尿液蛋白质定量检测方法

丽春红-S法 尿液标本中的蛋白质与丽春红-S染料混匀后一起被三氯醋酸沉淀,将沉淀物溶解于碱性溶液中,此时溶液呈紫色,显色深度与蛋白质浓度成正比。 试剂三氯乙酸-丽春红-S试剂原液:称取丽春红-S 1.0 g,加入到1 000 ml 300 g/L三氯乙酸中溶解。 三氯乙酸-丽春红-S试剂应用液:将原液用蒸馏水按1:10稀释,放置室温稳定数月。 蛋白定性试剂。0.2 mol/L氢氧化钠溶液。 蛋白标准曲线:把定值蛋白稀释成不同的浓度,按操作测定其吸光度,以吸光度为横坐标,以稀释后的蛋白浓度为纵坐标绘制标准曲线。 双缩脲比色法 以磷钨酸乙醇溶液沉淀尿中的蛋白质,在碱性介质中蛋白质与铜离子形成紫红色络合物,与标准液比色即可得出尿中蛋白质的含量。......阅读全文

尿液蛋白质定量检测方法

  丽春红-S法  尿液标本中的蛋白质与丽春红-S染料混匀后一起被三氯醋酸沉淀,将沉淀物溶解于碱性溶液中,此时溶液呈紫色,显色深度与蛋白质浓度成正比。  试剂三氯乙酸-丽春红-S试剂原液:称取丽春红-S 1.0 g,加入到1 000 ml 300 g/L三氯乙酸中溶解。  三氯乙酸-丽春红-S试剂应

尿液蛋白质定量检测操作

  先做尿蛋白定性试验,以适当稀释标本。在试管中加入100μl标本,再加入1 ml三氯乙酸一丽春红-S应用液,混匀后以3 000 r/min离心15分钟,吸去上清液,倒置于洁净滤纸上。在沉淀中加入0.2 mol/L氢氧化钠溶液l ml,用560 nm波长测定其吸光度,查标准曲线的蛋白含量。

尿液蛋白质定量检测试剂

  蛋白沉淀液:称取磷钨酸7.5 g,加入30 ml蒸馏水、95%乙醇385 ml、浓盐酸25 ml。  双缩脲液:(1)称取枸橼酸钠34.6 g,无水碳酸钠20 g,加入120 ml蒸馏水使其溶解;(2)称取硫酸铜3.46 g,加入20 ml蒸馏水使其溶解。将(1)、(2)混合,加入蒸馏水至200

蛋白质检测和定量方法

蛋白质定量方法最早出现在20世纪50年代早期,当时物理学家和化学家进入生物学领域,并将他们的技术应用于蛋白质的分析和测量。 Lowry蛋白质分析是第一个确定溶液中蛋白质总水平的生化分析。不久之后,该测定通过其他测量方法引入,包括紫外(UV)系统和氨基酸分析。所有这些方法都能够表征水中的蛋白质或非

蛋白质定量检测方法——BCA法

  BCA(Bicinchoninc acid procedure,4,4’-二羧-2,2’-二喹啉)法与Lowry法相似,主要差别在碱性溶液中,蛋白质使Cu2+转变Cu+后,进一步以BCA 取代Folin试剂与Cu+结合产生深紫色,在波长562 nm有强的吸收。  它的优点在于碱性溶液中B

蛋白质定量检测方法——紫外吸收法

大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收,这是由于蛋白质中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,可用于测定0.1~0.5mg/mL含量的蛋白质溶液。取9支试管分别标号,前8支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液,1号试管不加标准蛋白溶液,最后一支试管加待测蛋白质溶液,而不加标准蛋白溶液,每支试管液体总

蛋白质定量检测方法——酚试剂法

取6支试管分别标号,前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液,最后一支试管加待测蛋白质溶液,不加标准蛋白溶液,在室温下放置30分钟,以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照,于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。优点:灵敏度高,对水溶性蛋白质含量的测定很有效。缺点:①费时,要精确控制操作时间;

尿液蛋白质检查的检测方法及评价

  1. 尿蛋白定性试验为蛋白尿的过筛试验。  (1)试带法:利用pH指示剂的蛋白误差原理。本法对清蛋白较敏感,对球蛋白的敏感性仅为清蛋白的1/100~1/50,且可漏检本周蛋白。尿液pH值增高也可产生假阳性。本法快速、简便、易于标准化,适于健康普查或临床筛检。  (2)加热乙酸法:为传统的经典方法

尿液蛋白质检查检测方法及评价

1. 尿蛋白定性试验为蛋白尿的过筛试验。(1)试带法:利用pH指示剂的蛋白误差原理。本法对清蛋白较敏感,对球蛋白的敏感性仅为清蛋白的1/100~1/50,且可漏检本周蛋白。尿液pH值增高也可产生假阳性。本法快速、简便、易于标准化,适于健康普查或临床筛检。(2)加热乙酸法:为传统的经典方法。加热煮沸使

蛋白质的检测和定量方法以及进展

国家标准物质资源平台:蛋白质定量方法早出现在20世纪50年代早期,当时物理学家和化学家进入生物学领域,并将他们的技术应用于蛋白质的分析和测量。 Lowry蛋白质分析是个确定溶液中蛋白质总水平的生化分析。不久之后,该测定通过其他测量方法引入,包括紫外(UV)系统和氨基酸分析。所有这些方法都能够表征水中

蛋白质的检测和定量方法以及进展

国家标准物质资源平台:蛋白质定量方法最早出现在20世纪50年代早期,当时物理学家和化学家进入生物学领域,并将他们的技术应用于蛋白质的分析和测量。 Lowry蛋白质分析是个确定溶液中蛋白质总水平的生化分析。不久之后,该测定通过其他测量方法引入,包括紫外(UV)系统和氨基酸分析。所有这些方法都能

蛋白质定量检测方法——双缩脲法

双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋

蛋白质定量检测方法——凯氏定氮法

凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定

蛋白质定量检测方法——考马斯亮蓝法

考马斯亮蓝显色法的基本原理是根据蛋白质可与考马斯亮蓝G-250 定量结合。当考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合后,其对可见光的最大吸收峰从 465nm 变为 595nm。在考马斯亮蓝 G-250 过量且浓度恒定的情况下,当溶液中的蛋白质浓度不同时,就会有不同量的考马斯亮蓝 G-250 从吸收峰为

蛋白质定量常用方法

1.基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚试剂比色法 由于各种蛋白质分子中上述两种氨基酸的组成比例不同,特别是白蛋白含色氨酸为0.2%,而γ-球蛋白中含量达2%-3%,导致较大的差异。Lowry的改良法在酚试剂中加入Cu2+,集中原法和双缩脲反应两者的作用,使呈色灵敏度提高。其中75%的呈色依赖

蛋白质定量常用方法

1.基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚试剂比色法 由于各种蛋白质分子中上述两种氨基酸的组成比例不同,特别是白蛋白含色氨酸为0.2%,而γ-球蛋白中含量达2%-3%,导致较大的差异。Lowry的改良法在酚试剂中加入Cu2+,集中原法和双缩脲反应两者的作用,使呈色灵敏度提高。其中75%的呈色依

蛋白质定量检测方法——胶体金测定法

  胶体金(colloidal gold)是氯金酸(chloroauric acid)的水溶胶,呈洋红色,具有高电子密度,并能与多种生物大分子结合。  胶体金是一种带负电荷的疏水胶体遇蛋白质转变为蓝色,颜色的改变与蛋白质有定量关系,可用于蛋白质的定量测定。

蛋白质的定量测定方法

一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例,其反应式如下:NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S

蛋白质的定量测定方法

一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例,其反应式如下:NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S

尿液胆红素检查检测方法

1、重氮法 在强酸介质中结合胆红素与二氯苯胺重氮盐起偶联反应,生成红色的复合物。维生素C浓度达1.42mmol/L和亚硝酸盐存在时,可抑制重氮反应而呈假阴性。2、氧化法 ①Smith碘环法:最为简单,但灵敏度低,目前已少用。②Harrison法:操作繁琐,但灵敏度较高。

用尿液分析仪和化学定量法测定脑脊液糖和蛋白质

 尿液自动分析仪已在临床广泛应用,有文献报道用对脑脊液标本进行糖和蛋白质等项目进行测定。我们从1996年1月~1999年6月用尿液分析仪和常规的化学定量法同时测定临床送检的65例脑脊液标本的糖和蛋白质,发现两法结果存在显著差异。现报告如下。   1 材料与方法   1.1 尿液分析仪 美国泰

定量蛋白质组学方法分类

1 背景和意义从生命活动的直接执行者——蛋白质的角度研究生命现象和规律(特别是疾病防治和病理研究)已成为研究生命科学的主要手段。而这些研究往往离不开对细胞、组织或器官中含有蛋白质种类和表达量的研究。对处不同时期、不同条件下蛋白质表达水平变化的研究,识别功能模块和路径,监控疾病的生物标志物,这些研究都

蛋白质检测和定量方法和最新进展

  蛋白质定量方法最早出现在20世纪50年代早期,当时物理学家和化学家进入生物学领域,并将他们的技术应用于蛋白质的分析和测量。 Lowry蛋白质分析是第一个确定溶液中蛋白质总水平的生化分析。不久之后,该测定通过其他测量方法引入,包括紫外(UV)系统和氨基酸分析。所有这些方法都能够表征

蛋白质检测的定量方法及最新进展

蛋白质定量方法最早出现在20世纪50年代早期,当时物理学家和化学家进入生物学领域,并将他们的技术应用于蛋白质的分析和测量。 Lowry蛋白质分析是第一个确定溶液中蛋白质总水平的生化分析。不久之后,该测定通过其他测量方法引入,包括紫外(UV)系统和氨基酸分析。所有这些方法都能够表征水中的蛋白质或非

蛋白质检测和定量方法和最新进展

  分析百科网讯 蛋白质定量方法最早出现在20世纪50年代早期,当时物理学家和化学家进入生物学领域,并将他们的技术应用于蛋白质的分析和测量。 Lowry蛋白质分析是第一个确定溶液中蛋白质总水平的生化分析。不久之后,该测定通过其他测量方法引入,包括紫外(UV)系统和氨基酸分析。所有这些方法都能够表征水

尿液本周蛋白检查的检测方法

1.热沉淀-溶解法基于BJP在56℃凝固,100℃溶解的特性而设计。本法特异性较高,操作简便但费时,要求标本量较大,灵敏度不高,致使假阴性率高。2.对-甲苯磺酸法基于对-甲苯磺酸法能沉淀相对分子质量较小的BJP,而与相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不起反应的原理而测定。本法操作简便、灵敏度高,但特异

尿液分析仪的检测方法

1、尿PH检查结果有二重含义:①反映体内酸碱代谢状态;②由于尿蛋白、尿比密的测定原理是基于膜尬上最后PH试剂的颜色变化,因此分析PH变化还有监控尿PH变化对其它膜尬区反应的干扰作用。2、尿比密检查尿比密测定曾采用悬浮法和折射仪法,主要测定尿内固体物浓度随着10项尿液分析仪的问世,试带法测定尿比密得到

尿液酮体检查的检测方法

1.试带法基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法,是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速,尤其适合于床边检验。不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。2.湿化学法(1)Rothera法:在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。(2)Gerhar

尿液酮体的检测方法及评价

1.试带法基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法,是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速,尤其适合于床边检验。不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。2.湿化学法(1)Rothera法:在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。(2)Gerhar

尿液分析仪的检测方法

1、尿PH检查结果有二重含义:①反映体内酸碱代谢状态;②由于尿蛋白、尿比密的测定原理是基于膜尬上最后PH试剂的颜色变化,因此分析PH变化还有监控尿PH变化对其它膜尬区反应的干扰作用。2、尿比密检查尿比密测定曾采用悬浮法和折射仪法,主要测定尿内固体物浓度随着10项尿液分析仪的问世,试带法测定尿比密得到