关于反相色谱技术的影响因素的介绍

(1)柱长 有机小分子和肽类的分辨率随柱长的增加而增加.但是柱长增加并不能使蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率显著增加.它们在较短的柱子上往往也有很好的分离效果。 (2)流动相的流速。 有机小分子和肽类的分辨率对流动相流速非常敏感。而蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率则不然。流速越小,柱子越长,色谱峰的宽度就越大,分辨率就越小。制备色谱上样过程中的流速对动态吸附容量影响很大。 (3)温度。 温度上升,流动相黏度下降,流动速度加快,且流动相与固定相之间的传质速度加快,使分辨率增加。同时,温度上升,分子热运动增加,疏水性作用减弱。升高温度要考虑目标物质的热稳定性。 (4)流动相组成。 流动相的极性越大,溶质的分配系数越大,洗脱时间越长。RPC多采用降低流动相极性(水含量)的线性梯度洗脱法。水是极性最强的溶剂,在反相色谱中常常和基础溶剂配合使用,向流动相中加入不同浓度的、可以与水混溶的有机溶剂,以得到不同强度的流动相,这......阅读全文

高速逆流色谱的影响因素

  1.固定相的保留值  在逆流色谱中,留在管中固定相的量是影响溶质峰分离度的一个重要因素,高保留量将会大大改进峰分离度。  仪器对保留值的影响(外因) 研究表明:螺旋管支持件的自转半径r与公转半径R之比B值是一个影响两相互不混溶溶剂在旋转螺旋管内保留的关键因素。用大直径的支持件使值进一步提高,能导

影响置换色谱分离的因素

1. 置换剂(1) 置换剂的选择 置换剂的选择是置换色谱能否成功地分离和纯化目标产物的关键因素之一。理想的置换剂必须符合以下条件:●与样品中其它组分相比, 对固定相的吸附力最强, 而且呈现L angm u ir 吸附行为;●化学稳定性好, 不与样品中任何组分发生反应;●易溶于流动相, 且能快速完成色

影响高速逆流色谱的因素

影响高速逆流色谱的因素1.固定相的保留值在逆流色谱中,留在管中固定相的量是影响溶质峰分离度的一个重要因素,高保留量将会大大改进峰分离度。仪器对保留值的影响(外因) 研究表明:螺旋管支持件的自转半径r与公转半径R之比B值是一个影响两相互不混溶溶剂在旋转螺旋管内保留的关键因素。用大直径的支持件使值进一步

反相色谱的反相介质是什么?

反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与HIC一样,RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖,表现出强烈的疏水性。因此,必须用极性有机溶剂(如

关于甘露低聚糖的影响因素介绍

  1、甘露多糖对酶  由于构成多糖的单糖类型、聚合度、糖键连接及排列方式、糖基上羟基的取代情况等各异,导致不同的多糖在溶解度、粘度等性质上存在着明显的差别,这极大影响了β一甘露聚糖酶的水解。试验表明:难溶性的甘露多糖一般较可溶性的甘露多糖难水解;糖成分复杂的一般较成分简单的难水解;糖基上羟基被取代

关于稳态血药浓度的影响因素介绍

  达到稳态血药浓度的时间仅仅决定于半衰期,与剂量、给药间隔及给药途径无关。但计量与给药间隔能影响稳态血药浓度。剂量大,稳态血药浓度高;剂量小,稳态血药浓度低。  给药次数增加能提高稳态血药浓度,并使其波动减小,但不能加快达到稳态血药浓度的时间;增加给药剂量能提高稳态血药浓度,但也不能加快达到稳态血

关于缓控释制剂的影响因素介绍

  在考核是否具有缓释特征所必需的试验时,一般规定受试者在禁食 12h 后空腹下试验的,但实际大多不是空腹,因此有时要作非空腹试验,一般有两种结果。一种是空腹与非空腹结果相似,如国外对硫酸吗啡缓解释片 所作的比较试验。另一种是饭后服的对吸收有利。如茶碱缓释片的空腹与非空腹比较试验。空腹曲线达峰时间短

关于抗原抗体反应的影响因素介绍

  (1)电解质:抗原和抗体通常为蛋白质分子,等电点分别为pH 3~5和pH 5~6,在中性或:弱碱性的环境中,表面均带负电荷,适当浓度的电解质会使他们失去一部分负电荷而相互结合,出现肉眼可见的凝集或沉淀现象:在抗原抗体反应中,常用0.85%的NaCI溶液或各种缓冲液作为抗原、抗体的稀释液,以提供适

关于上尿路结石的影响因素介绍

  许多因素影响尿道结石的形成。尿中形成结石晶体的盐类呈超饱和状态,尿中抑制晶体形成物质不足和核基质的存在,是形成结石的主要因素。包括年龄、性别、职业、饮食成份和结构、水分摄入量、气候、代谢和遗传等因素。上尿路结石好发于20~50岁。男性多于女性。男性发病年龄高峰为35岁。女性有两个高峰,30岁及5

关于碘量法的影响因素介绍

  (1)适用 pH 2 ~ 9:淀粉指示剂在弱酸介质中最灵敏,pH>9时,I2易发生歧化反应,生成IO、IO3, 而IO、IO3不与淀粉发生显色反应,当pH

关于尿液比重测定的影响因素介绍

  尿液比重测定可以估计肾脏浓缩功能。由于尿液比重还受年龄、饮水量、出汗等因素的影响,故多次测定比单次测定更能反映肾脏浓缩功能。影响因素有:  (1)尿液标本必须新鲜,不能含有强碱、强酸等物质,如奎宁、嘧啶等药物,这些物质的存在都会影响尿液比重的测定。当尿液pH值>7时,应在测定结果上加上0.005

关于脂肪酸值的影响因素介绍

  1、储藏时间  一般情况下,储存时间越长脂肪酸值越高,在储藏过程中,如保管不当,会发生结露、发热、霉变,粮食局部或全仓粮温升高,从而使粮食籽粒内部脂肪发生酸败反应,使得脂肪酸值升高。新收获的玉米脂肪酸值较低,一般在30(KOH)/(mg/100g)以下,随着储藏时间的延长而增加,在华南地区一般一

关于亲核试剂的影响因素介绍

  试剂的亲核性和碱性的强弱与亲核原子周围的空间位阻、电荷离域、反应介质等因素均有关系。  1、亲核原子周围立体位阻增加,亲核性显著降低,碱性则变化不大。  例如,EtO-是强碱(pKb=17)和强亲核试剂,而t-BuO-的亲核性则非常小,但碱性却略有增加(pKb=19)。这类强碱弱亲核试剂有时也称

反相色谱法的特点介绍

一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。

电泳技术介绍及影响电泳的因素

  一、基本知识和种类   电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动,只有蛋白质溶液pH在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极

电泳技术介绍及影响电泳的因素

  一、基本知识和种类   电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动,只有蛋白质溶液pH在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极

电泳技术介绍及影响电泳的因素

一、基本知识和种类电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动,只有蛋白质溶液pH在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极移动。电泳现

反相色谱的介质的种类相关介绍

  反相介质的商品种类繁多,其中最具代表性的是以硅胶为载体,通过表面键合非极性分子层制备。通过控制反应时间和温度,可获得性能稳定的反相介质。在硅胶基质的反相填料中,以键合有C18、C8、C2的球形多孔填料最为常见,用途最广。  RPC固定相大多是硅胶表面键合疏水基团,基于样品中的不同组分和疏水基团之

顶空气相色谱仪的影响因素介绍

使用顶空技术,可以免除冗长烦琐的样品前处理过程,避免有机溶剂带入的杂质对分析造成干扰,减少对色谱柱及进样口的污染;顶空色谱技术以其简单实用的优点在环境检测(如饮用水中挥发性卤代烃和工业污水中挥发性有机物)、药物中有机残留溶剂检测、食品、法庭科学、石油化工、包装材料、涂料及酿酒业分析等领域得到广泛的应

反相色谱的概念

反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚,是液相色谱分离模式中使用最为广泛的一种,对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析,反相液相色谱正受到越来越多的关.反相色语法是以表面非极性载体为固定相,面以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式.反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团,基于样品

电泳技术的影响因素

1.电泳介质的pH值溶液的pH值决定带电物质的解离程度,也决定物质所带净电荷的多少。对蛋白质,氨基酸等类似两性电解质,pH值离等电点越远,粒子所带电荷越多,泳动速度越快,反之越慢。因此,当分离某一种混合物时,应选择一种能扩大各种蛋白质所带电荷量差别的pH值,以利于各种蛋白质的有效分离。为了保证电泳过

反相色谱

根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。

影响液相色谱柱的因素

影响液相色谱柱的因素物理因素  1.硅胶纯度-填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度;  2.色谱柱尺寸-填料床的长度和内径;  3.颗粒形状-球型或不规则型;  4.粒径-平均颗粒直径,通常3-10µm;  5.表面积-颗粒外表面和内部孔表面的总和,以m2/gram表示;  6.孔径-颗粒的

影响液相色谱柱的因素

物理因素  1.硅胶纯度-填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度;  2.色谱柱尺寸-填料床的长度和内径;  3.颗粒形状-球型或不规则型;  4.粒径-平均颗粒直径,通常3-10µm;  5.表面积-颗粒外表面和内部孔表面的总和,以m2/gram表示;  6.孔径-颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围80-30

影响色谱柱柱效的因素

1.理论板数,板高,标注差,半峰宽,峰宽,温度,压强2.理论塔板数,理论塔板高度,有效塔板数,有效塔板高度3.分离因子,保留时间,峰底宽度4.柱温,固定相性质5.定量参数:峰高h,峰面积A定性参数:保留值,即包括死时间,死体积,保留时间,保留体积,调整保留时间,调整保留体积

影响液相色谱柱的因素

物理因素  1.硅胶纯度-填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度;  2.色谱柱尺寸-填料床的长度和内径;  3.颗粒形状-球型或不规则型;  4.粒径-平均颗粒直径,通常3-10µm;  5.表面积-颗粒外表面和内部孔表面的总和,以m2/gram表示;  6.孔径-颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围80-30

液相色谱柱的影响因素

A:物理因素1.硅胶纯度 ----· 填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度2.色谱柱尺寸---填料床的长度和内径3.颗粒形状------球型或不规则型4. 粒径------------平均颗粒直径, 通常3-10µm5.表面积---------颗粒外表面和内部孔表面的总和, 以m2/gram表示6.孔径

逆流色谱法的影响因素

  由于高速逆流色谱是无需任何固态载体支撑的液-液色谱,其中作为固定相的液体在色谱柱中的保留程度对于高速逆流色谱的分离过程是十分重要。首先,所选择的溶剂体系对固定相保留率有很大的影响,如两相密度差、粘度、界面张力等。两相的密度差对固定相保留率的影响最大,固定相保留率和密度差基本呈线性关系。其次,还存

关于冠状动脉钙化的影响因素介绍

  冠状动脉钙化(即在电脑X线断层摄影术上所见的钙化斑块的聚集)的风险因子包括:已确定的心脏病风险因子,如男性、较年长的年龄、葡萄糖耐受不良、烟草的使用、血脂异常(脂蛋白代谢性疾病,其中包括高胆固醇血症)、高血压、肥胖症、炎症标志物增加等。最近的数据提示,睡眠的量与质与数个这类风险因子有关联。

关于血清尿素氮的影响因素介绍

  尿素氮是人体蛋白质代谢的主要终末产物。氨基酸脱氨基产生NH3和CO2,两者在肝脏中合成尿素,每克蛋白质代谢产生尿素0.3g。尿素中氮含量为28/60,几乎达一半。通常肾脏为排泄尿素的主要器官,尿素从肾小球滤过后在各段小管均可重吸收,但肾小管内尿流速越快重吸收越少,也即达到了最大清除率。和血肌酐一