细胞培养过程中抗生素和谷氨酰胺补充液的相关介绍
一、抗生素:常用的是青链霉素,俗称“双抗溶液”。青霉素主要是对革兰阳性菌有效,链霉素主要对革兰阴性菌有效。加入这两种抗生素可预防绝大多数细菌污染。通常使用青霉素终浓度0.007-0.008g/100ml,链霉素终浓度0.01g/100ml。一般配制成100倍浓缩液,可用PBS或培养基配制。 二、谷氨酰胺补充液:谷氨酰胺在细胞代谢过程中起重要作用,合成培养基中都要添加,由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定容易降解,4℃下放置7天即可分解约50%,所以都是在使用前添加。配制好的培养液(含谷氨酰胺)在4℃放置2周以上时,要重新加入原来量的谷氨酰胺,故需单独配制谷氨酰胺,以便临时加入培养液内。谷氨酰胺使用终浓度为0.002mol/L。一般配制为100倍浓缩液,即浓度为200mmol/L(29.22g/L),配制时应加温30℃,完全溶解后过滤除菌,分装至小瓶,储存于-20℃。使用时,在每100ml培养液中加入0.5~2ml谷氨酰胺浓缩液,终......阅读全文
细胞培养过程中抗生素和谷氨酰胺补充液的相关介绍
一、抗生素:常用的是青链霉素,俗称“双抗溶液”。青霉素主要是对革兰阳性菌有效,链霉素主要对革兰阴性菌有效。加入这两种抗生素可预防绝大多数细菌污染。通常使用青霉素终浓度0.007-0.008g/100ml,链霉素终浓度0.01g/100ml。一般配制成100倍浓缩液,可用PBS或培养基配制。 二
细胞培养过程中消化液的相关介绍
消化液:取材进行原代培养时常常需要将组织块消化解离形成细胞悬液,传代培养时也需要将贴壁细胞从瓶壁上消化下来,常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和EDTA溶液,有时也用胶原酶(collagenase)溶液。 1.胰酶溶液:胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示,常见有1:125和1:250,即一
细胞培养过程中二肽谷氨酰胺的简介
在细胞培养液中L-谷氨酰胺是大部分细胞培养基的基本成分;而L-谷氨酰胺是一种并不稳定的氨基酸,在中性的水溶液中会自发降解;需要频繁地补加L-谷氨酰胺。因而在培养操作过程中经常: (1)频繁打开盖子,增加了破坏无菌状态的可能性; (2)过多的追加L-谷氨酰胺,增加了培养基中氨的毒性水平。 二
脑脊液谷氨酰胺的相关疾病和症状介绍
1、相关疾病 外伤性脑膜炎,复发性无菌性脑膜炎,病毒性脑膜炎,脑膜炎球菌血症,老年人结核性脑膜炎,老年人细菌性脑膜炎,脑膜炎奈瑟菌肺炎,利斯特菌脑膜炎,铜绿色假单胞菌脑膜炎,肠道革兰阴性杆菌脑膜炎。 2、相关症状 肝阴虚,睡觉时突然抽搐一下,肝被膜紧张,肝气不足,水肿伴呼吸困难、紫绀,
细胞培养过程中平衡盐溶液的相关介绍
平衡盐溶液(balanced salt solution,BSS):主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。最简单的BSS是Ringer。D-Hank's与Hank's的一个主
细胞培养实验中细胞培养液的相关介绍
现代生物技术均通过细胞作为载体来进行,无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境,用于维持细胞生长的营养基质称为培养基,即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质,就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境,使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细胞
细胞培养过程中pH调整液的简介
1.NaHCO3溶液:NaHCO3是培养基中必须添加的成分,一般情况下按说明书的要求准确添加,以保证培养基在5%CO2的环境下pH达到设计标准。如果是封闭式培养,即不与5%CO2的环境发生交换达到平衡,所使用的培养基就不能按照说明书所要求加入NaHCO3。此时常用5.6%或7.4%的NaHCO3
谷氨酰胺的用途和作用介绍
主要用途 用于改善智力发育不良儿童和精神障碍、酒精中毒、癫痫病人脑功能。营养增补剂。医药上,用作治疗消化器官溃疡(胃溃疡、十二指肠溃疡)、急慢性胃炎。还用作脑功能改善剂及治疗酒精中毒。 作用 从基本的说起,谷氨酰胺是二十种非基本氨基酸中的一种。说它非基本并不意味着谷氨酰胺不重要,而是因为人
细胞培养基构成、配置、灭菌和储存2
(8) 在细胞培养过程中,建议不加或加少量的抗生素,如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。(9) 建议用1N HCl或1N NaOH来调节培养基的pH,因为用碳酸氢钠调pH值对培养液的渗透压影响比较大。如下图所示:图2 MEM SLM(SLM120)在相同pH值时所加的碳酸氢钠、氢氧化钠
细胞培养过程中培养基中是否须添加抗生素?
除于特殊筛选系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。
关于抗生素相关腹泻和结肠炎的介绍
使用几乎所有抗菌药物(包括利奈唑胺)时都曾有伪膜性结肠炎报告。因此,如果在接受任何抗菌药物后患者出现腹泻,则应考虑伪膜性结肠炎诊断。如果疑诊或确诊患有抗生素相关结肠炎,可能需要停用利奈唑胺。应采取适当的处理措施。 几乎所有抗菌药物(也包括斯沃)使用中都曾有抗生素相关腹泻和结肠炎(包括伪膜性
简述谷氨酰胺注射液的用法用量介绍
本品是一种高浓度溶液,不可直接输注。在输注前,必须与可配伍的氨基酸溶液或含有氨基酸的输液相混合,然后与载体溶液一起输注。1体积的本品应与至少5体积的载体溶液混合(例如:100ml本品应加入至少500ml载体溶液),混合液中本品的最大浓度不应超过3.5%。剂量根据分解代谢的程度和氨基酸的需要量而定
关于细胞培养基的水和能源和碳源的相关介绍
细胞培养基必须含有充分的营养物质,才能满足新细胞合成、细胞代谢等生化反应所需要的物质和能量。细胞培养基的主要成份是水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助营养物质等。此外,还可能含有血清、血清替代成分、pH指示剂等。 1、水 水是细胞的主要成份,也是细胞赖以生存的主要环境。细胞培
细胞培养时各种添加物的具体作用
细胞培养的秘密法宝——添加物通常细胞体外培养时需要加入血清,以维持细胞的生长和存活。而除了血清之外,部分细胞在培养过程中需要添加胰岛素(Insulin,货号:CSP001)和β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol ,货号:CSP005)等成分来维持细胞状态。MCF-7(ZQ0071
细胞培养过程中的病毒污染现象和处理办法?
组织细胞培养过程中,如果没有除去潜在的病毒,就会产生病毒污染。目前,从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。 尽管病毒污染的细胞不影响原代培养,但生产疫苗是不安全的。因此,潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。
天然细胞培养基的血清种类和成分等相关介绍
天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质
细胞培养常见问题与解答1
1.为什么要热灭活血清?加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。2.如何用台盼兰计数活细胞?用无血清培养基把细胞悬液稀释到200-2000个/毫升,在0
锂离子生产过程中叠片和热压的相关介绍
1.叠片(Lamination) 叠片式电芯的另外一种组成方式,适用于方形及软包锂离子电池。通过控制设备将冲片后的负极极片、正极极片及隔膜堆叠成裸电芯的过程。同样还是要求隔膜包正负极,负极极片要包裹正极极片。 2.热压(HotPressing) 热压也叫整形,卷绕后的电芯处于鼓起状态,不利
天然细胞培养基的相关介绍
天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。其优点是营养成分丰富,培养效果良好,但缺点是成分复杂,来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。 水
关于植物细胞培养的相关技术介绍
1. 组织培养:诱发产生愈伤组织,如果条件适宜,可培养出再生植株。用于研究植物的生长发育、分化和遗传变异;进行无性繁殖;制取代谢产物。 2. 悬浮细胞培养:在愈伤组织培养技术基础上发展起来的一种培养技术。适合于进行产业化大规模细胞培养,制取植物代谢产物。 3. 原生质体培养:脱壁后的植物细胞
头霉素类抗生素的相关介绍
头霉素(cephamycin)自链霉菌获得的β-内酰胺抗生素,有A、B、C三型,C型最强。抗菌谱广,对革兰阴性菌作用较强,对多种β-内酰胺酶稳定。头霉素化学结构与头孢菌素相仿,但其头孢烯母核的7位碳上有甲氧基。目前广泛应用者为头孢西丁(cefoxitin),抗菌谱与抗菌活性与第二代头孢菌素相同,
细胞培养知识(二)
4. 配制培养基之生长测试 4.1. 材料: 4.1.1. MDCK cell (ATCC CCL-34 或CCRC 60004) 4.1.2. 6-well TC plate (or 35 mm TC dish) 4.1.3. methanol 4.1.4. glacial acetic acid
谷氨酰胺的性状和作用
谷氨酰胺是谷氨酸的酰胺,L-谷氨酰胺是蛋白质合成中的编码氨基酸,哺乳动物非必需氨基酸,在体内可以由葡萄糖转变而来。谷氨酰胺可用于治疗胃及十二指肠溃疡、胃炎及胃酸过多,也用于改善脑功能。密封通风处保存。白色结晶或晶性粉末,能溶于水,不溶于甲醇、乙醇、醚、苯、丙酮、氯仿和乙酸乙酯,无臭,稍有甜味。在中性
动物细胞培养基常见问题20问
培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分,但是最基础的培养基却给实验者带来了一系列的问题。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。 1.怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件?ATCC(American Type Culture Collection)收集了绝大多数细胞的详细资料。打开ATCC网页的Ce
动物细胞培养基常见问题20问
培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分,但是最基础的培养基却给实验者带来了一系列的问题。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。 1.怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件? ATCC(American Type Culture Collection)收集了绝大多数细胞的详细资料。
细胞培养中抗生素的作用
细胞培养起来感觉会很简单,但是有时候也会出现各种不顺的问题 ,例如:污染,生长缓慢,变形,死亡率过高…..,毕竟细胞是体外培养的,在培养的时候会受到各种外界因素的影响,培养基、血清、孵育温度、C02浓度等,除此之外还有抗生素……一般来说细胞培养是不需要加抗生素,因为细胞培养必须要无菌操作。如果实验室
细胞培养试剂、冷冻和复苏(二)
EDTA·4Na 溶液 — 一种化学螯合剂,对细胞有一定的离散作用,毒性小,价格低廉,使用方便 — 常用工作液浓度为0.02%。 注意:使用EDTA 处理细胞后,要用平衡盐液冲洗干净,因残留的EDTA 会影响细胞生长 —
连续液液萃取的相关介绍
如果KD值小或者需要的样品量大,多次萃取是不实际的。根据式(10-2-3)可能会需要很多的萃取次数,并且萃取的总体积也太大。在某些情况下,萃取的动力学可能是很慢的,需要很长时间才能建立平衡。在这些情况下,可以使用连续液 -液萃取技术。 在连续液 -液萃取中,新鲜的有机溶剂可以循环地连续使用
自动液液萃取的相关介绍
传统的液 -液萃取需要大量的手工操作,当样品负荷增加,并超过了合理的程度,人们就会考虑自动化。许多仪器厂家研制了全部自动或者部分自动地完成样品萃取和浓缩的装置。某些气相色谱或者高压液相色谱的自动进样器和工作站可以完成自动液! 液萃取过程。 这种自动系统大多应用于液体易于分散和混合的体系,在小
抗生素的的适用范围相关介绍
抗生素的使用,原则上应根据病原菌种类及病原菌对抗生素对敏感性的结果来选用。 1.预防用药 (1)清洁手术术前应用通常只用一次,通常在麻醉诱导时用。如果手术时间长或出血量大,可在手术中给予第二剂。 2.治疗用药 (1)通过培养、涂片、血清学检查、X线等尽可能明确病原体后开始治疗。如系病毒感