酶联免疫吸附剂测定法定量测定结果
ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA,标准曲线的范围一般较宽,曲线最高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数值,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦,中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线注意图中横坐标为对数关系,这更有利于测定系统的表达。......阅读全文
酶联免疫吸附测定法和中和抗体试验的区别
ELISA有的用于检测中和抗体的,但大部分包被的抗原都不是用于检测中和抗体,但和机体的保护力有关;中和抗体试验主要是检中和抗体的,两者方法也不一样。
酶联免疫吸附剂测定——ELISA检测
近年来在食品检验、疾病诊断和预防的过程中ELISA检测也日益凸现其重要作用。 酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)即采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液
关于酶联免疫吸附测定法的基本原理介绍
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原
介绍一下酶联免疫吸附测定法的优缺点
酶联免疫吸附测定法(ELISA)具有以下优点:优点:高灵敏度:能够检测到非常低浓度的目标物质,通常可达 pg/mL 甚至 fg/mL 级别。特异性强:使用特异性的抗体,对目标抗原具有高度的选择性,能有效区分相似的分子。操作相对简便:不需要复杂的仪器设备,经过一定培训的人员即可操作。高通量:可以同时处
酶联免疫吸附剂测定方法的原理
方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上
酶联免疫吸附剂测定的分类方法
夹心法夹心法常用于检测大分子抗原,一般的操作步骤为:将具有专一性的抗体固著(coating)于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体;加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结;洗去多余待测检体,加入另一种对抗原专一的一次抗体,与待测抗原进行键结;洗去多余未键结一次抗体,加
含量均匀度测定法结果处理及判定
1.结果处理根据测定的响应值,分别计算出每片(个)以标示量为100的相对含量X,求其均值F、标准差S(S=)以及标示量与均值之差的绝对值A(A=2.结果判定 (1)如A+1.8S≤15.0,则供试品的含量均匀度符合规定。(2)若A+S>15.0,则不符合规定。(3)若A+18S>15.0,且A+S≤
溶出度测定法的介绍结果与判定
第一法、第二法及第三法结果判断方法一致,除另有规定外,应符合《中国药典》(2010版)二部附录X C溶出度测定法项下的规定,具体判断方法如下。1、符合规定结果判定符合下述条件之一者,可判为符合规定。①6片(粒、袋)中,每片(粒、袋)的溶出量按标示量计算,均不低于规定限度(Q)。②6片(粒、袋)中,如
猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法
猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法 前言 克伦特罗为β—肾上腺素受体激动药,是一种用于人治疗哮喘、支气管痉挛的药物。研究发现在饲料中添加克伦特罗可促进动物生长、提高瘦肉率,特别是改进脂肪型动物的肉与脂肪的比例,猪饲用后生长速度快,体型好,且瘦肉多、脂肪少,被当作“瘦肉精”而成
猪尿中克伦特罗检测方法—酶联免疫吸附测定法
前言克伦特罗为β—肾上腺素受体激动药,是一种用于人治疗哮喘、支气管痉挛的药物。研究发现在饲料中添加克伦特罗可促进动物生长、提高瘦肉率,特别是改进脂肪型动物的肉与脂肪的比例,猪饲用后生长速度快,体型好,且瘦肉多、脂肪少,被当作“瘦肉精”而成为一些饲料生产企业和养猪户的“秘密武器”。但是克伦特罗进入猪体
蛋白质定量检测方法——胶体金测定法
胶体金(colloidal gold)是氯金酸(chloroauric acid)的水溶胶,呈洋红色,具有高电子密度,并能与多种生物大分子结合。 胶体金是一种带负电荷的疏水胶体遇蛋白质转变为蓝色,颜色的改变与蛋白质有定量关系,可用于蛋白质的定量测定。
酶联免疫吸附测定法检测-ADH-和-ALDH-活性的步骤是什么?
酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)活性的大致步骤如下:包被抗体:将特异性识别 ADH 或 ALDH 的抗体包被在酶标板上,通常在 4℃ 过夜,使抗体固定在板上。封闭:用封闭液(如牛血清白蛋白溶液)封闭酶标板上未被抗体占据的位点,以减少非特异性结合,通常在
酶联免疫吸附剂测定葡萄球菌A蛋白CIC
金黄色葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)可与IC中IgG的Fc段结合。将待测血清用低浓度PEG沉淀后加至SPA包被的固相载体上,再以酶标记的SPA与之反应,即可检测样本中有无IC。1、试剂(1)5%与2.5%PEG用0.02mol/LpH7.4PBS配制;(2
喷气燃料防冰剂含量测定法--折光计法
本标准适用于测定喷气燃料防冰剂含量。包括三种方法,均可用于测定乙二醇甲醚全馏分(T1301)、乙二醇乙.醚全馏分(T1302)、乙二醇单甲醚(T1303)、乙二醇单乙.醚(T1304)四种防冰剂的含量。测定范围为0.05~0.25%(体积)。 测定时,均先用水抽提燃料中的防冰剂,然后,方法
喷气燃料防冰剂含量测定法--折光计法
GB/T 1794-1979 喷气燃料防冰剂含量测定法 本标准适用于测定喷气燃料防冰剂含量。包括三种方法,均可用于测定乙二醇甲醚全馏分(T1301)、乙二醇乙.醚全馏分(T1302)、乙二醇单甲醚(T1303)、乙二醇单乙.醚(T1304)四种防冰剂的含量。测定范围为0.05~0.25%(
试剂准备不当可能影响酶联免疫吸附测定结果
在实验室,对试剂准备一般不太注意,通常的做法是,在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。 因此,在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20mi
馏程测定法
馏程系指一种液体照下述方法蒸馏,校正到标准压力[101.3kPa(760mmHg)]下,自开始馏出第5滴算起,至供试品仅剩3~4ml或一定比例的容积馏出时的温度范围。某些液体药品具有一定的馏程,测定馏程可以区别或检查药品的纯杂程度。用国产19标准磨口蒸馏装置一套。A为蒸馏瓶;B为冷凝管,馏程在130
熔点测定法
依照待测物质的性质不同,测定法分为下列3种。各品种项下未注明时,均系指第一法。折叠第一法测定易粉碎的固体药品取供试品适量,研成细粉,除另有规定外,应按照各药品项下干燥失重的条件进行干燥。若该药品为不检查干燥失重、熔点范围低限在135℃以上、受热不分解的供试品,可采用105℃干燥;熔点在135℃以下或
余氯测定法
沉淀滴定法(氯离子的测定)1、所用试剂氯化钠标准溶液:(1毫升=1毫克Cl¯):取基准试剂或优级纯氯化3—4克至于瓷坩埚中,于高温炉升温至500℃灼烧10分钟,然后在干燥器内内冷却至室温;准确称取1.649克氯化钠,现用少量蒸馏水溶解,再用蒸馏水稀释至1000毫升。硝酸银标准溶液(1毫升=1毫克Cl
酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测抗生素残留
酶联免疫吸附剂测定(ELISA)ELISA 测定法是根据酶标记的抗体或抗抗体来进行的抗原抗体反应。由于酶的专一性催化作用,可使原来无色的底物通过水解,氧化或还原反应而显示颜色,所以该法的优点是:①可以通过颜色来快速做定性结果分析;②特异性强;③灵敏度高;④酶标板上一次可作多份样品检测。但 ELISA
酶联免疫吸附测定
1 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。2 标本的采取和保存可用作ELISA测定
熔点测定法的测定原理
熔点是指一种物质按照规定的方法测定,由固相熔化成液相(有时会伴随分解)时的温度范围,是物质的一种物理常数。依法测定熔点可以鉴别药物,也可以检查药物的纯杂程度。根据被测物质的不同性质,《中国药典》二部附录“熔点测定法”项下列有3种不同的测定方法:第一法,用于测定易粉碎的固体药物;第二法,用于测定不易粉
利福平的测定法
临用新制或存放于2~8℃条件下6小时内使用。取本品适量,精密称定,加乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液;精密量取适量,用乙腈-水(1:1)定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液,作为供试品溶液,精密量取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取利福平对照品适量,精密称定,同法测定。按
旋光测定法
动调节旋光测定仪的面市,使测定结果有一定的度和再现性,因此常被研究单位和生产厂家用作旋光性产品的含量分析,即用旋光仪测定样品的旋光度α,计算比旋光度[α]D20,再换算成样品光学纯度ee值。旋光测定法需要的样品较多,通常需0.2-2g纯样品,5-25ml待测溶液;与色谱法相比,方法的准确度﹑精密度较
酶测定法实验
试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液DEAE-纤维素(DE81) 纸片P04 清洗缓冲液乙醇反应液仪器、耗材 水浴锅实验步骤 材料与设备核心 RNA 聚合酶 (2.3 mg/ml)纯σ32 标准品 (
谷物灰分测定法
本标准适用于谷物灰分含量的测定。1 方法原理将一定重量粉碎的谷物,装入已知重量的坩埚中,经高温电炉灼烧(550±10℃)至恒重后,减去坩埚重,即为所测谷物灰分含量。2 仪器、设备2.1 分析天平:感量0.1 mg。2.2 粉碎机:实验室用。2.3 筛子:实验室用。2.4 600W电炉:具有调压变压器
酶测定法实验
在本单元中,用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液
旋光测定法
动调节旋光测定仪的面市,使测定结果有一定的精确度和再现性,因此常被研究单位和生产厂家用作旋光性产品的含量分析,即用旋光仪测定样品的旋光度α,计算比旋光度[α]D20,再换算成样品光学纯度ee值。旋光测定法需要的样品较多,通常需0.2-2g纯样品,5-25ml待测溶液;与色谱法相比,方法的准确度﹑精密
酶测定法实验
酶测定法实验 试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶 纯σ32 标准品 纯化的 σ32 样品
简述灰分测定法
灰分测定法,测定用的供试品须粉碎,使能通过二号筛,混合均匀后,取供试品2~3g(如须测定酸不溶性灰分,可取供试品3~5g),置炽灼至恒重的坩埚中,称定重量(准确至0.01g),缓缓炽热,注意避免燃烧,至完全炭化时,逐渐升高温度至500~600℃,使完全灰化并至恒重。1.总灰分测定法 测定用的供试品须