生物样本细胞的提取
1.细胞的破碎当待测组分(主要是各种多肽激素、各种酶以及各种基因工程的产物如胰岛素、生长激素等)存在于生物体细胞内及多细胞生物组织中时,需在分析测定之前将细胞和组织破碎,使这些待测组分充分释放到溶液中去,不同的生物体或同一生物体的不同组织,其细胞破碎的难易程度不一样,使用的方法也不完全相同。如动物胰脏、肝脏、脑组织一般比较柔软,用普通的匀浆器研磨即可,肌肉及心脏组织较韧,需预先绞碎再作成匀浆。植物肉组织可用一般研磨方法,含纤维较多的组织则必须在捣碎器内破碎或加砂研磨。许多微生物均具有坚韧的细胞壁,常用自溶、冷热交替、加砂研磨、超声波和加压处理等方法。总之,破碎细胞的目的就是为了破坏细胞的外壳,使细胞内含物质释放出来,获得有效的提取。除了上述一些方法外,目前人们仍在探寻新的多细胞破碎方法。下面介绍几种在实验室中常用的破碎方法(1)机械法机械法主要是通过机械切力的作用使组织细胞破碎,有以下几种装置和方法可用于组织细胞的破碎。①高速组......阅读全文
原代细胞实验中样本的处理方法
原代细胞实验中样本的处理方法1. 血清：全血标本于室温放置2小时或4℃后于1000×g离心20分钟，取上清即可检查，搜集 血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。 2. 血浆：抗凝剂举荐运用EDTA.Na2，标本搜集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可 检查。防止运用溶血，高血脂
外周血单个核细胞样本的制备
实验方法原理 血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液，血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板；而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料 外周血试剂、试剂盒 肝素生理盐水实验
细胞核提取
HeLa Cell Nuclei Preparation (John Garland)Prepare nuclear extract from HeLa cell · Extract Preparation (Brent Graveley)Preparation of nuclea
提取悬浮细胞RNA
提取RNA器械：离心管2支，吸管4个，酒精灯，打火机，记号笔，200ul,1000UL枪，DEPC泡过的枪头EP管，紫外照过的手套。滤纸，DEPC纯水（750ml无水乙醇＋150mlDEPC水,剧烈振荡，使劲的摇晃，直至混匀），氯仿，75％酒精，异丙醇，Trizol，预冷的离心机（两种），EP管架（
如何提取细胞线粒体
提取新鲜心肌组织细胞内线粒体的方案：心肌组织切碎后在4 ℃介质（0.25 mol/L蔗糖、10 mmol/L Tris-HCl pH7.4，0-4℃）中制备心肌组织匀浆。匀浆经750g、离心10 min后留上清，以9000 g离心20 min 后留沉淀，重新悬浮后以9000 g再离心20 min，弃
活体肿瘤样本库与常规肿瘤生物样本库有什么区别？
一、常规生物样本库 肿瘤在临床上有实体瘤和非实体瘤之分。来源于临床活检或外科手术的固体肿瘤组织，由病理医生决定切割组织的关键部份用于常规病理诊断，且在不影响常规病理诊断的情况下，组织的剩余部份被生物样本库切割收集，将肿瘤蜡块存储到样本库中。但是这种方式保存的样本，不能够保证保存下来的肿瘤块是否
唾液样本处理系列三：唾液RNA提取试剂盒
2020年4月中旬，美国罗格斯大学宣布，美国食品和药物管理局（FDA）在其紧急使用授权（emergency use authorization，EUA）下批准了首个采用唾液作为SARS-CoV-2（新冠病毒）检测生物材料的新检测方法。 2020年8月中旬，美国FDA宣布，授予
热解法提取生物柴油的工艺
与其他转化方法相比，热解工艺的主要优点是速度快。目前还不能将藻类直接热解为合成柴油燃料，但是可以转化为生物油，再进一步加工成为生物燃料。快速热解（Flash-Pyrolysis）是常用的一项热解技术，生物质在快速热解之前，要先粉碎，微藻却不用经过这一步骤，并且微藻中没有纤维素需要处理。过去几年间，在
低温保存对生物样本及其生物大分子的影响
引言生物样本库主要是指收集和应用健康及疾病生物体的生物分子、细胞、组织和器官等，包括人体器官、组织、体液或处理过的样本（DNA、RNA、蛋白等），以及与这些样本相关的临床资料、质控、管理等生物应用系统。在医学研究中，生物样本是联系分子信息与疾病的桥梁。根据使用目的的区别，样本的保存要求也会有所差别。
微生物发酵提取法提取花青素的介绍
此方法将生物发酵技术应用于花青素的提取之中,是生物科学与化工生产之间的超强渗透与有效结合。微生物发酵法利用微生物或酶让含有花青素的细胞胞壁降解分离,使细胞胞体内花青素充分溶入到提取液中,从而增加提取的产率与速率。
生物芯片实验样本选择和设计
基因芯片对样本的选择非常重要，选用有效的样本可以使实验结果可靠。但是基因芯片对样本要求非常高，理想的样本往往得不到。因此，在可选择的范围内，样本的选择和设计非常重要。 (1)待测样本的选择：基因芯片需要的样本来源非常广泛，可以是组织来源的或血液来源的，也可以是培养的细胞或病人的体外分泌物等
几种典型扫描电镜生物样本制备
隨着科学技术的发展，扫描电子显微镜技术已成为检测物质性能和表征微观结构的重要手段，被广泛应用于食品学、生物学、医学、高分子材料等领域[1]。扫描电子显微镜在科学研究中有广泛应用，如观察不同淀粉颗粒的超微形貌[2]、蛋白复合膜的微观结构[3]、淀粉纳米颗粒的研究[4]及不同储藏过程中肉食类微结构的变化
红细胞凝集试验的样本的制备方法
1. 阿氏液（Alsever）：即红细胞保养液枸橼酸钠（5H2O） 0.80g枸橼酸（H2O） 0.055g葡萄糖 2.05g氯化钠 0.42g双蒸水 加至 100 ml将以上试剂加热溶解于双蒸水中，调整pH至6.8，115℃灭菌10min,4℃保存备用。2. 0.5% 鸡红细胞制备方法先用灭菌注射
总细胞RNA的提取方法
实验概要总细胞RNA的提取在建库过程中，由于cDNA合成这一步将使用通用引物oligo dT，因此在总RNA提取这一步中，提取纯化mRNA不是非常必要的。提取高纯度的总细胞RNA足可以被用作cDNA合成的模板，目前提取RNA的方法很多，也有不少商业化的试剂盒。实验步骤1. TRIZOL法 1)
如何提取细胞中的线粒体
看你的目的，是要分离线粒体蛋白（不需要线粒体有活性），还是要做线粒体功能？但是方法一般是把细胞磨碎（有特殊的匀浆器），然后密度梯度离心。如果需要纯度很高，那还要超速离心。需要提醒的就是，这样提取线粒体需要大量，大量的细胞。说明书上说，如Hela，要1-2ml。。。。就是说细胞离下来，得有1-2个ml
植物细胞线粒体DNA的提取
实验方法原理分离线粒体DNA和叶绿体DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分离完整的细胞器,然后从细胞器中提取DNA。要获得高纯度的细胞器DNA,关键是要把所要的细胞器与其他亚细胞结构分离开来,这可以通过差速离心或梯度离心来完成。完整的细胞器经裂解后,可以通过CsCl离心或酚-氯仿抽提获得DNA。在
植物细胞线粒体DNA的提取
实验方法原理 分离线粒体DNA和叶绿体DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分离完整的细胞器,然后从细胞器中提取DNA。要获得高纯度的细胞器DNA,关键是要把所要的细胞器与其他亚细胞结构分离开来,这可以通过差速离心或梯度离心来完成。完整的细胞器经裂解后,可以通过CsCl离心或酚-氯仿抽提获得DNA。
流式细胞术，怎么处理样本？
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）能够快速测定细胞悬液中单个细胞的生物学性质，并可以对特定的细胞进行分选收集。广泛用于细胞生物学，免疫学，遗传学，基础医学等领域。接下来的 Protocol 中以小鼠的淋巴细胞为例进行细胞表面和胞内染色。一. 试剂准备Wash Buffer：PBS+1
临床试验生物样本的处理与保存规范
临床试验是新药人体试验的起始阶段，即评价人体对于新药的耐受性和安全性[1]。2003年国家食品药品监督管理总局(CFDA)现更名为国家药品监督管理局（NMPA）颁布了《药物临床试验质量管理规范》(GCP)，其中规定研究者应获得所在医疗机构或主管单位的同意，保证有充分的时间在方案规定的期限内负责和
病毒－DNA－的提取实验——培养细胞中病毒－DNA－的提取
实验材料细胞试剂、试剂盒裂解液TE 缓冲液仪器、耗材培养瓶EP管真空泵实验步骤1. 贴壁培养细胞倾去培养液，加 PBS 洗 2次,加胰蛋白酶消化 (37℃, 5~10 min)后移入Ep管中，2000 r/min 离心 10 min, 弃上清液，用 PBS 悬浮细胞，离心洗涤 2~3次，用 PBS
简介流式细胞术实验样本的保存
样本的保存：理想状态下，样本应在采集后立刻进行处理和染色。肝素抗凝的血和骨髓通常可保存至48-72小时/室温（16-25）；EDTA抗凝的外周血和骨髓可保存12-24小时/室温（16-25）；ACD抗凝的外周血可保存至72小时/室温（16-25）；对于只作胞内染色的样本，可固定细胞以长期保存。但
流式细胞术的检测样本有哪些？
流式细胞术的检测样本类型多样，常见的包括：外周血：包括全血或经过分离处理的白细胞。骨髓：常用于血液系统疾病的诊断和监测。组织细胞悬液：例如实体瘤组织经过酶消化处理后制成的单细胞悬液。培养细胞：如细胞系、原代培养细胞等。脑脊液：可用于检测其中的免疫细胞或肿瘤细胞。胸水、腹水：分析其中的细胞成分，辅助诊
ELISA实验之细胞样本的处理方法
ELISA（酶联免疫吸附剂测定）是一种快速、灵敏、准确可靠的一种定量分析方法，样本的处理对于ELISA实验的成功有着举足轻重的作用。 利用ELISA进行检测的样本类型包括常见的血液（血清、血浆），组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水、前
生物薄膜DNA、RNA提取要点
早前的文章我们讨论过了生物薄膜（biofilm）样品的基本特性以及影响样品制备和处理方法的因素。今天我们与你分享提取生物薄膜样品DNA或RNA的几个要点。下面列是我们处理了大量各种类型生物薄膜和微生物垫（biomats）总结出来的，以及与我们联合共同开发PowerBiofilm Kit的科学家的经
水溶液提取法提取氟生物（植物）所需的仪器和试剂
试剂(1)NaOH,优级纯。(2)冰乙酸,分析纯(3)柠檬酸钠,分析纯。(4)电导率为18.2MΩ/cm的二次去离子水(或 Millipore超纯水)(5)氟的标准贮备溶液,1000mg/kg。主要仪器(1)氟离子选择电极。(2)pH计。(3)精确度0.001g的分析天平(4)翻转型振荡机。(5)离
氟生物（植物）有效态的化学提取方法水溶液提取法
一、方法要点本方法适用于各种类型土壤中氟的生物(植物)有效态的化学提取分析。提取剂采用电导率为18.2MΩ/cm的二次去离子水。提取液中氟的浓度可用氟离子选择电极法进行测定。二、试剂(1)NaOH,优级纯。(2)冰乙酸,分析纯(3)柠檬酸钠,分析纯。(4)电导率为18.2MΩ/cm的二次去离子水(或
毛细管电泳的生物样本的相关应用
生物体内药物及其代谢物的随时间与位置分布研究，即药物动力学分析，在临床医学中有重要意义。在非水溶剂中可降低被分析物与管壁的作用，降低由于吸附所引起的峰拓宽并改善拖尾，同时可显著提高被分析物的回收率，降低用管壁面积较大的毛细管进行分析时被分析物的损失。近年来，用毛细管电泳法进行生物样本中的药物及其
什么是抗原提取细胞－？
抗原提取细胞是指具有摄取、处理抗原并将抗原信息提呈给T淋巴细胞的一类细胞，又称为辅佐细胞。在胸腺依赖性抗原诱导B淋巴细胞产生抗体的过程中，不仅需要T、B淋巴细胞的协同作用，还需要另一类细胞的协助，遂将该类细胞称为辅佐细胞。在机体的免疫识别、免疫应答与免疫调节中起重要作用。 T细胞按照功能和表面标志
组织/细胞RNA快速提取
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示： 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇! 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%，如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。1. 组织培养细胞a. 收
脂肪细胞RNA提取原理
氯仿是分子量比较大的有机溶剂，在提取RNA时，氯仿可以有效的使有机相和无机相迅速分离。DNA提取过程 有机相中主要是酚和蛋白结合，从而使得蛋白和DNA脱离，DNA进入水相。但是在RNA的提取过程就要避免蛋白和DNA脱离，否则DNA会释放到水相。不管有酚也好，没有酚也好，氯仿本身也对蛋白有变性作用，剧