wb做出来目的条带有两条
估计跟常温放置有关系，要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话，那么可能就是目的蛋白降解了，你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。而且，你也可以查查目的蛋白的相关资料，看这个蛋白是不是有不同的多聚体形式，也有可能是这种情况导致的。......阅读全文
Western－Blot转膜技术要点
这个年过的有点崎岖，在面对社会性问题时疫情给我们带来了很多正能量，相信很多还没返校的人已经给自己立了flag。在我们回望过去的一年，这个时代已经变了。任何的进步都被透明公开的呈现在我们面前，而我们看到的好消息远比自己收获的多，所以我们总忍不住问自己，“我成长了吗？”“我的实验能顺利些吗？” “我的科
怎么选择适合的GAPDH内参抗体？
在Western Bloting实验中，在遇到总蛋白浓度测定不准确时候，或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作存在误差；这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。 GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kD
Western－Blot转膜技术要点
这个年过的有点崎岖，在面对社会性问题时疫情给我们带来了很多正能量，相信很多还没返校的人已经给自己立了flag。在我们回望过去的一年，这个时代已经变了。任何的进步都被透明公开的呈现在我们面前，而我们看到的好消息远比自己收获的多，所以我们总忍不住问自己，“我成长了吗？”“我的实验能顺利些吗？” “我
单克隆抗体制备
1. 免疫动物：三只Balb/c小鼠 2. 佐剂：首先用完全弗氏佐剂（CFA），后用不完全弗氏佐剂（IFA）。 3. 免疫原：蛋白或KLH偶联多肽。每次免疫使用50-100µg免疫原。 4. 免疫：用PBS稀释免疫原，然后与相应的佐剂1：1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂，将该乳剂在小鼠双
His抗体推荐—Abbkine全系列His标签抗体
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小，并且较容易分离和纯化，His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标
艾滋病抗体的检查方法
艾滋病病毒抗体检测 艾滋病病毒抗体检测：检测血液中的艾滋病病毒抗体是目前最常用的检测艾滋病病毒感染的实验室方法，一般要经过两个步骤：首先做初筛试验，如果为阳性，再做确认试验，确认试验阳性才可诊断为艾滋病病毒感染。 常用的方法有： 1病原检测 病原检测主要指用病毒分离培养、电镜形态观察、病
如何选择合适的MBP标签抗体？
大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（ Maltose Binding Protein，MBP）来源于大肠杆菌malE基因编码的蛋白，是细菌麦芽糖转运系统的成员之一，主要负责麦芽糖的摄取及分解代谢。malE基因产物能与多种蛋白融合，是进行表达研究的有效媒介，由于MBP融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯
【实验技巧】丽春红染色
丽春红（Ponceau S）染色是 WB 实验中的一个重要环节，今天就来给大家详解丽春红染色的作用和操作方法。丽春红染色作用可用于 PVDF 膜，硝酸纤维素膜和和醋酸纤维素膜上的蛋白的检测。丽春红染色原理丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成
western－blot实验经验总结（一）
做了很久的WB（western blot），走了很多弯路，其实发现WB想要做好并不难，总结了WB实验中可能会遇到的问题，分析了可能的原因及对应的解决方案，希望能成为你实验成功的基石。 问题1：转膜不充分(1)膜没有完全均匀湿透使用100% methanol浸透膜。(2)靶蛋白分子量小于10 000选
如何选择合适的CBP标签抗体？
CBP标记的蛋白在低浓度钙缓冲液中能够异性的被钙调蛋白树脂捕捉吸附，并且在中性环境中能够被2 mM EGTA洗脱，这与6组氨酸亲合标签纯化体系相比反应条件要温和许多。仅有4-kDa 大小的CBP tag 与26-kDa GST 标签相比对蛋白分子的影响非常小。在所表达的蛋白分子上包含一个凝血
免疫学实验比较
免疫学三大工具，免疫组化、Western、ELISA，分别用于定位，定性和定量。 IHC（免疫组化Immunohistochemistry）是融合了免疫学原理（抗原抗体特异性结合）和组织学技术（组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等），通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、
提取质粒用的5种buffer分别有什么作用
提取质粒用的5种buffer分别作用：buffer P1：除去RNA。buffer P2：裂解细胞。buffer P3：沉淀DNA。buffer WA、buffer WB：都是洗涤液。TE：溶解DNA。
western－blot转膜的原理
电场力作用条件下，带电粒子（PAGE胶中的蛋白）会发生定向迁移；蛋白大小如果超过膜孔径（0.22μm or 0.45μm），不会透过膜；WB用的膜具有蛋白吸附作用；
DAB染色的原理，方法
DAB显色中，DAB与跟过氧化物反应生成棕色不溶于水，不溶于酒精等有机溶剂的产物，易于看到的颜色，在WB和IHC中都是常用的显色方法。
在DNA质粒提取实验中各种试剂的作用
buffer P1：除去RNAbuffer P2：裂解细胞buffer P3：沉淀DNAbuffer WA、buffer WB：都是洗涤液（这两个之间有什么区别我也不清楚）TE：溶解DNA。
G蛋白偶联受体——Novus神经生物学研究
G蛋白偶联受体（G-Protein-Coupled Receptors，GPCRs）是一大类膜蛋白受体的统称。这类受体的共同点是其立体结构中都有七个跨膜α螺旋，且其肽链的C端和连接第5和第6个跨膜螺旋的胞内环上都有G蛋白的结合位点。目前为止，研究显示G蛋白偶联受体只见于真核生物之中，而且参与了许多细
死亡受体信号通路——Novus凋亡研究
死亡受体（Death Receptor）是肿瘤坏死因子受体（TNF, Tumor Necrosis Factor Receptor）基因超家族的成员，具有富含Cys的胞外结构域和胞内死亡结构域（DD, Death Domain）。死亡结构域具有诱导细胞凋亡的功能。目前已知的死亡受体有5种，其
抗rnp抗体的注意事项及检查过程
注意事项 高滴度和抗U1RNP（尤其是高滴度的抗70kD）抗体被认为是MCTD的诊断标志。 检查过程 同免疫印迹法（WB）及间接免疫荧光法（IIF）。
化学试剂定氮合金的标准规定
化学试剂定氮合金 规定了化学试剂定氮合金的要求、试验方法、检验规则、包装及标志。 1 下列标准所包含的条文，通过定氮仪在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB /T 6 02-1988
如何选择合适的VSVG标签抗体？
水泡性口炎病毒（ VSV）属于有包膜RNA病毒，以出芽的方式从宿主细胞的质膜上释放出来。来源于水泡性口炎病毒的融合性外壳G糖蛋白（ VSV-G）已被用于逆转录病毒和慢病毒载体中作为基因转移的重要手段。VSV-G标签（序列：YTDIEMNRLGK）来源于VSV-G蛋白的一部分，经常被用于融合在目的
石膏的化学成分
理论 组成(wB%)：CaO 32.5，SO3 46.6，H2O+ 20.9。[1]成分变化不大。常有 粘土 、有机质等 机械 混入物。有时含SiO2、Al2O3、Fe2O3、MgO、Na2O、CO2、Cl等 杂质 。
艾滋病补充试验的简单介绍
HIV检测的初筛结果如果为阳性，按照规范的检测流程，将进入到HIV的补充试验，做进一步的检测。下面就艾滋病的主要的补充试验，做一个浅显的介绍。 一、何谓补充试验 在《全国艾滋病检测技术规范》（2009版）中，如筛查结果为阳性
硫氰酸汞分光光度法测定有机磷杀虫剂敌百虫计算公式
计算式中:C——敌百虫浓度,mg/m3; Wa——样品溶液中氯离子总含量,μg; Wb——经水解的样品溶液中氯离子含量,μg; 2.42——从离子含量换算为敌百虫含量的系数; 1.09——修正系数; Vn——标
粉末冶金密度计对粉末冶金烧结后体密度量测
粉末冶金密度计对粉末冶金烧结后体密度量测 粉末冶金烧结后体密度量测是至关重要的。粉末冶金密度计可测粉末冶金生胚密度，粉末冶金件烧结后的密度，也有适用于现场用的快速直读型密度计。 测试技术概述： 粉末冶金中，烧结主要目的是为了使成形的粉末金属加温到再结晶温度，然后使粉末间产生再结晶的现象，如
血乳酸的注意事项
1、全血乳酸测定(分光光度法)： ①应在空腹及休息状态下抽血。不用止血带，不可用力握拳。如用止血带，应在穿刺后除去止血带2min后再抽血。最好用肝素化的注射器抽血，抽取后立即注入预先称量的含冰冷蛋白沉淀剂的试管中。如用血浆测定，每毫升血用10mg氟化钠及2mg草酸钾抗凝，立即冷却标本，并在15
可提取性核抗原(ENA)的检查过程
方法分别采用免疫印迹法（WB）法万孚试剂及纯化抗原的免疫斑点法Trinity试剂和欧蒙试剂检测患者抗ENA抗体谱中的6种抗体（抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSa抗体、抗SSb抗体、抗Scl-70抗体和抗Jo-1抗体）。
关于可提取性核抗原的检查过程介绍
方法分别采用免疫印迹法（WB）法万孚试剂及纯化抗原的免疫斑点法Trinity试剂和欧蒙试剂检测患者抗ENA抗体谱中的6种抗体（抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSa抗体、抗SSb抗体、抗Scl-70抗体和抗Jo-1抗体）。
lncRNA功能机制研究（二）
实验路线（1）LINC00346调控胃癌发展的上游机制结果：转录因子KLF5和MYC可与LINC00346启动子结合，并增强其表达a. 转录因子MYC、KLF5和 LINC00346的Oncoprint分析；b. 在含有或未含有胃癌KLF5/ MYC / LINC00346 SCNAs的转录因子
GAPDH抗体推荐—Abbkine高性价比GAPDH内参抗体的选择
在Western Bloting实验中，可能存在总蛋白浓度测定不准确，或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差；这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参，比如内参GAPDH的含量来进行校正。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组
满足这个4个条件才算成功完成Western－Blot检测
成功完成一项Western Blot检测，必须满足4个条件： 凝胶洗脱：转移期间蛋白质必须从凝胶中洗脱出来，如果蛋白质还截留在凝胶中，将无法在膜上进行分析。 吸附到膜上：在转移过程中蛋白质必须吸附到膜上，如果蛋白不吸附，将无法在膜上进行分析。 处理期间仍截留在膜上：在转移后的处