大分子量蛋白200KD，在做WB要注意什么？
1）做200kd蛋白的WB时要注意，分离胶最好选择>7%的；剥胶时要小心；2）转移时间需要相应延长；要做分子量参照（否则出现杂带不知道如何分析）；3）转膜液中甲醇含量可适当降低，推荐使用湿装转膜效率更高！......阅读全文
大分子量蛋白200KD，在做WB要注意什么？
1）做200kd蛋白的WB时要注意，分离胶最好选择>7%的；剥胶时要小心；2）转移时间需要相应延长；要做分子量参照（否则出现杂带不知道如何分析）；3）转膜液中甲醇含量可适当降低，推荐使用湿装转膜效率更高！
怎样做低分子量蛋白的wb
分子量较大的蛋白做wb实验和其他蛋白并没有什么特别的不同主要注意几个地方合适的内参印染，一般用的比较多的几种内参分子量都比较小（30~50KD）合适的凝胶，胶浓度要配制的稀一些，一般选择3%~10%的凝胶增加转膜时间，分子量较大的蛋白要完全转到膜上需要更长的时间
wb蛋白分子量60左右转膜多久
湿转的话，60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染，看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话，可以下次适当延长专膜时间。
wb蛋白分子量60左右转膜多久
湿转的话，60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染，看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话，可以下次适当延长专膜时间。
wb蛋白分子量60左右转膜多久
湿转的话，60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染，看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话，可以下次适当延长专膜时间。
分子量较大的蛋白怎么做wb实验
分子量较大的蛋白做wb实验和其他蛋白并没有什么特别的不同主要注意几个地方合适的内参印染，一般用的比较多的几种内参分子量都比较小（30~50KD）合适的凝胶，胶浓度要配制的稀一些，一般选择3%~10%的凝胶增加转膜时间，分子量较大的蛋白要完全转到膜上需要更长的时间
WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小
westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶，所以不用太担心条带在凝胶上位
WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小
westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶，所以不用太担心条带在凝胶上位
WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小
westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶，所以不用太担心条带在凝胶上位
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)2
四、主要步骤 生物秀为您搜集了现阶段几乎网上所有的Western Blot的中英文资料，仅供实验参考，可以根据自己实验的实际情况进行调整： Western Blot PROTOCOL： 点击查看所有相关文章 五、 实验常见的问题指南 根据问题的类型主要分成以下几类（以
Western－Blot详解（二）
11、NaN3 0.02% 叠氮钠(有毒，戴手套操作)，溶于磷酸缓冲盐溶液(PBS)。12、Tris缓冲盐溶液(TBS):20mmol/LTris/HCL(pH7.5)，500mmol/LnaCl。13、Tween20(15)鼠抗人-MMP-9(16)鼠抗人-TIMP-1。14、过氧化物酶标记的第二
若做的蛋白质分子量很小（10KD）应怎么做WB？
1）可选择孔径0.22um的PVDF膜或者NC膜，转膜时间缩短，另外可采用Tricine-SDS-PAGE体系；2）也可以选择PSQ 膜，同时缩短转移时间。也可以将两张膜叠在一起，再转移。其他按步骤即可。
检测蛋白用WB实验还是ELISA实验好它们有什么区别
检测蛋白的实验有很多种,WB实验和ELISA实验是比较常用的两种实验方法,这两种方法哪一种的实验结果更为可靠呢?有些人说ELISA自己包被抗体的话会比较麻烦，WB相比更加科学，容易被杂志接纳。但是血清中没有内参可以选择。是不是ELISA实验操作要简单很多，那么又如何来解决这样的一个问题呢？今天上
为什么有些目的蛋白－WB－很难检测到目标条带？
很多时候检测不到目的条带的问题竟都是出在样本制备这一步。质粒有没有转染到细胞中去，转进去后有无表达，表达量是否足以用 WB 检测，目的蛋白是否容易降解？想要得到最佳实验结果，了解清楚这些问题比一遍一遍优化和改进 WB 操作本身更为重要。相信若非首次接触 WB 实验的科研同行，每人都应有一套成熟的实验
WB目标蛋白旁又出现条带是什么原因
可能原因很多：1 同源蛋白；2 表位相似的杂带；3 自身蛋白的修饰，糖基化，磷酸化等；4 降解
WB注意这些问题，新手也能做出满意结果！
Western blot（WB）是检测蛋白质及蛋白质翻译后修饰的经典方法，可在简单或复杂的生物样品中提供有关靶蛋白的半定量或定量数据。WB 步骤复杂，通常包括：蛋白样本制备→电泳→转膜→封闭→孵育一抗→孵育二抗→显影→分析。WB 任何过程出现 Bug 均可影响结果的重复性与灵敏度，因此必须注意将 W
Western－Blot详解－常见的问题指南（一）
实验常见的问题指南根据问题的类型主要分成以下几类（以下资料权作参考，请勿盲目模仿！）：1. 参考书推荐A. 对初学者看什么资料比较好？解答：《抗体技术实验指南》和Antibodies（a laboratory manual， wrote by Ed Harlow ，david lane）两本书不错
WB转膜时间与分子量及胶厚度的关系
分子量越大转膜时间越长，60KD转膜可以用300毫安恒流100min，20KD的话一个小时足够了，胶越厚越不容易转完全，不建议用1.5的胶。
知识分享：WesternBlot实验方法及注意事项
实验原理： WesternBlot印迹方法，又称为免疫印记，是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离，并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物（NC膜或PVDF膜）上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜上的靶蛋白进行特异性结合，再与
WB－抗体能用什么稀释
wb抗体用5%的脱脂奶粉（1‰TBST溶液）或者1%的BSA（1‰TBST溶液）配置，可以先让抗体与奶粉或BSA蛋白非特异结合，就不会与PVDF膜上的蛋白结合了。
WB一抗用什么稀释
建议起始浓度1:200开始（当然你也可以1:100，如果你的背景不高的话），倍比稀释，不是再做1:100-1:1000稀释，注意了。其实没有必要分装，一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装，建议原液分装或是10稀释后分装。溶液的浓度取决于溶解在溶剂内的物质的多少。溶解度则是溶剂在特定温度下，可以溶解
WB一抗用什么稀释
建议起始浓度1:200开始（当然你也可以1:100，如果你的背景不高的话），倍比稀释，不是再做1:100-1:1000稀释，注意了。其实没有必要分装，一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装，建议原液分装或是10稀释后分装。溶液的浓度取决于溶解在溶剂内的物质的多少。溶解度则是溶剂在特定温度下，可以溶解
免疫球蛋白分子量从小到大的排列顺序
免疫球蛋白（immunoglobulin）指具有抗体活性的动物蛋白。主要存在于血浆中，也见于其他体液、组织和一些分泌液中。人血浆内的免疫球蛋白大多数存在于丙种球蛋白（γ-球蛋白）中。免疫球蛋白可以分为IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五类。IgA:分子量约为17万 IgE：分子量约19万IgM:
WB生物样本总蛋白抽提
一、贴壁细胞蛋白提取A1..将水浴锅的温度调至100℃，等水浴锅达到100℃温度后，取出需要收样的细胞的培养皿或者孔板。2.将缓冲液（1Xloading buffer）置于100℃水浴锅中预热10min。（loding buffer： 是5Xloding buffer用纯水稀释到1Xlodingbu
WB新时代开启－GE医疗发布Amersham－WB蛋白免疫印迹系统
2014年9月24日，2014慕尼黑上海分析生化展在上海新国际博览中心隆重拉开帷幕。GE医疗生命科学亮相2014慕尼黑上海分析生化展，举办新品发布会全球同步发布Western
western－blot失败经验总结1
我做了很久的WB，最大的一个难点感觉在于样品制备上！蛋白的降解有些时候是你想象不到的，可能出奇的糟糕，也可能完全没事~~如果单独做WB的话，感觉以“快速彻底裂解，先变性后保存”的原则比较有效，尽量选择足够强的裂解液，甚至直接给loading buffer裂解，然后取出部分蛋白定量，其余加入loadi
蛋白在凝胶上移动速度为什么跟分子量有关
这个和凝胶过滤的介质结构有关，凝胶填料是某些惰性的多孔网状结构物质，多是交联的聚糖如葡聚糖或琼脂糖类物质。当小分子物质能进入其内部，流下时路程较长，而大分子物质却被排除在外部，下来的路程短，所以蛋白在凝胶上移动速度跟分子量有关系。
wb电泳什么时候换电压
SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的.具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严.我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可
wb电泳什么时候换电压
SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的.具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严.我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可
wb电泳什么时候换电压
SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的.具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严.我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可