生物样本细胞的提取
1.细胞的破碎当待测组分(主要是各种多肽激素、各种酶以及各种基因工程的产物如胰岛素、生长激素等)存在于生物体细胞内及多细胞生物组织中时,需在分析测定之前将细胞和组织破碎,使这些待测组分充分释放到溶液中去,不同的生物体或同一生物体的不同组织,其细胞破碎的难易程度不一样,使用的方法也不完全相同。如动物胰脏、肝脏、脑组织一般比较柔软,用普通的匀浆器研磨即可,肌肉及心脏组织较韧,需预先绞碎再作成匀浆。植物肉组织可用一般研磨方法,含纤维较多的组织则必须在捣碎器内破碎或加砂研磨。许多微生物均具有坚韧的细胞壁,常用自溶、冷热交替、加砂研磨、超声波和加压处理等方法。总之,破碎细胞的目的就是为了破坏细胞的外壳,使细胞内含物质释放出来,获得有效的提取。除了上述一些方法外,目前人们仍在探寻新的多细胞破碎方法。下面介绍几种在实验室中常用的破碎方法(1)机械法机械法主要是通过机械切力的作用使组织细胞破碎,有以下几种装置和方法可用于组织细胞的破碎。①高速组......阅读全文
生物样本库认可依据
CNAS-R01《认可标识使用和认可状态声明规则》 CNAS-R02《公正性和保密规则》 CNAS-R03《申诉、投诉和争议处理规则》 CNAS-RL01:2019《实验室认可规则》 CNAS-RL02:2018《能力验证规则》 CNAS-RL10:2020《生物样本库认可规则》 C
将生物样本存进“银行”
1月10日，中关村生命银行启新盛典在京举行。作为中关村生命科学园2017年重点开展的创新性建设项目，中关村“生物银行”是由中关村生命科学园孵化器公司和北京起源爱心生物科技有限公司合力打造的生命科学高地。 据悉，生物银行又称生物样本库，主要收集、存储研究用生物样本（包括组织、细胞、血浆、骨髓和
生物样本冷冻储存技术（一）
1 储存温度 生物样本的长期储存通常使用尽可能低的温度来降低样本内的生化反应提高样本内各种成分的稳定性。生物大分子、细胞、组织和器官的常用储存温度有-800C（超低温冰箱）, -1400C（液氮气相或深冷冰箱）以及-1960C（液氮液相），温度越低样本的稳定保存时间越长。0～-600C是水的结
生物样本库与转化医学
随着后基因组时代的来临，对基因的研究引发了新的方法和研究手段的诞生，密切了基础医学与药物研发、临床医学之间的联系。使人们可以更准确地理解环境和人类遗传分子之间的相互作用，以期精确地描绘疾病发生的本质，从而改进对于疾病的诊查和治疗。由此诞生了从实验室到病床，把基础研究所获得的知识、成果快速转化为临
生物样本冷冻储存技术（二）
程序降温/分步降温（programmed freezing/stepwise freezing） 通过控制样本的降温速度可以尽量减少冰晶损伤和溶液损伤。降温速度的控制可通过在不同的温度下分阶段降温（stepwise freezing）或者程序控制降温（programmed free
液氮罐生物样本活性保存
取放物品时要控制在容器颈管内。若必须将提筒提出容器再取放物品，应该等高于提筒侧面孔口的液氮排完后，再将提筒提出，提出时切忌匆匆忙忙的提出，以免液氮从侧面孔逸出冻伤人。 取放完之后，立即将提筒与盖塞轻轻复位。此时要注意尽量缩短液氮罐瓶口的开放时间，更不可把提筒同时全部取出，以免容器吸入空气中的水
从微量样本中同时提取mRNA和天然蛋白
有时，细胞就是那么少，但又要开展多项分析，着实让人为难。丹麦哥本哈根大学的研究人员开发出一种新方法，能从微量的样本中同时提取mRNA和天然蛋白。这项成果发表在《BioTechniques》5月刊上。 在生物学研究的许多领域，样本量往往很有限，特别是人体细胞和组织，如卵泡和胚胎干细胞。但是，研究
磁珠法提取核酸的3种样本处理方法
以生物磁珠为载体提取核酸，所有反应是在液体体系中进行的，但生物样本多种多样，有液体也有固体，或者固液混合体，大多数生物样本在进行核酸提取纯化之前需要进行一定的前处理，液化、富集、除杂等都是常见的前处理方式。一、液化将固体样本转化为液体样本是zui重要的样本前处理方法，固体样本是很难直接在试剂盒的作用
RNA样本提取与判读的方法及常见问题分析
RNA介绍核糖核酸（缩写为RNA，即RibonucleicAcid），存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种，即A（腺嘌呤）、G（鸟嘌呤）、C（胞嘧啶）、U（尿嘧啶），其中
磁珠法提取核酸的3种样本处理方法
以生物磁珠为载体提取核酸，所有反应是在液体体系中进行的，但生物样本多种多样，有液体也有固体，或者固液混合体，大多数生物样本在进行核酸提取纯化之前需要进行一定的前处理，液化、富集、除杂等都是常见的前处理方式。一、液化将固体样本转化为液体样本是最重要的样本前处理方法，固体样本是很难直接在试剂盒的作用下用
病原微生物样本的采集
传染病实验室诊断、传染源调查、自然疫源地监测、流行病学调查研究，都以检出特定的病原微生物或其相关物质为目的。这类样本来源主要是人和宿主动物、媒介昆虫，也包括水、土壤、食品等样本供调查传染源。1、病原微生物样本采集的一般注意事项1）针对性：不要求样品代表性，强调针对性，尽可能采集病原微生物含量最多的部
生物样本的主要检测技术有哪些？
这些待测组分大多数都可以用色谱方法进行分析测定,其中用得最多的是HPLC、GPC、电泳和毛细管电泳分析,一些小分子化合物也可直接或衍生化后用GC分析。当待测组分存在于体液或细胞外时,可采用各种萃取方法将待测组分提取后制备成适合于色谱分析的样品;也可将干扰组分(如蛋白质、DNA、多糖等)沉淀除去,然后
生物样本的基本类型有几种
描述有两种种类型，分人物描述和景物描述。描述要有明确的目的，鲜明生动具体形象，抓住特点突出特点，少而精有特色，使人犹如身临其境经久不忘。人物描述，通过对人物的外貌特征即容貌衣饰神情姿态等描述，反映其内心世界和性格特征；通过对人物的心理活动描述把任务的内心世界展现给读者；通过对人物的行动描述显示其精神
活细胞提取及应用——单个细胞级别的活细胞提取
由于细胞异质性的存在，单细胞层面的分析就变得十分重要。目前对于单细胞分析的方法主要还是通过化学、生物学的方法进行裂解后，提取内容物进行分析，然而这种方法往往会对样本造成一些损伤。直接提取活细胞具有诸多优点，但是操作苦难。如今一种全新使用FluidFM科技的技术新报道有望提供一种活细胞提取新型的简易方
RNA提取心得（组织RNA提取和培养细胞的RNA提取）
一.组织RNA提取 1.最好新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好，这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的（最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的）组织，注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，注意不要拿到常温，待组织解冻后，用 DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，然后
生物分子的溶剂提取法
一、生物分子的溶剂提取法原理：利用溶剂的溶解作用把所需物质从细胞中转移出来。二、影响生物分子的溶剂提取效率的因素： 1、溶剂的性质：根据相似相溶原理。 2、离子强度：离子强度是影响物质溶解度的主要因素，但离子强度对不同物质溶解度的影响不同，如高离子强度下DNA-核蛋白溶解度增加，低离子强度下RN
生物分子的溶剂提取法
一、生物分子的溶剂提取法原理：利用溶剂的溶解作用把所需物质从细胞中转移出来。二、影响生物分子的溶剂提取效率的因素： 1、溶剂的性质：根据相似相溶原理。 2、离子强度：离子强度是影响物质溶解度的主要因素，但离子强度对不同物质溶解度的影响不同，如高离子强度下DNA-核蛋白溶解度增加，低离子强度下RN
植物组织类样本DNA提取完整解操作方法
植物DNA的提取和纯化是植物基因工程研究的基础操作。实施分子标记、基因图谱、基因指纹图谱、基因文库构建、遗传多态性分析、DNA重组、RAPD（随机引物多态性DNA）、RFLP（限制性酶多态性）、基因分离及遗传转化和鉴定等都以提取DNA为前提。目前，对从植物组织中提取DNA方法的要求是：简便、有效、快
细胞总RNA的提取
提取细胞RNA的步骤：1) 六孔板每孔细胞中加入1ml Trizol，冰上放置5min，枪头吹打。2) 将各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中，加入氯仿0.2ml/管，用力振摇15s。15－30℃下孵育2-3min，离心（4℃，12，000g，15min）。3) 离心后液体分为三层（上层－无色
肝脏细胞RNA的提取
一．原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分，也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制，已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究，首先要获得该性状基因，从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关重要的，
细胞RNA的提取方法
（一）细胞总RNA的提取1、6孔板细胞汇合度为90-100%时，取出无菌室，去其上清，用PBS洗两次后，每孔加TRIZOL试剂 1 ml，摇匀，无菌罩内消化3-5 min。2、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中，加新开的氯仿0.2 ml，轻摇15 s。3、室温静置
如何使用NMR对生物样本研究？
高分辨率 NMR 已快速发展成为体液和组织分析中的主要工具。它可用于高通量且一键式全自动化地生成谱图数据，从这些数据中可自动定量生物标志物的含量，或与健康或疾病状态的统计模型相比较。由于其卓越的重现性和在不同实验室间的可转移性，它还可用于大规模流行病学研究。这些优点，加上标准操作流程和标准化工具
生物样本冷冻储存技术有哪些？
1 储存温度 生物样本的长期储存通常使用尽可能低的温度来降低样本内的生化反应提高样本内各种成分的稳定性。生物大分子、细胞、组织和器官的常用储存温度有-80℃(超低温冰箱), -140℃(液氮气相或深冷冰箱)以及-196℃(液氮液相)，温度越低样本的稳定保存时间越长。0～-60℃是水的结晶温度，
WB生物样本总蛋白抽提
一、贴壁细胞蛋白提取A1..将水浴锅的温度调至100℃，等水浴锅达到100℃温度后，取出需要收样的细胞的培养皿或者孔板。2.将缓冲液（1Xloading buffer）置于100℃水浴锅中预热10min。（loding buffer： 是5Xloding buffer用纯水稀释到1Xlodingbu
样本制备方法之蛋白提取的总原则及注意事项
样本制备是实验的*步，也是决定实验成败的关键步骤，获得的蛋白质样品必须均质、可溶，并解离成单个多肽亚基，且尽量减少相互间的聚集，使其zui终仅依赖本身的分子量大小进行分离。常见的样本来源有重组蛋白、细胞和组织等。蛋白提取的总原则和注意事项：1. 尽可能提取完全或降低样本复杂度，只集中提取目的蛋白；2
一步脱蜡法在FFPE样本DNA提取中的应用
什么是FFPE福尔马林固定石蜡包埋技术（Formalin-Fixed and Parrffin-Embedded, FFPE）是一种组织保存技术。这种技术为了维持细胞核蛋白结构，先用福尔马林固定然后将组织用固体石蜡包埋，以供切片后作组织学诊断或研究使用。FFPE技术的应用福尔马林由于可以与蛋白氨基发
浅析溶血对生物样本分析的影响
溶血指的是红细胞破裂，血红蛋白逸出释放到血浆或血清中，可发生在体内和体外，影响溶血的因素也十分复杂。血浆血清发生溶血后，许多生理成分如血红蛋白、胆红素、磷脂等明显增加，这些成分可能会影响溶血样品中药物的检测。生物药物分析的样品一般为血浆或血清样品，存在被测样品少，样品复杂及干扰物质多等问题，而且在实
生物大分子样本的贮存方法
生物大分子的稳定性与保存方法的很大关系。干燥的制品一般比较稳定，在低温情况下其活性可在数日甚至数年无明显变化，贮藏要求简单，只要将干燥的样品置于干燥器内（内装有干燥剂）密封，保持0－4度冰箱即可，液态贮藏时应注意以下几点。1、样品不能太稀，必须浓缩到一定浓度才能封装贮藏，样品太稀易使生物大分子变性。
卫生指标微生物样本的采集
1、卫生指标微生物样本采集的一般注意事项1）代表性：采样量、采样部位应依据检样归属类别的标准要求执行，注意采用随机抽样法，并按批号抽样。2）均匀性：固体粉末样品应边取边混合；液体样品应振荡混匀；涂抹取样的棉拭子应将棉拭子尾部剪断，投入稀释液内充分振荡后，作为原液检样。3）及时性：为避免样品变质和样品
外周血单个核细胞样本的制备
实验方法原理血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液，血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板；而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料外周血试剂、试剂盒肝素生理盐水实验步骤一