细胞培养过程中消化液的相关介绍
消化液:取材进行原代培养时常常需要将组织块消化解离形成细胞悬液，传代培养时也需要将贴壁细胞从瓶壁上消化下来，常用的消化液有胰酶（Trypsin）溶液和EDTA溶液，有时也用胶原酶（collagenase）溶液。 1.胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示，常见有1：125和1：250，即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。组织培养用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%浓度，配制时要用不含Ca2+、Mg2+及血清的平衡盐溶液（如前面的D-Hank's），因为这些物质会对胰酶产生抑制作用。胰酶作用及溶解的最佳pH是8-9，配制胰酶溶液应将液体调至pH8左右，充分溶解，过滤除菌。过滤后可以再调只pH7.5，也可不调。 使用细胞清洗液配制胰酶消化液：含0.5%胰酶的细胞清洗液（100ml细胞清洗液加0.5g胰酶），过滤除菌，分装于4度保存。 2.EDTA溶液：EDTA溶液也常用来解离细胞，它的作用机制是破坏细胞间......阅读全文
细胞培养过程中消化液的相关介绍
消化液:取材进行原代培养时常常需要将组织块消化解离形成细胞悬液，传代培养时也需要将贴壁细胞从瓶壁上消化下来，常用的消化液有胰酶（Trypsin）溶液和EDTA溶液，有时也用胶原酶（collagenase）溶液。 1.胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示，常见有1：125和1：250，即一
细胞培养过程中平衡盐溶液的相关介绍
平衡盐溶液（balanced salt solution,BSS）:主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。最简单的BSS是Ringer。D-Hank's与Hank's的一个主
细胞培养过程中抗生素和谷氨酰胺补充液的相关介绍
一、抗生素:常用的是青链霉素，俗称“双抗溶液”。青霉素主要是对革兰阳性菌有效，链霉素主要对革兰阴性菌有效。加入这两种抗生素可预防绝大多数细菌污染。通常使用青霉素终浓度0.007-0.008g/100ml,链霉素终浓度0.01g/100ml。一般配制成100倍浓缩液，可用PBS或培养基配制。 二
细胞培养实验中细胞培养液的相关介绍
现代生物技术均通过细胞作为载体来进行，无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境，用于维持细胞生长的营养基质称为培养基，即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质，就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境，使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细胞
天然细胞培养基的相关介绍
天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。其优点是营养成分丰富，培养效果良好，但缺点是成分复杂，来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前广泛使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。 水
关于植物细胞培养的相关技术介绍
1． 组织培养：诱发产生愈伤组织，如果条件适宜，可培养出再生植株。用于研究植物的生长发育、分化和遗传变异；进行无性繁殖；制取代谢产物。 2． 悬浮细胞培养：在愈伤组织培养技术基础上发展起来的一种培养技术。适合于进行产业化大规模细胞培养，制取植物代谢产物。 3． 原生质体培养：脱壁后的植物细胞
无血清细胞培养基的相关介绍
经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本，简化分离纯化步骤，避免病毒污染造成的危害。无血清培养基，一般是在合成培养基的基础上，加入成份完全明确的或部分明确的血清替代成份，达到既能满足动物细胞培养的要求，又能有效克服使用血
细胞培养过程中的支原体污染？
支原体污染支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2μm并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性．可为圆形、丝状或梨形。
细胞培养过程中常见的问题说明
通过多次与客户的了解和反馈，赛百慷的售后服务人员发现，客户在收到经过专业包装的细胞后，由于没有经过系统专业的检查和处理，就直接进行实验，以致于后期容易产生了一系列问题。鉴于客户对这一方面的知识有所欠缺薄弱，赛百慷的技术人员经过总结，对于在收到细胞怎样专业处理做了以下说明：一、问：细胞收到之后怎么处理
HEPES在细胞培养过程中的作用
HEPES溶液：是一种弱酸，中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸，主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下，观察细胞时培养基脱离了5%CO2的环境，CO2气体迅速逸出，pH迅速升高，若加了HEPES，此时可以维持pH7.0左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES。
细胞培养的实验仪器的清洗相关介绍
清洗、离体条件下，有害物质直接同细胞接触，细胞对任何有害物质十分敏感，极少残留物都可以对细胞产生毒副作用。因此，新的或重新使用的器皿都必须认真清洗，达到不含任何残留物的要求。 （一）玻璃器皿的清洗 一般经过浸泡、刷洗、浸酸、和清洗四个步骤。 1.浸泡:新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡，软化
细胞培养的相关概念
细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的
关于中和消化液需要的血清量
问：用胰蛋白酶消化细胞后，需要用血清中和。具体这种中和作用所要求的胰蛋白酶和血清之间的比例是多少？ 答：做了很久的试验，真的没有想过胰酶和血清的对应关系。不过细想下来，这个应该也没有固定的比值。血清的品种、产地都是不同的，成分必然有差异，如何能确定其与胰酶的比值关系？我们消化细胞的时候，如果是传代，
有关合成细胞培养基的相关介绍
合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。最早开发的基础培养基（minimal essential medium, MEM），其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上，DMEM、IMDM 、HAM F12、PRMI164
动物细胞培养中动物血清的相关介绍
1.储存 血清的保质期是5年，储存温度小于-10℃。 血清长时间储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此，长期保存血清必须在-10℃以下储存，并避免反复冻融。 2.解冻 将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱
降低上皮细胞培养过程中的污染
实验方法原理上皮细胞易存在纤维细胞污染，其污染程度能够采用特异的中等纤维蛋百亚基波形蛋内（vimentin，作为成纤维细胞的标记）和角蛋白（作为上皮细胞的标 记）抗体进行双重免疫荧光染色。关于如何降低污染的方法前面已述及；另一种用来降低贴壁上皮细胞群屮成纤维细胞数量的方法是采用不同浓度的胰蛋白酶
降低上皮细胞培养过程中的污染
实验方法原理上皮细胞易存在纤维细胞污染，其污染程度能够采用特异的中等纤维蛋百亚基波形蛋内（vimentin，作为成纤维细胞的标记）和角蛋白（作为上皮细胞的标 记）抗体进行双重免疫荧光染色。关于如何降低污染的方法前面已述及；另一种用来降低贴壁上皮细胞群屮成纤维细胞数量的方法是采用不同浓度的胰蛋白酶化。
细胞培养过程中pH调整液的简介
1.NaHCO3溶液：NaHCO3是培养基中必须添加的成分，一般情况下按说明书的要求准确添加，以保证培养基在5%CO2的环境下pH达到设计标准。如果是封闭式培养，即不与5%CO2的环境发生交换达到平衡，所使用的培养基就不能按照说明书所要求加入NaHCO3。此时常用5.6%或7.4%的NaHCO3
细胞培养基的组成维生素的相关介绍
维持细胞生长的生物活性物质，在细胞代谢中起调节及控制作用。在细胞培养中，尽管血清是维生素重要来源，但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。 脂溶性维生素如：A、D、E、K。 水溶性维生素如：B1、B2、B6、B12、泛酸、叶酸、生物素、C、烟酰胺等。 许多维生素参与构成各
细胞培养过程中添加剂起到的作用
肿瘤细胞能量来源：谷氨酰胺L－谷氨酰胺是一种氨基酸，细胞的重要能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。同时L-谷氨酰胺不稳定，在中性的水溶液中会自发降解； 降解产物对细胞有毒性 （对干细胞，原代细胞影响尤其大）。能影响细胞活性、蛋白表达水平及糖基化模式等。那如何解决呢？方案有二： 选择不含谷氨酰胺的
怎样配置胰蛋白酶消化液
1．D．Hanks液高压灭菌之后，晾至室温，4℃保存备用。2．称取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中(夏天时研磨器应放在冰浴中)，加入少量D－Hanks液研磨1 000次左右，调制成糊状。再放入4℃预冷的适量D-Hanks液中，4℃下磁力搅拌使完全溶解。3．用NaHC03干粉将胰酶溶液的pH值调至8.0左
细胞培养过程中的判断支原体污染的依据？
支原体形态多变，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构．其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞微绒毛相似，但微绒毛电子密度比支原体小，且中央无颗粒群或中央束。支原体代谢需固醇类物质、部分种类需要精氨酸、氧气、葡萄糖，每一种支
密封法测定COD中－消化液的作用
我国现行测定COD的方法(回流法)存在着回流氧化时间过长、因使用剧毒的汞盐作掩蔽剂而易引起汞污染等问题。早在1985年，美国已将标准回流法和半微量的密封法列为测定COD的标准方法，采用密封法可节省试剂、降低分析成本，但在氧化时间和使用汞盐等方面并无实质上的改进。1994年，中国环境监测总站提出了催化
细胞培养过程中污染是什么原因造成的
细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物，而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质，包括生物和化学物质。培养细胞受细菌污染后，会出现培养液变混浊，pH改变。也有的培养液肉眼观察无多少改变，只能在镜下发现菌体才知污染。所以，每天应仔细观察。污染后细胞发生病理改变，胞内颗粒增多、增粗
细胞培养过程中的病毒污染现象和处理办法？
组织细胞培养过程中，如果没有除去潜在的病毒，就会产生病毒污染。目前，从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。 尽管病毒污染的细胞不影响原代培养，但生产疫苗是不安全的。因此，潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。
细胞培养过程中污染是什么原因造成的
细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物，而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质，包括生物和化学物质。培养细胞受细菌污染后，会出现培养液变混浊，pH改变。也有的培养液肉眼观察无多少改变，只能在镜下发现菌体才知污染。所以，每天应仔细观察。污染后细胞发生病理改变，胞内颗粒增多、增粗
细胞培养过程中发生支原体污染的处理办法？
(1) 丢弃所有已经污染的细胞和培养基；(2) 使用支原体清除试剂擦拭培养箱及超净工作台；(3) 培养试剂中加入支原体清除试剂；(4) 注意戴帽子和口罩；(5) 尽可能使用一次性耗材及成品培养基；
细胞培养过程中污染是什么原因造成的
细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物，而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质，包括生物和化学物质。培养细胞受细菌污染后，会出现培养液变混浊，pH改变。也有的培养液肉眼观察无多少改变，只能在镜下发现菌体才知污染。所以，每天应仔细观察。污染后细胞发生病理改变，胞内颗粒增多、增粗
细胞培养相关——营养物质
细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。 动物细胞培养动物细胞培养（animal cell culture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）
天然细胞培养基的血清种类和成分等相关介绍
天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期，体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大，因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质