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1、DNA变性 （90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA 2、退火 （60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。 3、延伸 （70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸，合成与模板互补的DNA链。 每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍。如图所示：现在有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成，因此可以改为两步法，即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，提高了反应速度。 4、检测 PCR反应扩增出了高的拷贝数，下一步检测就成了关键。荧光素（溴化乙锭，EB）染色凝胶电泳是最常用的检测手段。电泳法检测特异性是不太高的，因此引物两聚体等非特异性的杂交体很容易引起误判。但因为其简捷易行，成为了主流检测方法。近年来......阅读全文
1、DNA变性 （90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA 2、退火 （60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。 3、延伸 （70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从
DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA 退火：（60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。 延伸：（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延
溶剂选择: 根据已有的方法或者物质的相关理化性质选择合适溶剂。不适当的溶剂可能造成无法溶解或者产品降解。 称量方法: 请根据您需要称量的重量和容许误差选择合适的天平。如使用十万分之一的天平,建议称量值不小于10mg。在购买产品时也请注意产品的重量能否满足您的需求。 一般采用增量法或减量法
What's PCR? (Michael Blaber's Lab) Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not only for those new to P
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PCR（Polymerase chain reaction）聚合酶链式反应是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内 的大量合成。是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制.目前的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。PCR的要素基本的PCR须具备１.要被复制的DNA模板 ２.界定复制范围
一、是便于实现沉淀，即操作容易 二、是不会引入杂质 三、是生成的沉淀易于过滤，即不要生成难过滤胶体状物质 四、是不会除去溶液中其他有用的离子。 满足上述条件下还有考虑沉淀剂的的价格。 除了经济因素外，还应考虑以下要求选择性: 1. 为回收金属应可得到较纯的沉淀，避免或减少杂质的污染沉淀
大致过程 实验用的标本是新鲜组织、石蜡包埋组织、脱落细胞、血细胞等。其基本方法为多聚甲醛固定组织或细胞，蛋白酶消化处理组织；在组织细胞片上滴加PCR反应液进行扩增，覆盖并加液体石蜡后，在原位PCR仪上进行PCR循环扩增，PCR扩增结束后用标记的探针进行原位杂交，最后显微镜观察结果。 实验玻片
技术原理：DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径.双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝.在 聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链.因此,通过温度变化控制D
原理就是 DNA的复制过程三步 a、DNA变性（90℃-95℃）：目的基因DNA受热变性，解链b、 复性（55℃-65℃）：引物与单链互补结合c、延伸（70℃-75℃）：合成链在DNA聚合酶作用下进行延伸