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用0.14mol/L氯化钠溶液将组织作匀浆并反复提取细胞质中的核蛋白,而留下含有DNA的细胞核物质,然后用10%乙酸调至pH4.2沉淀,离心弃去上清液,先用0.5mol/L氯化钠溶液沉淀后用水洗涤沉淀,得核糖核蛋白后溶解于0.5mol/L碳酸氢钠溶液中,离心,取上清液,调至pH4.2沉淀,以0.5mol/L氯化钠溶液再一次除脱氧核糖核蛋白。核糖核蛋白中的蛋白质可用含少量辛醇的氯仿抽提除去,核酸留在碳酸氢钠溶液中,加入乙醇,RNA以钠盐形式沉淀出来。破碎细胞做成匀浆时,加入去污剂十二烷基磺酸钠或二甲苯磺酸钠,加入含水苯酚,与匀浆一起振荡,DNA与蛋白质沉淀于苯酚层,水层中含有RNA和多糖,然后用乙醇使RNA沉淀。苯酚法是目前提取不降解的RNA最有效的方法。......阅读全文
用0.14mol/L氯化钠溶液将组织作匀浆并反复提取细胞质中的核蛋白,而留下含有DNA的细胞核物质,然后用10%乙酸调至pH4.2沉淀,离心弃去上清液,先用0.5mol/L氯化钠溶液沉淀后用水洗涤沉淀,得核糖核蛋白后溶解于0.5mol/L碳酸氢钠溶液中,离心,取上清液,调至pH4.2沉淀,以0.5
DNA主要存在于细胞核中,绝大数以脱氧核糖核蛋白形式存在。以1mol/L氯化钠溶液提取,将得到的脱氧核苷酸核蛋白黏液与含少量辛醇和戊醇的氯仿一起摇荡,除去蛋白质。
由于大部分蛋白质都能溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液,所以蛋白质的提取一般是以水溶液为主,其中盐溶液和缓冲溶液对蛋白质的稳定性好、溶解度大,是提取蛋白质最常用的溶剂。当细胞粉碎后,用盐溶液或缓冲溶液提取蛋白质时,应注意以下一些条件。 (1)盐浓度 常用等渗盐溶液,尤其以0.02～0.05mol/L
一般要在测定之前进行样品的前处理，即进行分离、纯化、浓集，必要时还需对待测组分进行化学衍生化，从而为测定创造良好的条件。
图1. Co-Sense for BA系统基本配置图。 在血浆、血清和尿样等生物样品的分析中，在前处理中去除蛋白和其它基地物质等大分子的干扰，对于目标小分子药品的分析是非常重要的。本文介绍了一种有效的在线预处理柱，实验表明效果良好。 Co-Sense fo
图1. Co-Sense for BA系统基本配置图。 在血浆、血清和尿样等生物样品的分析中，在前处理中去除蛋白和其它基地物质等大分子的干扰，对于目标小分子药品的分析是非常重要的。本文介绍了一种有效的在线预处理柱，实验表明效果良好。 Co-Sense for B
当待测组分(主要是各种多肽激素、各种酶以及各种基因工程的产物如胰岛素、生长激素等)存在于生物体细胞内及多细胞生物组织中时,需在分析测定之前将细胞和组织破碎,使这些待测组分充分释放到溶液中去,不同的生物体或同一生物体的不同组织,其细胞破碎的难易程度不一样,使用的方法也不完全相同。如动物胰脏、肝脏、脑
由于传统的样品前处理方法存在诸多问题和缺点，近年来，分析工作者改进并创新了一系列的样品前处理技术，包括各种前处理新方法与新技术的研究及这些技术与分析方法在线联用设备的研究两个方面。如：液-液微萃取、自动索式提取、吹扫捕集、微波辅助萃取、超声波萃取、超临界流体萃取、固相萃取、固相微萃取、顶空法、膜萃
如何对越来越复杂的样品基质进行痕量分析及其样品前处理已成为业界的一大挑战。为了满足全球日益增长的人口需要，食物产量需要很大的提升，这也导致了多种农药的使用。但农药的施放有时并非完全合理，有时农产品本身不需要，也会被施放，所以检测工作者必须不断改善检测技术，对越来越多的农药进行痕量检测。而此时
实验概要本实验介绍了样品总RNA的提取方法。完整RNA的提取和纯化，是进行RNA方面的研究工作，如Nothern杂交、mRNA分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点，即：样品细胞或组织的有效破碎；有效地使核蛋白复合体变性；对内源RNA酶的