wb蛋白分子量60左右转膜多久

湿转的话,60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染,看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话,可以下次适当延长专膜时间。......阅读全文

wb蛋白分子量60左右转膜多久

湿转的话,60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染,看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话,可以下次适当延长专膜时间。

wb蛋白分子量60左右转膜多久

湿转的话,60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染,看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话,可以下次适当延长专膜时间。

wb蛋白分子量60左右转膜多久

湿转的话,60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染,看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话,可以下次适当延长专膜时间。

怎样做低分子量蛋白的wb

分子量较大的蛋白做wb实验和其他蛋白并没有什么特别的不同主要注意几个地方合适的内参印染,一般用的比较多的几种内参分子量都比较小(30~50KD)合适的凝胶,胶浓度要配制的稀一些,一般选择3%~10%的凝胶增加转膜时间,分子量较大的蛋白要完全转到膜上需要更长的时间

WB显影要多久

每个显影试剂盒都不一样,建议看说明书。实际情况视荧光强度而定,你看显出一点儿样子了,就赶紧捞出来,不然片子就太黑了。在加荧光剂后,反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里,放好后再也不要移动膜,否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜,小心,铺展。将准备好的胶片放在膜上,放上去后也不要再移动了。然后压片。可

WB显影要多久

每个显影试剂盒都不一样,建议看说明书。实际情况视荧光强度而定,你看显出一点儿样子了,就赶紧捞出来,不然片子就太黑了。在加荧光剂后,反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里,放好后再也不要移动膜,否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜,小心,铺展。将准备好的胶片放在膜上,放上去后也不要再移动了。然后压片。可

WB转膜时间与分子量及胶厚度的关系

分子量越大转膜时间越长,60KD转膜可以用300毫安恒流100min,20KD的话一个小时足够了,胶越厚越不容易转完全,不建议用1.5的胶。

分子量较大的蛋白怎么做wb实验

分子量较大的蛋白做wb实验和其他蛋白并没有什么特别的不同主要注意几个地方合适的内参印染,一般用的比较多的几种内参分子量都比较小(30~50KD)合适的凝胶,胶浓度要配制的稀一些,一般选择3%~10%的凝胶增加转膜时间,分子量较大的蛋白要完全转到膜上需要更长的时间

WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小

westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位

WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小

westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位

WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小

westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位

转膜时大分子量和小分子量蛋白,该如何选择膜孔径

对所有的蛋白,我们推荐用 Nitrocellulose Sandwiches #12369(0.2 μm)的杂交膜去转膜,尤其是分子量低于 30 KD 的蛋白,建议使用较高浓度(12-15%)的蛋白分离胶并缩短转膜的时间,建议在 1 小时以内。大分子量蛋白(> 150 kDa)推荐使用 tris-a

wb转膜条件公式

wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白

wb转膜条件公式

wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白

wb转膜条件公式

wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白

wb转膜条件公式

wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白

wb转膜条件公式

wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白

大分子量蛋白200KD,在做WB要注意什么?

1)做200kd蛋白的WB时要注意,分离胶最好选择>7%的;剥胶时要小心;2)转移时间需要相应延长;要做分子量参照(否则出现杂带不知道如何分析);3)转膜液中甲醇含量可适当降低,推荐使用湿装转膜效率更高!

目的蛋白分子量与转膜时间对应关系

转膜分干转和湿转,恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度(%) 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

目的蛋白分子量与转膜时间对应关系

转膜分干转和湿转,恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度(%) 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

目的蛋白分子量与转膜时间对应关系

转膜分干转和湿转,恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度(%) 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

目的蛋白分子量与转膜时间对应关系

转膜分干转和湿转,恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度(%) 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

目的蛋白分子量与转膜时间对应关系

转膜分干转和湿转,恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度(%) 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

目的蛋白分子量与转膜时间对应关系

转膜分干转和湿转,恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度(%) 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

目的蛋白分子量与转膜时间对应关系

转膜分干转和湿转,恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度(%) 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

目的蛋白分子量与转膜时间对应关系

转膜分干转和湿转,恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度(%) 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

wb膜甲醇活化时间

不超过15秒。根据该物质简介可知,该物质的活化时间不超过15秒。pvdf膜在使用是需预处理,用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。pvdf膜具有较高的机械强度。

wb膜甲醇活化时间

不超过15秒。根据该物质简介可知,该物质的活化时间不超过15秒。pvdf膜在使用是需预处理,用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。pvdf膜具有较高的机械强度。

若做的蛋白质分子量很小(10KD)应怎么做WB?

1)可选择孔径0.22um的PVDF膜或者NC膜,转膜时间缩短,另外可采用Tricine-SDS-PAGE体系;2)也可以选择PSQ 膜,同时缩短转移时间。也可以将两张膜叠在一起,再转移。其他按步骤即可。

WB-PVDF膜为什么要用甲醇泡

SDS-PAGE蛋白跑胶过的蛋白质带负电荷,用甲醇处理PVDF膜的目的是活化膜上的正电基团,这样其就更容易与带负电荷的蛋白质结合