胶体金光镜染色法 细胞悬液涂片或组织切片,可用胶体金标记的抗体进行染色,也可在胶体金标记的基础上,以银显影液增强标记,使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面,可明显增强胶体金标记的敏感性。 免疫胶体金电镜染色法 可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合,然后进行负
斑点免疫渗滤试验(IFA)的方法类型
1.双抗体夹心法测抗原:用抗体结合在微孔滤膜中央,滴加待检标本,抗原抗体反应后,滴加金标抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。2.间接法测特异性抗体:用抗原包被在微孔滤膜上,滴加待测标本,滴加洗涤液洗涤后,滴加金标抗抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。该法由于血清标本中非目
常用免疫组织化学方法的原理免疫胶体金技术
免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶体金
免疫胶体金技术的应用
胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检测相应的
免疫胶体金技术的简介
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,英文缩写为:GICT。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一
免疫胶体金技术的应用
胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。 1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检