过柱子物质溶解性太差而且过柱后纯度不高怎么办

过柱子物质溶解性太差而且过柱后纯度不高怎么办常用的过柱溶剂,氯仿-甲醇、乙酸乙酯-石油醚,都不溶吗?溶解度小一点也可以过的,可以半固体上样,再慢慢洗脱。但一点都不溶的话,是不能过柱纯化的。......阅读全文

过柱子物质溶解性太差而且过柱后纯度不高怎么办

过柱子物质溶解性太差而且过柱后纯度不高怎么办常用的过柱溶剂,氯仿-甲醇、乙酸乙酯-石油醚,都不溶吗?溶解度小一点也可以过的,可以半固体上样,再慢慢洗脱。但一点都不溶的话,是不能过柱纯化的。

过柱子操作问题——装柱

柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的,可以采用四氟节门的。干法和湿法装柱觉得没什么区别,只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧密(太密了淋洗剂走的太慢),一定要均匀(不然样品就会从一侧斜着下来)。书中写的都是不能见到气泡,我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响,一加压气

过柱的柱子的尺寸

应该是粗长的最好。柱子长了,相应的塔板数就高。柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离的难度可想而知,恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。而如果样品层只有0.5厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了。当然

如何选择过柱子条件

建议用石油醚跑个板试试,如果跑不动就加点乙酸乙酯,具体比例只有自己一点一点试了,你目前这个板上的两个点离的太近了,用现在的条件肯定柱子分不开,如果样品量大建议试试重结晶,我看那个杂质的量应该不是特别大,重结晶是最好的办法,如果样品量少可以试试刮大板,或者委托一些制备的公司上柱分离一下

过柱子——溶剂的选择

当然是最便宜,最安全,最环保的了,所以,大多选用石油醚,乙酸乙酯。文献中有写用正己烷的,太贵了,除非特别需要不要用不然银子哗哗的,流的比淋洗剂还快,不过,因为极性很小,有时还是非它不可。乙醚也可以用,但是,就是容易睡觉,注意保持清醒别让溶剂流干了,那样柱子也就不爽了。二氯甲烷也有用的,但是,要知道,

过柱子操作问题——加样

用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后,再打开活塞,如此,两三次,一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗剂,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离(2~100px 就够了),再加压,这样避免了溶剂(如,二氯甲烷等)夹带样品快速下行

用甲醇过柱子会溶解硅胶?

  今天有人问我,硅胶能溶解于甲醇吗?然后我结合亲身经历斩钉截铁的告诉她,甲醇溶解硅胶是毫无疑问的,可是她追问"硅胶的成分不是SiO2吗,应该是什么都不溶才对呀。"登时语塞,SiO2能溶甲醇好像不太成立。那么甲醇究竟溶解硅胶吗?  其实,早在很多年之前这个问题就已经被人们提出,对于大部分的有机化学家

蛋白过镍柱binding有白色沉淀怎么办

蛋白结合在镍柱上后,镍柱就会由蓝色变为白色,那些白色沉淀其实就是镍柱,洗脱后就变回白色了。

过柱子操作问题——淋洗剂的选择

感觉上要使所需点在 Rf0.2~0.3 左右的比较好。不要认为在板上爬高了分的比较开,过柱子就用那种极性,如果 Rf 在 0.6,即使相差 0.2 也不容易在柱子上分开,因为柱子是一个多次爬板的状态。可以通过公式的比较:0.6/0.8一次的分离度,肯定不如(0.2/0.3)的三次方或四次方大。

色谱实验室过柱子技巧归纳

柱层析分离技巧可以说是经验成分居多,本文是小编从网络摘录的一段某热心网友的过柱心得,希望能对您有所帮助。   柱层析技术也称柱色谱技术,即常说的过柱子,应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。一根柱子里先填充不溶性基质形成固定相,将蛋白质混合样品加到柱

过柱子||你选择干法还是湿法上样

  TLC是有机化学家们的眼睛,那么与之密切相关的柱层析也就不得不提了。柱层析里面的门道还是很多的,多少克的硅胶过多少克的产品;根据TLC点板情况,是很复杂,还是很简洁,该选择多少目的硅胶;产物的酸碱性决定我们是用普通硅胶,还是氧化铝进行柱层析;有时候EA/PE体系过不开的体系,尝试用DCM/PE说

过柱的经验之谈

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。柱子可以分为:加压,常压,减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱

层析柱上柱子后压力大怎么办

19是什么单位?MPa?先试试空白运行,就是不经过柱子光走系统,看看压力是多少,检查是否系统压力过大。如果系统压力正常,则检查溶液是否澄清,有无沉淀或泛白。如果溶液没有问题,检查柱头是否堵塞,柱头前的滤膜是否需要清洗。然后检查下填料是否完整,有无被压碎的填料或者有无杂志吸附在填料上,参照说明书清洗再

层析柱上柱子后压力大怎么办

19是什么单位?MPa?先试试空白运行,就是不经过柱子光走系统,看看压力是多少,检查是否系统压力过大。如果系统压力正常,则检查溶液是否澄清,有无沉淀或泛白。如果溶液没有问题,检查柱头是否堵塞,柱头前的滤膜是否需要清洗。然后检查下填料是否完整,有无被压碎的填料或者有无杂志吸附在填料上,参照说明书清洗再

TLC柱层析过柱的技巧

过柱的技巧柱层析按过柱时的压力可以分为: 加压, 常压, 减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度, 减少产品收集的时间, 但是会减低柱子的塔板数。 所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的, 但是时间也最长, 例如一些天然化合物的分离,有时一个柱子过几个月也有可能。减压柱能够减少硅胶的使用量,但是由于

有机合成民工呕心沥血总结的过柱子经验

  由于部分新手刚接触过柱,需要系统地了解过柱的方法技巧,我把一个从事多年化学工作,有丰富实验经验的先生的过柱经验转载过来,希望对大家有用。(看了请及时回帖,谢谢~~)  常说的过柱应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过

过柱的实验方法和技巧

   常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。    一:柱子可以分为:加压,常压,减压    1.压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板

过柱的实验方法和技巧

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。 一:柱子可以分为:加压,常压,减压1.压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候

质粒纯度不高的原因

1 ) 混有蛋白: 不要使用过多菌体。溶液P1、P2、P3 处理并离心后溶液应为澄清的,如果还混有微小蛋白悬浮物,可再次离心去除后再进行下一步骤。 2 ) 混有 RNA : RNase A处理不彻底,请减少菌体用量或加入溶液P3之后室温放置一段时间。如果溶液P1已保存6 个月以上,请在溶

关于过柱的实验方法和技巧

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。 1、柱子可以分为:加压,常压,减压压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常

蛋白过镍柱纯化的原理和步骤

Ni柱中的氯化镍可以与有HIs(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择Ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太

蛋白过镍柱纯化的原理和步骤

Ni柱中的氯化镍可以与有HIs(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择Ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太

质粒纯度不高解决办法

混有蛋白:不要使用过多菌体。经溶液P1、P2、P3处理,离心后溶液应为澄清的,如果还混有微小蛋白悬浮物可再次离心去除后再进行下一步骤。2. 混有RNA:RNaseA处理不彻底,请减少菌体用量或加入溶液P3之后室温放置一段时间。如果溶液P1已保存6个月以上,请在溶液P1中添加RNaseA。3. 混有基

制备型柱子柱压上升,柱效下降怎么办?

对高价值的制备柱来讲,延长柱子寿命是很重要的。一般要注意保护柱子,一般来说,制备柱子一般需要保护柱配套。下面是可能堵塞柱子的原因:(1)如果您所分离的样品中杂质较多而您在上样前没有经过过滤(0.45微米),一些颗粒性杂质会积聚在柱头造成柱压升高。(2)也有可能是因为您所使用的流动向中含有缓冲盐的原因

过真空装置

C-VFT过真空装置是用来连接真空室内的光纤的,如等离子体的监控。过真空装置包括一个带Viton® O型密封圈的 M12螺丝和2个SMA光纤接头,可以方便地和光纤和探头连接(需要额外订购两个SMA光纤连接器ME-FI-SM-MM)。由多种型号的过真空装置与所 有芯径的光纤匹配,从50μm到1000μ

实验室空气太差怎么办?

  日常实验室的废弃物包括液体、气体、固体三大类,易挥发的液体、固体、气体本身都会散发出难闻的气味,挥散在实验室空气中,对实验室分析人员的健康产生威胁。有条件的情况下,仪器最好单独一个房间,不仅能够方便控制温湿度,又能隔离噪音和空气污染。没条件的情况下,只能够通过对仪器室进行定期的通风换气来保证空气

关于固态继电器的过流、过压保护

  在继电器使用时,因过流和负载短路会造成SSR固态继电器内部输出可控硅永久损坏,可考虑在控制回路中增加快速熔断器和空气开关予以保护型(选择继电器应选择产品输出保护,内置压敏电阻吸收回路和RC缓冲器,可吸收浪涌电压和提高dv/dt耐量);快速熔断器和空气开关,是通用的过电流保护方法。快速熔断器可按额

锂动力电池过充、过放的危害

  锂离子电池的额定电压,因为近年材料的变化,一般为3.7V,磷酸铁锂(以下称磷铁)正极的则为3.2V。充满电时的终止充电电压一般是4.2V,磷铁3.65V。锂离子电池的终止放电电压为2.75V~3.0V(电池厂给出工作电压范围或给出终止放电电压,各参数略有不同,一般为3.0V,磷铁为2.5V)。低

锂电池充电时要注意过充过放

  锂离子电池的额定电压,因为材料的变化,一般为3.7V,磷酸铁锂(以下称磷铁)正极的则为3.2V。充满电时的终止充电电压国际标准是4.2V,磷铁3.6V。锂离子电池的终止放电电压为2.75V~3.0V(国内电池厂给出工作电压范围或给出终止放电电压,各参数略有不同,一般为3.0~2.75V,磷铁为2

过真空装置参数

纤 光纤芯径为50 µm / 100 µm / 200 µm / 400 µm / 600µm / 800µm/ 1000µm  波长范围 200-800 nm (UV/VIS) 或 350-2500 nm (VIS/NIR) 或 250-2500 nm (UV/