wb做出来目的条带有两条
估计跟常温放置有关系，要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话，那么可能就是目的蛋白降解了，你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。而且，你也可以查查目的蛋白的相关资料，看这个蛋白是不是有不同的多聚体形式，也有可能是这种情况导致的。......阅读全文
wb压出的片子条带都是黑的是怎么回事
出现黑点和黑斑，原因：膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合，解决办法：封闭牛奶一定要纯，封闭结束之后要洗，我们常常是等到要封闭的时候发现没有牛奶，然后匆匆忙忙用PBST/TBST配置，配的匆忙的时候往往不管是否已经完全溶解。如果没有完全溶解的情况下加牛奶倒膜上，会导致很多不溶性颗粒附着在膜上，这就
wb转膜到半个小时改变电压会影响吗
转膜的时候电压40v，可以看到电流先下降后上升。我转膜的时候就这样的，转膜效果挺好的。转膜液随着使用次数增多，电阻增大，相应电流下，电压增大，建议每次转膜液使用2～3次就换新的，这个是正常的，恒压的时候，电流也是会变化的，这是关于电泳液的问题，用的时间久了就会出现这样的问题，可以经常换电泳液
Western－Blot（WB）实验最后显色过程中总是没有条带
没有条带的原因很多：可能没封闭好，一抗是不是回收次数太多了，二抗不好用，TBST长毛了，等等。这个还有做外包的呀，我们这边实验室western是最普遍的实验了。
LZB6WB玻璃转子流量计简单分类及应用
LZB-6WB玻璃转子流量计主要用于化工、石油、轻工、医药、化肥、化纤、食品、染料、环保及科学研究等各个部门中，用来测量单相非脉动(液体或气体)流体的流量。主要测量元件为一根垂直安装的下小上大锥形玻璃管和在内可上下移动的浮子。当流体自下而上经锥形玻璃管时，在浮子上下之间产生压差，浮子在此差压作用下上
Western－Blot（WB）实验最后显色过程中总是没有条带
没有条带的原因很多：可能没封闭好，一抗是不是回收次数太多了，二抗不好用，TBST长毛了，等等。这个还有做外包的呀，我们这边实验室western是最普遍的实验了。
LZB6WB玻璃转子流量计简单分类及应用
LZB-6WB玻璃转子流量计主要用于化工、石油、轻工、医药、化肥、化纤、食品、染料、环保及科学研究等各个部门中，用来测量单相非脉动(液体或气体)流体的流量。主要测量元件为一根垂直安装的下小上大锥形玻璃管和在内可上下移动的浮子。当流体自下而上经锥形玻璃管时，在浮子上下之间产生压差，浮子在此差压作用
做wb时，一抗和二抗浓度是怎么确定的
一抗的用量和样品中的目标分子含量相关，如果含量较高，就不需要用太多一抗，以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度（义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果），如果样品与厂家的不是一种细胞，可以尝试上下摸索一两个浓度梯度；二抗的用量，和你所在实验室常规的用量就可以，如果出现效果不理想的状态
Western－Blot（WB）实验最后显色过程中总是没有条带
没有条带的原因很多：可能没封闭好，一抗是不是回收次数太多了，二抗不好用，TBST长毛了，等等。这个还有做外包的呀，我们这边实验室western是最普遍的实验了。
Western－Blot（WB）实验最后显色过程中总是没有条带
没有条带的原因很多：可能没封闭好，一抗是不是回收次数太多了，二抗不好用，TBST长毛了，等等。这个还有做外包的呀，我们这边实验室western是最普遍的实验了。
WB转膜时间与分子量及胶厚度的关系
分子量越大转膜时间越长，60KD转膜可以用300毫安恒流100min，20KD的话一个小时足够了，胶越厚越不容易转完全，不建议用1.5的胶。
WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小
westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶，所以不用太担心条带在凝胶上位
无蛋白封闭液——WB实验成功的重要一步
一提到WB封闭液，人们最先想到的就是脱脂奶粉和BSA，其封闭原理就是利用封闭液中的蛋白成分以吸附的方式结合于膜表面的空白间隙，从而避免一抗的非特异性结合。事实上，除了常规蛋白质配方的封闭液之外，无蛋白-纯化学配方的封闭液（BlockPRO TM protein-free Blocking Buf
WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小
westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶，所以不用太担心条带在凝胶上位
为何实际检测到的WB条带与预期的有所区别？
WB是根据蛋白质的大小来分离蛋白的，通常小分子量蛋白在凝胶中的迁移速度要快。但是迁移率也是受到其他因素影响的，这就造成了实际检测到的条带与预期条带的不一致。主要有以下几种常见因素：翻译后修饰－比如磷酸化、糖基化等，这些修饰会增加蛋白质的分子量翻译后剪切－ 比如很多蛋白是以前体蛋白的形式合成的，在执行
WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小
westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶，所以不用太担心条带在凝胶上位
做wb时，一抗和二抗浓度是怎么确定的
一抗的用量和样品中的目标分子含量相关，如果含量较高，就不需要用太多一抗，以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度（义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果），如果样品与厂家的不是一种细胞，可以尝试上下摸索一两个浓度梯度；二抗的用量，和你所在实验室常规的用量就可以，如果出现效果不理想的状态
WB实验中9％和11.5％的分离胶凝固时间是否不同
western-blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。
大分子量蛋白200KD，在做WB要注意什么？
1）做200kd蛋白的WB时要注意，分离胶最好选择>7%的；剥胶时要小心；2）转移时间需要相应延长；要做分子量参照（否则出现杂带不知道如何分析）；3）转膜液中甲醇含量可适当降低，推荐使用湿装转膜效率更高！
WB实验中9％和11.5％的分离胶凝固时间是否不同
时间上应该会略有不同。扩展知识：WB，蛋白质印迹(Western blotting)又称免疫印迹(immunoblotting)，是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术，具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫
WB实验中9％和11.5％的分离胶凝固时间是否不同
western-blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。 而因为western blot的膜应该是完全覆盖SD
Western－Blot全自动分析仪与传统WB方法的比较
Western Blot全自动分析仪与传统WB方法的比较，传统Western blot方法是利用抗原抗体的免疫反应，先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分离开来，然后再利用电场力的作用将胶上的蛋白转移到固相载体（硝酸纤维素膜即NC膜）上，然后再加抗体形成抗原抗体复合物，利用发光或显色原理将结果显示到
为什么我的wb做出来目的条带有两条
估计跟常温放置有关系，要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话，那么可能就是目的蛋白降解了，你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。而且，你也可以查查目的蛋白的相关资料，看这个蛋白是不是有不同的多聚体形式，也有可能是这种情况导致的。
检测蛋白用WB实验还是ELISA实验好它们有什么区别
检测蛋白的实验有很多种,WB实验和ELISA实验是比较常用的两种实验方法,这两种方法哪一种的实验结果更为可靠呢?有些人说ELISA自己包被抗体的话会比较麻烦，WB相比更加科学，容易被杂志接纳。但是血清中没有内参可以选择。是不是ELISA实验操作要简单很多，那么又如何来解决这样的一个问题呢？今天上
Western－Blot全自动分析仪与传统WB方法的比较
Western Blot全自动分析仪与传统WB方法的比较，传统Western blot方法是利用抗原抗体的免疫反应，先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分离开来，然后再利用电场力的作用将胶上的蛋白转移到固相载体（硝酸纤维素膜即NC膜）上，然后再加抗体形成抗原抗体复合物，利用发光或显色原理将结果显示到膜或
为什么－WB－样本处理要超声？超声仪的替代方法？
相较于单独裂解缓冲液，超声处理破碎细胞膜和核染色质的程度更大。我们推荐在 35%-40% 功率下处理 10-15 s，重复 3 次，每次间隔时间 30 s，全程将样品试管置于冰上，可完全裂解细胞以打碎核染色质，减少样品的粘稠度，对于检测膜结合蛋白和核蛋白非常重要。但每个超声仪的最佳设置需单独确定，若
巴傲得生物，WB过程中常见的问题及可能原因分析
WB过程中常见的问题及可能原因分析问题可能原因验证或解决办法背景高膜没有完全均匀湿透使用100% 甲醇浸透膜5-10min洗膜不充分增加洗液体积和洗涤次数阻断不充分增加封闭液孵育时间，或者提高温度。选择合适的封闭试剂（脱脂奶粉，BSA，酪蛋白等）二抗浓度过高降低二抗浓度检测过程中膜干燥保证充分的反应
磷酸化蛋白－WB－做不好？文献指出了你可能忽略的原因
WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法，然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做！这是因为处于不同的细胞生长状况和 / 或特定的细胞周期时，磷酸化蛋白可能仅占细胞总蛋白中的一小部分，处理不得当时，还会快速的去磷酸化。磷酸化蛋白质 WB 做不好的原因有许多，比如封闭问题，抗体问题，或所需的磷酸化
进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体？
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子
进口内参抗体：在WB实验中为什么需要使用内参抗体？
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗
蛋白印迹(Western－Blot)常用试剂
蛋白印迹(Western Blot)常用试剂>>>蛋白抽提货号品名规格价格备注WB003组织蛋白抽提试剂100ml300全蛋白抽提WB004RIPA裂解液100ml100全蛋白抽提WB005细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂100次680WB006膜蛋白和胞质蛋白抽提试剂100次680WB007改良We