关于膜蛋白色谱的介绍
CMP+分离强蔬水性蛋白、多肽混合物的层析系统,一般有去垢剂(如SDS)溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白,并由羟基磷灰石为固定相的柱子分离纯化。羟基磷灰石柱具有阴离子磷酸基团(P-端),又具有阳离子钙(C-端),与固定相结合主要决定于膜蛋白的大小、SDS 结合量有关。利用原子散射法研究cAMP的分离机制发现,样品与SDS 结合后在离子交换柱上存在SDS 分子、带电荷氨基酸与固定相中带电离子间的交换,从而达到分级分离的目的。......阅读全文
膜蛋白提取方法
膜蛋白具有许多重要的细胞功能,对生物体存在至关重要。他们具有超过 60% 的药物靶点,占细胞总蛋白的 20%-30%。膜蛋白包括完整的膜蛋白,跨膜蛋白和外周膜蛋白。 膜蛋白或者附着在脂质双分子层上或者通过疏水,离子或其他非共价与膜周边的完整蛋白结合。 使用表面活性剂进行质膜蛋白分离
膜蛋白提取方法
膜蛋白具有许多重要的细胞功能,对生物体存在至关重要。他们具有超过 60% 的药物靶点,占细胞总蛋白的 20%-30%。膜蛋白包括完整的膜蛋白,跨膜蛋白和外周膜蛋白。膜蛋白或者附着在脂质双分子层上或者通过疏水,离子或其他非共价与膜周边的完整蛋白结合。使用表面活性剂进行质膜蛋白分离提取效率不高,还有可能
生物膜的化学成分膜蛋白的介绍
生物膜所含的蛋白叫膜蛋白,是生物膜功能的主要承担者。根据蛋白分离的难易及在膜中分布的位置,膜蛋白基本可分为两大类:外在膜蛋白和内在膜蛋白。外在膜蛋白约占膜蛋白的20%~30%,分布在膜的内外表面,主要在内表面,为水溶性蛋白,它通过离子键、;氢键与膜脂分子的极性头部相结合,或通过与内在蛋白的相互作
关于高效液相色谱仪的色谱内容介绍
(high performance liquid chromatography,HPLC)也叫高压液相色谱(high pressure liquid chromatography)、高速液相色谱(high speed liquid chromatography)、高分离度液相色谱(high re
关于高效液相色谱仪的色谱特点介绍
1、高效液相色谱仪,高压——压力可达150~300 kg/cm2。色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上。 2、高效液相色谱仪,高速——流速为0.1~10.0 mL/min。 3、高效液相色谱仪,高效——塔板数可达5000/米。在一根柱中同时分离成份可达100种。 4、高效液相色谱仪,高灵
关于高效液相色谱仪的色谱特点介绍
高压——压力可达150~300 kg/cm2。色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上。 高速——流速为0.1~10.0 mL/min。 高效——塔板数可达5000/米。在一根柱中同时分离成份可达100种。 高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。 HPLC与经典液相
膜蛋白的种类和功能
生物膜所含的蛋白叫膜蛋白,是生物膜功能的主要承担者。根据蛋白分离的难易及在膜中分布的位置,膜蛋白基本可分为三大类:外在膜蛋白或称外周膜蛋白、内在膜蛋白或称整合膜蛋白和脂锚定蛋白。膜蛋白包括糖蛋白,载体蛋白和酶等。通常在膜蛋白外会连接着一些糖类,这些糖相当于会通过糖本身分子结构变化将信号传到细胞内。
膜蛋白的简介和分类
生物膜的特定功能主要是由蛋白质完成的;膜蛋白约占膜的40%~50%,有50余种膜蛋白;在不同细胞中膜蛋白的种类及含量有很大差异。有的含量不到25%,有的达到75%;一般来说,功能越复杂的膜,其上的蛋白质含量越多。 膜蛋白是膜功能的主要体现眷。根据与膜脂的结合方式以及在膜中的位置的不同,膜蛋白分
膜蛋白质的概念
膜蛋白质(英语:membrane protein)是指能够结合或整合到细胞或细胞器的膜上的蛋白质的总称。而细胞中一半以上的蛋白质可以与膜以不同形式结合。根据与膜结合强度的不同以及位置,膜蛋白可以被分为三类:外在膜蛋白(或称外周膜蛋白)、整合膜蛋白和脂锚定蛋白。
细菌膜蛋白的分离
实验概要本实验对细菌膜蛋白进行了分离。主要试剂1. Tris-Mg 缓冲液 10mM Tris-Cl 5mM MgCl2 pH 7.3,4℃保存 2. 2%(w/v)十二烷基肌氨酸钠 (SLS)实验步骤1. 于20ml 营养肉汤中过夜培养细菌,37℃,200rpm。 2. 1000
膜蛋白的纯化实验(一)
一、膜的制备从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能高表达目的膜蛋白的组织或细胞系就很重要。最近,人们对于将细胞表面蛋白质作为鉴定不同
膜蛋白的纯化实验(二)
三、膜蛋白的纯化一 旦 使 用 了 合 适 的 去 污 剂 将 膜 蛋 白 从 细 胞 膜 中 増 溶 出 来 ,就 可 以 分 离 目 标 蛋 白 质 了 。传 统 色 谱 层 析 技 术 ,如 凝 胶 过 滤 、亲 和 、离 子 交 换 和 层 析 聚 焦 (chromatofocusi
颗粒膜蛋白140的概述
血小板在血栓形成和止血过程中起着关键作用。临床研究表明,许多疾病的发生都与血小板活化有关,血小板在活化过程中,不仅形态和生化代谢发生改变,其膜蛋白的结构和组分也发生变化。血小板α-颗粒膜蛋白(α-granule membrane protein-140,GMP-140)是血小板活化释放的特异标志
临床化学检查方法介绍颗粒膜蛋白140介绍
颗粒膜蛋白-140介绍: 许多疾病的发生都与血小板活化有关,血小板在活化过程中,不仅形态和生化代谢发生改变,其膜蛋白的结构和组分也发生变化。血小板α-颗粒膜蛋白是血小板活化释放的特异标志之一,可反映体内血小板的活化程度及血栓形成倾向,为人类血栓性疾病的早期诊断、治疗提供了一条新的途径,对其它疾
关于吸附色谱法的色谱固定相的介绍
液固色谱法采用的固体吸附剂按其性质可分为极性和非极性两种类型。极性吸附剂包括硅胶、氧化铝、氧化镁、硅酸镁、分子筛及聚酰胺等。非极性吸附剂最常见的是活性炭。 极性吸附剂可进一步分为酸性吸附剂和碱性吸附剂。酸性吸附剂包括硅胶和硅酸镁等,碱性吸附剂有氧化铝、氧化镁和聚酰胺等。酸性吸附剂适于分离碱,如
关于吸附色谱法的色谱流动相的介绍
一、流动相要求 液相色谱的流动相必须符合下列要求: (1)能溶解样品,但不能与样品发生反应。 (2)与固定相不互溶,也不发生不可逆反应。 (3)粘度要尽可能小,这样才能有较高的渗透性和柱效。 (4)应与所用检测器相匹配。例如利用紫外检测器时,溶剂要不吸收紫外光。 (5)容易精制、纯化
关于凝胶色谱仪的色谱柱的清洗介绍
为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中,在每次的样品分析工作完成之后,都应及时地清洗色谱柱。首先要用对被测样品洗脱能力强的溶剂来洗脱色谱柱,以分析工作中常用的反相色谱分析法为例,因其先流出的物质是极性大的物质,此时应用100%的甲醇或使用异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗
关于色谱法的应用介绍
色谱法的应用可以根据目的分为制备性色谱和分析性色谱两大类。 制备性色谱的目的是分离混合物,获得一定数量的纯净组分,这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。相对于色谱法出现之前的纯化分离技术如重结晶,色谱法能够在一步操作之内完成对混合物的分离,但是色谱法分离纯化的产量
关于凝胶渗透色谱的操作介绍
1、凝胶渗透色谱— 溶剂的选择:能溶解多种聚合物;不能腐蚀仪器部件;与检测器相匹配。 2、凝胶渗透色谱— 把激光光散射与凝胶色谱仪联用,在得到浓度谱图的同时,还可得到散射光强对淋出体积的谱图,从而计算出分子量分布曲线和整个试样的各种平均分子量。 3、凝胶渗透色谱— 激光光散射实验中必须对样品
关于凝胶渗透色谱的应用介绍
凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离脂溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。近年来,凝胶色谱也广泛用于小分子化合物。相对分子质量相近而化学结构不同的物质,不可能通过凝胶渗透色谱法达到完全分离纯化的目的。凝胶色
关于色谱法的分类介绍
柱色谱 为向玻璃管中填入固定相,以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液,再滴加流动相,因为待分离物质对固定相的吸附力不同,吸附力大的固着不动或移动缓慢,吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向下流动,从而实现分离。 纸色谱 以滤纸条为固定相,在纸条上点上待分离的混合溶液的样点,将纸条下端浸
关于体积排除色谱的定义介绍
体积排除色谱(size exclusion chromatography,SEC)方法,通常是一种对于分子量大于2000的物质按其分子尺寸大小进行分离的技术。作为液相色谱技术的一个重要分支,SEC方法最广泛的用途是测定合成聚合物的分子量分布;对于某些大分子样品如蛋白质、核酸等,也是一种很有效的分
关于分子排阻色谱的介绍
SEC 是利用多肽分子大小、形状差异来分离纯化多肽物质,特别对一些较大的聚集态的分子更为方便,如人重组生长激素(hgH)的分离,不同结构、构型的GH 在SEC 柱上分离行为完全不同,从而可分离不同构型或在氨基酸序列上有微小差异的变异体,利用SEC 研究修饰化的PEG 的分离方法,此PEC 具有半
关于体积排除色谱的优点介绍
1、体积排除色谱的优点: 与其他几种色谱分离模式相比,体积排阻色谱具有几个突出的优点: (1)出峰迅速,任何组分的保留体积均在K和%之间; (2)溶质与固定相(填料)和流动相无相互作用,毋需梯度淋洗; (3)分离时不会滞留杂质或残留物在柱上,故柱寿命长; (4)对于大分子,可以测定分子
关于色谱柱的组装方式介绍
1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。 2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接
关于气相色谱的分类介绍
气相色谱可分为气固色谱和气液色谱。气固色谱指流动相是气体,固定相是固体物质的色谱分离方法。例如活性炭、硅胶等作固定相。气液色谱指流动相是气体,固定相是液体的色谱分离方法。例如在惰性材料硅藻土涂上一层角鲨烷,可以分离、测定纯乙烯中的微量甲烷、乙炔、丙烯、丙烷等杂质。
关于气相色谱的组成介绍
气相色谱仪由以下五大系统组成:气路系统、进样系统、分离系统、温控系统、检测记录系统。 组分能否分开,关键在于色谱柱;分离后组分能否鉴定出来则在于检测器,所以分离系统和检测系统是仪器的核心。
关于色谱泵的柱塞杆介绍
为了使流动相输入和输出的过程完成,柱塞杆需在泵头内做往复运动。蓝宝石,不锈钢以及复合材料是柱塞杆常用的材料。一些比较特别的领域通常使用其它材质柱塞杆。柱塞杆在泵头内做往复运动,而流动相不漏出来是由于柱塞杆密封圈的作用。密封圈在泵头被紧紧地钳着。因此会有非常严重的磨损,密封圈是通过惰性材料石墨掺和
关于高速逆流色谱的基本介绍
高速逆流色谱的固定相和流动相都是液体,没有不可逆吸附,具有样品无损失、无污染、高效、快速和大制备量分离等优点。由于HSCCC与传统的分离纯化方法相比具有明显的优点,因此此项技术己被广泛应用于中药成分分离、保健食品、生物化学、生物工程、天然产物化学、有机合成、环境分析等领域。 我国是继美国、日本
关于气相色谱原理的介绍
气相色谱的流动相为惰性气体,气-固色谱法中以表面积大且具有一定活性的吸附剂作为固定相。当多组分的混合样品进入色谱柱后,由于吸附剂对每个组分的吸附力不同,经过一定时间后,各组分在色谱柱中的运行速度也就不同。吸附力弱的组分容易被解吸下来,最先离开色谱柱进入检测器,而吸附力最强的组分最不容易被解吸下来