细胞破碎方法Xpress法和超声波法简介

X-press法 一种改进的高压方法是将浓缩的菌体悬浮液冷却至-25C至-30C形成冰晶体,利用500MPa以上的高压冲击,冷冻细胞从高压阀小孔中挤出。细胞破碎是由于冰晶体的磨损,包埋在冰中的微生物的变形所引起的。该法的优点是适用的范围广,破碎率高,细胞碎片的粉碎程度低以及活性的保留率高,该法对冷冻—融解敏感的生化物质不适用。 超声波法 细胞的破碎是由于超声波的空穴作用,从而产生一个极为强烈的冲击波压力,由它引起的粘滞性旋涡在介质中的悬浮细胞上造成了剪切应力,促使细胞内液体发生流动,从而使细胞破碎。对于不同菌种的发酵液,超声波处理的效果不同,杆菌比球菌易破碎,革兰氏阴性菌细胞比革兰氏阳性菌细胞容易破碎,对酵母菌的效果级差。该法不适于大规模操作,因为放大后,要输入很高的能量来提供必要的冷却,这是困难的。......阅读全文

细胞破碎方法Xpress法和超声波法简介

  X-press法  一种改进的高压方法是将浓缩的菌体悬浮液冷却至-25C至-30C形成冰晶体,利用500MPa以上的高压冲击,冷冻细胞从高压阀小孔中挤出。细胞破碎是由于冰晶体的磨损,包埋在冰中的微生物的变形所引起的。该法的优点是适用的范围广,破碎率高,细胞碎片的粉碎程度低以及活性的保留率高,该法

[机械法]细胞破碎的方法、原理和优缺点

1、高速组织捣碎机捣碎机转速可达10,000r/min,具高速转动的锋利的刀片,宜用于动物内脏组织的破碎。操作:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。特点:由于旋转刀片的机械切力很大,制备一些较大分子如核酸则很少使用。2、组织匀浆

酵母细胞破碎实验——液氮破碎法

实验材料酵母菌试剂、试剂盒液氮仪器、耗材塑料烧杯混合器实验步骤1.  酵母在YPD(或选择性)培养基中剧烈振荡下培养至对数中期。离心,弃上清,市售酵母糕可以用来代替培养细胞。2.  在旋涡混合器上振荡细胞沉淀,使其形成粘稠的细胞糊,必要时,加入最少量的冰水使细胞糊能够倒出或舀出,如果使用酵母糕,用等

超声波细胞破碎仪简介

  超声波细胞破碎仪又叫超声波细胞粉碎仪是一种利用强超声在液体中产生空化效应,对物质进行超声处理的多功能、多用途的仪器。能用于多种动植物细胞、病毒细胞的破碎,同时超声波细胞破碎仪可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡、清洗及加速化学反应等。

超声波细胞破碎仪简介

  超声波细胞破碎仪又叫超声波细胞粉碎仪是一种利用强超声在液体中产生空化效应,对物质进行超声处理的多功能、多用途的仪器。能用于多种动植物细胞、病毒细胞的破碎,同时超声波细胞破碎仪可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡、清洗及加速化学反应等。  工作原理   超声波细胞破碎仪原理就是将电能通过换能器转换为

超声波细胞破碎仪简介

超声波细胞破碎仪简介:  超声波细胞破碎仪又叫超声波细胞破碎仪是一种利用强超声在液体中产生空化效应,对物质进行超声处理的多功能、多用途的仪器。能用于多种动植物细胞、病毒细胞的破碎,同时超声波细胞破碎仪可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡、清洗及加速化学反应等。超声波细胞破碎仪被广泛应用于生物化学、微生

样品前处理方法系列介绍——超声波破碎法

超声波是一种频率高于20000赫兹的声波,它的方向性好,穿透能力强,易于获得较集中的声能,在水中传播距离远,可用于测距、测速、清洗、焊接、碎石、杀菌消毒等。在医学、军事、工业、农业上有很多的应用。超声波效应:当超声波在介质中传播时,由于超声波与介质的相互作用,使介质发生物理的和化学的变化,从而产生一

细胞破碎和蛋白质溶解实验_​研磨法

实验方法原理研磨是破碎单一细胞的有效措施。借助研磨中磨料和细胞间的剪切及碰撞作用破碎细胞。常 用的磨料为沙子、氧化铝在研钵内样品与磨料被研磨成厚糊状。一次破碎的细胞量湿重可达 30 g。实验材料细菌或酵母或一些植物组织试剂、试剂盒石英砂或氧化铝缓冲液仪器、耗材高速珠磨匀浆器实验步骤1. 加 20 g

细胞破碎和蛋白质溶解实验_匀浆法

为了纯化细胞蛋白质,采用有效的方法进行细胞破碎和固液分离是必要的。它是全过程的第一步,通常是将处于细胞不同位置的待纯化蛋白释放出来,溶入已知成分的溶液内。该步骤是目的蛋白初级分离纯化阶段的重要环节,它直接影响产物的回收率,也可能影响产物的纯度。实验方法原理通过固体剪切力破碎组织和细胞,释放蛋白进入溶

细胞破碎和蛋白质溶解实验_​超声法

实验方法原理输入高能超声波可以破碎细胞,其机理可能与强声波作用溶液时,气泡产生、长大和破碎的空化现象有关。空化现象引起的冲击波和剪切力使细胞裂解。超声破碎的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度及细胞类型等。实验材料细胞混悬液试剂、试剂盒缓冲液仪器、耗材超声波细胞裂解仪实验步骤1. 清洗后的组织用

酵母细胞破碎实验——玻璃珠破碎法

实验材料酵母菌试剂、试剂盒玻璃珠破菌缓冲液仪器、耗材玻璃珠拍打器实验步骤1.  培养并收集酵母菌细胞,在酵母消解酶缓冲液重悬菌体沉淀之前,测定压紧细胞的体积,以下所有步骤均在4℃进行。2.  用1体积的玻璃珠破菌缓冲液重悬细胞。 3.  用2体积的玻璃珠破菌缓沖液与细胞混合,加4体积冰冷的酸洗玻璃珠

关于细胞破碎的机械法介绍

  1、高压匀浆破碎法(homogenization)  高压匀浆器是常用的设备,它由可产生高压的正向排代泵(positive displacenemt pump)和排出阀(discharge valve)组成,排出阀具有狭窄的小孔,其大小可以调节。细胞浆液通过止逆阀进入泵体内,在高压下迫使其在排出

细胞破碎和蛋白质溶解实验_​酶溶法

实验方法原理酶溶法就是用生物酶将细胞壁和细胞膜消化溶解的方法。因此利用此方法处理细胞必须根据细胞的结构和化学组成选择适当的酶。常用的有溶菌酶、β-1,3-葡聚糖酶、β-1,6-葡聚糖酶、蛋白酶、甘露糖酶、糖苷酶、肽链内切酶、壳多糖酶等、细菌主要用溶菌酶处理,酵母需要用几种酶进行复合处理。使用溶酶系统

关于细胞破碎技术机械法的介绍

  1、高压匀浆破碎法(homogenization)  高压匀浆器是常用的设备,它由可产生高压的正向排代泵(positive displacenemt pump)和排出阀(discharge valve)组成,排出阀具有狭窄的小孔,其大小可以调节。细胞浆液通过止逆阀进入泵体内,在高压下迫使其在排出

细胞破碎和蛋白质溶解实验_​(高速)珠磨法

实验方法原理该法应视为研磨法的扩展。它用玻璃珠替代磨料。小量样品(湿重不超过 3 g)可在试管内进行,大量样品需使用特制的高速珠磨机。实验材料酵母试剂、试剂盒缓冲液仪器、耗材高速珠磨机实验步骤1. 0.1~3 g 湿重细胞混悬在等体积缓冲液内。容器建议选用结实的聚乙烯试管;2. 每克湿重细胞加入 1

细胞破碎和蛋白质溶解实验_​高压匀浆法

实验方法原理细胞悬液从高压室的环状隙高速喷射到静止的撞击环上,被迫改变方向经出口管流出。此过程中细胞经历了高速造成的剪切、碰撞及高压到常压的变化,从而破碎释放内含物。增加压力或增加破碎次数都能提高破碎效率,但压力增加到一定程度零部件磨损较大。通常撞击环较易磨损应定期更换。为防止污染,使用前后高压室至

细胞破碎和蛋白质溶解实验_​化学渗透法

实验方法原理有些有机溶剂(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性剂(SDS、Triton X-100)、金属整合剂(EDTA) 、变性剂(盐酸胍、脲)等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性,使内含物有选择地渗透出来。这种处理方式就是化学渗透法。本文仅以表面活性剂 Triton X-100 为例简要介绍如下。

细胞破碎方法和原理

液体剪切压力:通过将样品从高压腔转入到低压腔时产生的快速压力落差来破碎细胞优点:破碎快速有效,适合大体积细胞破碎缺点:可导致样品温度升高(操作时需要冷却系统)超声:通过高频率的超声波破碎细胞粉碎优点:操作简单缺点:可导致样品温度升高,其很难通过冷却系统降温,剪切力有可能导致蛋白质受损,噪音较大,破碎

细胞破碎及超声波细胞破碎仪应用

  细胞破碎是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。结合重组DNA技术和组织培养技术上的重大进展,以前认为很难获得的蛋白质现在可以大规模生产。   但是由于细菌、酵母、真菌、植物细胞壁的组成成分不同,且同类细

细胞破碎及超声波细胞破碎仪应用

  细胞破碎是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。结合重组DNA技术和组织培养技术上的重大进展,以前认为很难获得的蛋白质现在可以大规模生产。   但是由于细菌、酵母、真菌、植物细胞壁的组成成分不同,且同类细

超声波细胞破碎仪使用方法

1.用专用的电源线连接发生器背面的电源输入接口(220VAC 50Hz),把换能器组件的信号输入接口与发生器的信号输出接口连接,把温度传感器连接到发生器后部温度计接口,把换能器组件插入隔音箱顶部中间的专用孔内,把被破碎的物质放置在隔音箱的升降台上,把升降台上升至变幅杆浸入溶液10mm-15mm。即完

超声波细胞破碎仪操作方法

  1、打开超声波细胞粉碎仪的电源开关,指示灯亮。  2、按“设定”键,显示窗1(工作/间歇)显示“-1”,进入间隔时间设定状态,此时显示窗3 (温度)显示的是原始数据或“--”,按置数键设定间隔时间(建议1秒)。  3、按功能键,显示窗1显示“-2”,进入超声时间设定状态,按置数键设定超声时间(好

超声波细胞破碎仪使用方法

1.用专用的电源线连接发生器背面的电源输入接口(220VAC 50Hz),把换能器组件的信号输入接口与发生器的信号输出接口连接,把温度传感器连接到发生器后部温度计接口,把换能器组件插入隔音箱顶部中间的专用孔内,把被破碎的物质放置在隔音箱的升降台上,把升降台上升至变幅杆浸入溶液10mm-15mm。即完

超声波细胞破碎仪使用方法

超声波细胞破碎仪详细操作步骤:1.按使用说明书图示连接好本仪器。用专用的电源线连接发生器背面的电源输入接口(23)(220VAC 50Hz),把换能器组件的信号输入接口(33)与发生器的信号输出接口(22)连接,把温度传感器连接到温度计接口(20),把换能器组件插入隔音箱顶部中间的专用孔内,

超声波细胞破碎仪使用方法

1.用专用的电源线连接发生器背面的电源输入接口(220VAC 50Hz),把换能器组件的信号输入接口与发生器的信号输出接口连接,把温度传感器连接到发生器后部温度计接口,把换能器组件插入隔音箱顶部中间的专用孔内,把被破碎的物质放置在隔音箱的升降台上,把升降台上升至变幅杆浸入溶液10mm-15mm。即完

蛋白质的抽提实验——超声波破碎法

蛋白质的抽提实验是进行蛋白质实验分析的基本操作,可用于(1)蛋白质的分离(2)蛋白质功能结构检测(3)蛋白质表达前的基本操作。实验方法原理蛋白质在细菌中表现后,以反复的冷冻-解冻方法打破细胞,再用硫酸铵把蛋白质沉淀下来,此步骤可以去除大部份核酸、多醣、脂质等杂物。实验材料转型菌株pQG11 M15

TRIzol法为什么在液氮下破碎细胞

TRIZOL法是最经典的提取RNA的方法,在液氮下其一可以尽量避免RNA的降解,放入液氮会使TRIZOL凝固,在研磨固体的TRIZOL,细胞会更容易破碎。

细胞破碎技术的非机械法的介绍

  1、渗透压冲击破碎法(osmotic shock)  渗透压冲击是较温和的一种破碎方法,将细胞放在高渗透压的溶液中(如一定浓度的甘油或蔗糖溶液),由于渗透压的作用,细胞内水分便向外渗出,细胞发生收缩,当达到平衡后,将介质快速稀释,或将细胞转入水或缓冲液中,由于渗透压的突然变化,胞外的水迅速渗入胞

关于细胞破碎的非机械法的介绍

  1、细胞破碎的非机械法—渗透压冲击破碎法(osmotic shock)  渗透压冲击是较温和的一种破碎方法,将细胞放在高渗透压的溶液中(如一定浓度的甘油或蔗糖溶液),由于渗透压的作用,细胞内水分便向外渗出,细胞发生收缩,当达到平衡后,将介质快速稀释,或将细胞转入水或缓冲液中,由于渗透压的突然变化

超声波衍射时差法的简介

  Time Of Flight Diffraction(TOFD)超声波衍射时差法,是一种依靠从待检试件内部结构(主要是指缺陷)的“端角”和“端点”处得到的衍射能量来检测缺陷的方法,用于缺陷的检测、定量和定位。  TOFD技术于20世纪70年代由英国哈威尔的国家无损检测中心silk博士首先提出,其