Folin酚法的标准曲线测定法概述

取16支大试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升标准蛋白质溶液(浓度为250mg/ml)。用水补足到1.0毫升,然后每支试管加入5毫升试剂甲,在旋涡混合器上迅速混合,于室温(20~25℃)放置10分钟。再逐管加入0.5毫升试剂乙(Folin—酚试剂),同样立即混匀。这一步混合速度要快,否则会使显色程度减弱。然后在室温下放置30分钟,以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照,于700nm处测定各管中溶液的吸光度值。以蛋白质的量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制出标准曲线。 注意:因Lowry反应的显色随时间不断加深,因此各项操作必须精确控制时间,即第1支试管加入5毫升试剂甲后,开始计时,1分钟后,第2支试管加入5毫升试剂甲,2分钟后加第3支试管,余此类推。全部试管加完试剂甲后若已超过10分钟,则第1支试管可立即加入0.5毫升试剂乙,1分钟后第2支试管......阅读全文

气相色谱法绝对标准曲线法的介绍

  取标准被测成分 按依次增加或减少阶段法,各自调制成标准液,注入一定量后,按色谱图取标准被测成分的峰面积或峰高为纵坐标,而以标准被测成分的含量为横坐标,制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法制备试样液。取试样液按制标准曲线时相同的条件作出色谱,求出被测成分的峰面积和峰高,再按标准曲线求出被测成分的

福林酚比色法原理

原理蛋白质与福林(Folin)-酚试剂反应,产生蓝色复合物。作用机理主要是蛋白质中的肽键与碱性铜盐产生双缩脲反应,同时也由于蛋白质中存在的酪氨酸与色氨酸同磷钼酸-磷钨酸试剂反应产生颜色。呈色强度与蛋白质含量成正比,是检测可溶性蛋白质含量最灵敏的经典方法之一。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加

鸭源性核酸PCR荧光探针试剂盒Folin-酚试剂法操作分析

一、鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒Folin-酚试剂法目前实验室较多用用Folin-酚法测定蛋白质含量,此法的特点是灵敏度高,较双缩脲高两个数量级,较紫外法略高,操作稍微麻烦,反应约在15分钟有zui大显色,并zui少可稳定几个小时,其不足之处是干扰因素较多,有较多种类的物质都会影响测定结果的准确

蛋白质的定量测定——福林酚法(Folin—酚试剂法)

实验原理 Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这个方法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时较

分析化学中的标准曲线法的特点

标准曲线法的优点是:绘制好标准工作曲线后测定工作就变得相当简单,可直接从标准工作曲线上读出含量,因此特别适合于大量样品的分析。标准曲线法的缺点是:每次样品分析的色谱条件(检测器的响应性能,柱温,流动相流速及组成,进样量,柱效等)很难完全相同,因此容易出现较大误差。此外,标准工作曲线绘制时,一般使用欲

蛋白样品的定量

目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所

蛋白质测定方法

蛋白质测定方法在生化研究中经常涉及到,它是很多实验的基础。因此,了解蛋白质测定方法相当重要。目前,常用的蛋白质测定方法有 以下五种方法:凯氏定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)、紫外吸收法和考马斯亮蓝法(Bradford法)。在这 五种测定法中,考马斯亮蓝法(Br

利用标准曲线法测化合物的含量

摘要:利用紫外可见分光光度计进行定量分析时,可将待测试样的纯品配制成一系列标准溶液,事先绘制标准曲线,由待测未知样品的吸光度对照标准曲线,就可得到其含量。             利用紫外可见分光光度计进行定量分析时,可将待测试样的纯品配制成一系列标准溶液,事先绘制标准曲线,由待测未知样品的吸光

用冷原子吸收法测汞的标准曲线

这个本人比较在行,呵呵,曲线可以按照浓度要求做到1或者10ug/L,我们是2条曲线,干燥剂就是普通硅胶即可,防止水蒸气进入吸收池。接在反应器后面,进入吸收池前面。用硅胶管连接。

标准曲线法的定量分析方法介绍

  标准曲线法,也称外标法或直接比较法,是一种简便、快速的定量方法。与分光光度分析中的标准曲线法相似,首先用欲测组分的标准样品绘制标准曲线。  用标准样品配制成不同浓度的标准系列,在与待测组分相同的色谱条件下,等体积准确进样,测量各峰的峰面积或峰高,用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准曲线,此标准曲线应

怎样绘制高效液相色谱法标准曲线

标准曲线上的浓度是按法配制稀释出来的,比如你称50mg到50ml量瓶,稀释至刻度,混匀。再分别取1、2、4、6、8ml,稀释到10ml,你的标准曲线浓度分别为:0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mg/ml,再加上母液1.0mg/ml。分别进样,用浓度和峰面积回归,就得到了标准曲线。

怎样绘制高效液相色谱法标准曲线

精密取相应对照品,加适当的溶剂溶解,分别精密量取1、2、3、4、5ml(或相应成梯度的量),稀释成各个梯度的溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图,以峰面积为纵坐标,以浓度C为横坐标进行线性回归。在Excel中就直接可以绘制高效液相色谱法标准曲线。

原子荧光测汞,标准曲线法问题

原子荧光测汞,标准曲线法,可我的标准曲线测完后,荧光值标准空白最高32,其他的标准溶液都是负值,压根就没有出现标准曲线 1. 检查有没有点火成功,还原剂及样品中的酸度是否合适,元素灯是否对应,灯电流,负高压是否在规定值 2. 看看灯最亮的时候是否与信号采集同步 3. 信号出不来的原因很多,首先需要

原子吸收分光光度法的标准曲线法简介

  在仪器推荐的浓度范围内,制备含待测元素的对照品溶液至少3 份,浓度依次递增,并分别加入各品种项下制备供试品溶液的相应试剂,同时以相应试剂制备空白对照溶液。将仪器按规定启动后,依次测定空白对照溶液和各浓度对照品溶液的吸光度,记录读数。以每一浓度3 次吸光度读数的平均值为纵坐标、相应浓度为横坐标,绘

如何用标准曲线法及标准管法测定物质含量

标曲是每次都要做的。因为仪器自身的性能会影响到标曲的。看样品的稳定性之类的因素。碰上在溶液中放一年也不是不会变的。如果是碰上生物样品的话,还在是每次做含量测定前,就要老老实实的做一下标曲。标准曲线法,也称外标法或直接比较法,是一种简便、快速的定量方法。与分光光度分析中的标准曲线法相似,首先用欲测组分

定量分析方法的标准曲线法的介绍

  标准曲线法的优点是:绘制好标准工作曲线后测定工作就变得相当简单,可直接从标准工作曲线上读出含量,因此特别适合于大量样品的分析。  标准曲线法的缺点是:每次样品分析的色谱条件(检测器的响应性能,柱温,流动相流速及组成,进样量,柱效等)很难完全相同,因此容易出现较大误差。此外,标准工作曲线绘制时,一

标准曲线的作用

通过测定一系列已知组分的标准物质的某理化性质,从而得到该性质的数值所组成的曲线。标准曲线是标准物质的物理/化学属性跟仪器响应之间的函数关系。在分析化学实验中,常用标准曲线法进行定量分析,通常情况下的标准工作曲线是一条直线。与校正曲线不同,它是以标准溶液及介质组成的标准系列,标绘出来的曲线。校正曲线的

怎么用重量法做气相色谱的标准曲线

先取一定量溶剂比如7ml放入刻度为10ml试管,放在电子天平里,去皮,进样枪向试管内加标准xxg,然后定容但10ml, 读数 单位 xxg/10ml

什么是分光光度法的标准曲线

分光光度法的标准曲线定义:标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线,是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。在分光光度法分析中,被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系,水样测定的结果可以从标准曲线上查出。因此标准曲线制作的好坏,将会影响测定结果的准确度。

什么是分光光度法的标准曲线

分光光度法的标准曲线定义:标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线,是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。绘制标准曲线意义:绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其吸光度值即可在标准曲线上查出相应的浓度值。物质与光作用,具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生

蛋白质标准曲线的制作(马斯亮蓝法)

一、实验目的和内容目的: 学习考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度的原理和方法内容:制作测定蛋白质浓度的标准曲线。制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。考马斯亮蓝法测定蛋

Biuret法测定蛋白质含量逐渐隐退的原因分析

  蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。蛋白质的测定在不断的更新以及替换,但是不论时代如何的进步,蛋白质测定仪就有四种较为经典的检测 方法,凯氏定氮法(可以直接使用自动型凯氏定氮仪来进行替代),双缩尿法(Biuret法 )、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸

lowry法测蛋白浓度标准曲线是直线吗

近似于直线。如果浓度无限制的增加那肯定不是直线。我们平时测定的浓度范围是这个关系的线性范围近似于直线那一段,其实这种方法在很多方面都有应用。所以lowry法测定很高浓度的样品是不准的,你只要稀释了算倍数就行了。lowry法测蛋白原理原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产

实验室元素测定分析方法标准曲线法

标准曲线法(standard curve method),又称校正曲线法,是用标准物质配制标准系列,在标准条件下,测定各标准样品的吸光度值Ai;以吸光度值Ai,(i=1,2,3,…)对被测元素的含量Ci(i=1,2,3,…)建立校正曲线A=f(c),在同样条件下,测定样品的吸光度值Ax,根据被测元素

有哪些因素可干扰Folin酚测定蛋白质含量

酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素(0.5%),硫酸纳(1%),硝酸纳(1%),三氯乙酸(0.5%),乙醇(5%),乙醚(5%),丙酮(0.5%)等溶液对显色无影响,但这些物质浓度高时,必须作校正曲线。含硫酸铵的溶液,只须加浓碳酸钠—氢氧化钠溶液,

蛋白质测定仪在牛奶蛋白质测定中的应用

蛋白质测定仪可以对牛奶(包括纯奶、核桃、燕麦、红枣牛奶、牛初乳)、奶粉(包括牛初乳粉)、豆粉、豆奶粉和鸡蛋等样品中蛋白质含量的测定。适用于乳制品质监站、产品质 量监督检验所、农产品检测中心、畜牧水产品检测站、出入境检验检疫局、工商、卫生等部门对牛奶、奶粉、豆粉、豆奶粉及鸡蛋等样品中蛋白质的快速定量检

福林酚法定量测定蛋白质

实验概要本实验用福林酚法(Folin—酚试剂法)测定了蛋白质的含量。实验原理Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏

分光光度法中标准曲线的影响因素

  1) 分析法自身的精密度:  如显色反应灵敏度不高时,被测物质低于某一浓度就不能显色,当显色溶液中的掩蔽剂或缓冲液能够络和少量被测离子,就会使标准曲线线性关系不好。如用铬酸钡分光光度法测定水中硫酸盐、用双硫腙分光光度法测水中锌时,在标准曲线的低浓度区间就有可能有此现象。  2) 测定用仪器(包括

蛋白质含量的测定方法(一)

实验原理:蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法、双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法)。其中Bradford法

有哪些因素可以干扰folin

  1.干扰物质  此法是在Folin-酚法的基础上引入双缩脲试剂,因此凡干扰双缩脲反应的基团,如-CO-NH2,-CH2-NH2,-CS-NH2以及在性质上是氨基酸或肽的缓冲剂,如Tris缓冲剂以及蔗糖,硫酸铵,巯基化合物均可干扰Folin-酚反应。此外,所测的蛋白质样品中,若含有酚类及柠檬酸,均