生物样品的前处理技术化学及生物化学法进行细胞破碎

主要是通过化学试剂或酶破坏细胞壁而使细胞破碎,常用的有如下一些方法。①自溶法 将待破碎的新鲜生物样品存放在一定pH值和适当的温度下,利用组织细胞中自身的酶系将细胞破坏,使细胞内含物释放出来的方法。自溶的温度,动物样品常选在0~4℃,微生物材料则多在室温下进行。自溶时,需加少量防腐剂如甲苯、氯仿等以防止外界细菌的污染。②溶菌酶处理 溶菌酶可用蛋清或微生物发酵方法制得,具有专一地破坏细菌细胞壁的功能。如用噬菌体感染的大肠杆菌细胞制备DNA时,采用pH8.0、0.1mol/L Tris-0.01mol/L EDTA制成每毫升2亿个左右细胞的细胞悬液,然后加入100pg~1mg的溶菌酶,37℃ pH8.0条件下保温10min,细胞壁即被破坏。溶菌酶作用专一性强,适用于多种微生物,人们较喜欢使用。除溶菌酶外,蜗牛酶、纤维素酶也常被选为破坏细菌及植物细胞之用。③表面活性剂处理法 &......阅读全文

生物样品的前处理技术化学及生物化学法进行细胞破碎

主要是通过化学试剂或酶破坏细胞壁而使细胞破碎,常用的有如下一些方法。①自溶法   将待破碎的新鲜生物样品存放在一定pH值和适当的温度下,利用组织细胞中自身的酶系将细胞破坏,使细胞内含物释放出来的方法。自溶的温度,动物样品常选在0~4℃,微生物材料则多在室温下进行。自溶时,需加少量防腐剂如甲苯、氯仿等

生物样品的前处理技术机械法进行细胞破碎

机械法主要是通过机械切力的作用使组织细胞破碎,有以下几种装置和方法可用于组织细胞的破碎。①高速组织捣碎机   由调速器、支架、马达、带杆刀叶、有机玻璃管(筒口加盖)等部分组成,操作时将样品配成稀糊状液,放置于筒内(约占1/3体积),固定筒上的盖子,将调速器拨至最慢处,开动马达后逐步加速至所需速度,一

生物样品的前处理技术物理法进行细胞破碎

物理法主要通过各种物理因素的作用使组织细胞破碎,常用的有以下一些方法。①反复冻融法    把待破碎样品冷至20-15℃使之冻固,然后缓慢融化,如此反复操作,大部分动物细胞及细胞内的颗粒可被破碎。②冷热交替法    在细菌或病毒中提取蛋白质和核酸时可使用此法。操作时,将材料放入沸水中,在90℃左右维持

生物样品的前处理技术进行细胞破碎的其它方法

通过改变细胞膜透性,破坏蛋白质与脂类的结合,也可达到破坏细胞的目的,有利于蛋白质、酶等物质的分离提取。这方面应用较多的有真空干燥和用丙酮处理制成丙酮粉的方法。在酶的制备中,用丙酮干燥,不仅是使细胞膜破碎的有效方法,而且可做成具有酶活力的干粉长时间保存,作为一个很方便的原料样品在需要分析测定时以水或缓

生物样品的前处理技术细胞破碎办法介绍

当待测组分(主要是各种多肽激素、各种酶以及各种基因工程的产物如胰岛素、生长激素等)存在于生物体细胞内及多细胞生物组织中时,需在分析测定之前将细胞和组织破碎,使这些待测组分充分释放到溶液中去,不同的生物体或同一生物体的不同组织,其细胞破碎的难易程度不一样,使用的方法也不完全相同。如动物胰脏、肝脏、脑组

样品前处理细胞破碎

  细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,由于细菌、酵母、真菌、植物都有细胞壁,但成分不同,且同类细胞结成的网状结构不同,因此其细胞壁的坚固程度不同,总体呈现递增态势。动物细胞虽没有细胞壁,但具有细胞膜,也需要一定的细胞破碎方法来破膜,达到提取产物的

生物化学实验基本技术:破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

生物化学实验基本技术:破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

生物化学实验基本技术—破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

生物化学实验基本技术:破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

样品前处理方法系列介绍——超声波破碎法

超声波是一种频率高于20000赫兹的声波,它的方向性好,穿透能力强,易于获得较集中的声能,在水中传播距离远,可用于测距、测速、清洗、焊接、碎石、杀菌消毒等。在医学、军事、工业、农业上有很多的应用。超声波效应:当超声波在介质中传播时,由于超声波与介质的相互作用,使介质发生物理的和化学的变化,从而产生一

生物样品的前处理技术RNA的提取

用0.14mol/L氯化钠溶液将组织作匀浆并反复提取细胞质中的核蛋白,而留下含有DNA的细胞核物质,然后用10%乙酸调至pH4.2沉淀,离心弃去上清液,先用0.5mol/L氯化钠溶液沉淀后用水洗涤沉淀,得核糖核蛋白后溶解于0.5mol/L碳酸氢钠溶液中,离心,取上清液,调至pH4.2沉淀,以0.5m

生物样品的前处理技术DNA的提取

DNA主要存在于细胞核中,绝大数以脱氧核糖核蛋白形式存在。以1mol/L氯化钠溶液提取,将得到的脱氧核苷酸核蛋白黏液与含少量辛醇和戊醇的氯仿一起摇荡,除去蛋白质。

样品前处理技术

如何对越来越复杂的样品基质进行痕量分析及其样品前处理已成为业界的一大挑战。为了满足全球日益增长的人口需要,食物产量需要很大的提升,这也导致了多种农药的使用。但农药的施放有时并非完全合理,有时农产品本身不需要,也会被施放,所以检测工作者必须不断改善检测技术,对越来越多的农药进行痕量检测。而此时多

生物样品的自动前处理

图1.  Co-Sense for BA系统基本配置图。 在血浆、血清和尿样等生物样品的分析中,在前处理中去除蛋白和其它基地物质等大分子的干扰,对于目标小分子药品的分析是非常重要的。本文介绍了一种有效的在线预处理柱,实验表明效果良好。 Co-Sense for BA系统利用独特的

生物样品的自动前处理

图1.  Co-Sense for BA系统基本配置图。 在血浆、血清和尿样等生物样品的分析中,在前处理中去除蛋白和其它基地物质等大分子的干扰,对于目标小分子药品的分析是非常重要的。本文介绍了一种有效的在线预处理柱,实验表明效果良好。 Co-Sense for BA系统利用独特的

气相色谱法的样品前处理技术

 为了扩大气相色谱法的适用范围,提高检测灵敏度,有些样品在注入色谱柱前需要作适当的前处理。常用的样品前处理技术有顶空法、衍生化法、裂解法、吸附管法等,下面简要介绍应用较多的顶空法和衍生化法。一、顶空分析法   对于有些固体或液体样品中的挥发性成分,可采用顶空技术进行试样的前处理。这种方法是将固体或液

样品前处理技术的分类

由于传统的样品前处理方法存在诸多问题和缺点,近年来,分析工作者改进并创新了一系列的样品前处理技术,包括各种前处理新方法与新技术的研究及这些技术与分析方法在线联用设备的研究两个方面。如:液-液微萃取、自动索式提取、吹扫捕集、微波辅助萃取、超声波萃取、超临界流体萃取、固相萃取、固相微萃取、顶空法、膜萃取

石墨炉原子吸收法样品前处理技术浅谈

  摘要:采用原子吸收光谱法测定样品中金属元素,样品前处理是关键环节,合适的、简便有效的样品前处理方法决定了检测结果的准确性,本文阐述了样品前处理技术,介绍了几种原子吸收光谱法样品前处理的方法,以及样品处理过程需注意的问题   样品前处理技术是指样品的制备和对样品采用合适的分解、溶解及对待组分进行提

生物样品的前处理技术蛋白质的提取

由于大部分蛋白质都能溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液,所以蛋白质的提取一般是以水溶液为主,其中盐溶液和缓冲溶液对蛋白质的稳定性好、溶解度大,是提取蛋白质最常用的溶剂。当细胞粉碎后,用盐溶液或缓冲溶液提取蛋白质时,应注意以下一些条件。(1)盐浓度常用等渗盐溶液,尤其以0.02~0.05mol/L磷酸缓冲溶

生物样品前处理主要步骤及现代常用的提取技术有哪些

一般要在测定之前进行样品的前处理,即进行分离、纯化、浓集,必要时还需对待测组分进行化学衍生化,从而为测定创造良好的条件。

生物样品前处理主要步骤及现代常用的提取技术有哪些

一般要在测定之前进行样品的前处理,即进行分离、纯化、浓集,必要时还需对待测组分进行化学衍生化,从而为测定创造良好的条件。

中药样品的前处理技术介绍

中药及其制剂的分析检验,一般多采取估计取样,即将整批中药抽出一部分具有代表性的供试品进行分析、观察,得出规律性“估计”的一种方法。对检测结果进行数据处理和分析,最后做出科学的评价。取样时应注意以下两点。(1)取样要具有一定的代表性;取样的基本原则应该是均匀、合理。为使供试品能准确地反映整批中药及其制

中性粒细胞生物化学特点

(1)中性粒细胞的颗粒结构  含有三种颗粒、分泌泡及溶酶体。 1)嗜天青颗粒:又称初级颗粒,在早幼粒细胞中数量最多,颗粒中含有髓过氧化物酶、溶菌酶及较多的水解酶。 2)特异颗粒:又称次级颗粒,其中含有乳铁蛋白、溶菌酶等,颗粒膜上有多种CD抗原和受体,如:CD15、CD66、CD67、CD11

细胞凋亡的生物化学变化

1)DNA的片段化细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体的DNA降解,这是一个较普遍的现象。这种降解非常特异并有规律,所产生的不同长度的DNA片段约为180-200bp的整倍数,而这正好是缠绕组蛋白寡聚体的长度,提示染色体DNA恰好是在核小体与核小体的连接部位被切断,产生不同长度的寡聚核小体片段,实验证

细胞凋亡的生物化学变化

1)DNA的片段化细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体的DNA降解,这是一个较普遍的现象。这种降解非常特异并有规律,所产生的不同长度的DNA片段约为180-200bp的整倍数,而这正好是缠绕组蛋白寡聚体的长度,提示染色体DNA恰好是在核小体与核小体的连接部位被切断,产生不同长度的寡聚核小体片段,实验证

细胞凋亡的生物化学变化

1)DNA的片段化细胞凋亡细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体的DNA降解,这是一个较普遍的现象。这种降解非常特异并有规律,所产生的不同长度的DNA片段约为180-200bp的整倍数,而这正好是缠绕组蛋白寡聚体的长度,提示染色体DNA恰好是在核小体与核小体的连接部位被切断,产生不同长度的寡聚核小体片段

在进行物理吸附分析前要对样品进行脱气处理

在进行气体吸附实验之前,固体表面必须清除污染物,如水和油。大多数情况下,表面清洁(脱气)过程是将固体样品置于一玻璃样品管中,然后在真空下加热。右图展示了预处理后的固体颗粒表面,它含有裂纹和不同尺寸和形状的孔。

9大化学实验室样品前处理新技术

快速、简便、自动化的前处理技术不仅省时、省力,而且可以减少由于不同人员操作及样品多次转移带来的误差,还可以避免使用大量的有机溶剂并减少对环境的污染。在分析工作中,试样的前处理是一个十分重要的步骤,一些难分解的样品有时成为分析测定中的主要问题。随着现代科学技术的迅速发展,分析仪器的自动化水平不断提高,

中药分析样品前处理技术(二)

液相微萃取(LPME) LPME技术具有操作简便、快捷、成本低廉、易与色谱系统联用等优点。近年来,作为一种新型的样品前处理技术,已经引起药物分析领域研究人员的注意。 室温离子液体(Room Temperature Ionic Liquids),是指在室温或室温附近温度下呈液态的仅由