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蛋白质含量的测定:Folin酚试剂法(Lowry法)和考马斯...

蛋白质含量的测定—Folin-酚试剂法(Lowry法)和考马斯亮蓝法 1.学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法。 2. 进一步掌握分光光度法——求标准曲线、准确测定未知样品、正确使用仪器。 原理 蛋白质浓度可以从它们的物理化学性质,如折射率、比重、紫外吸收等测定而得知:或用化学方法,如定氮、双缩脲反应、Folin-酚试剂反应等方法来求算。其中双缩脲法和Folin-酚法是一般实验室中经常使用的方法。它们操纵简便、迅速,不需要复杂而昂贵的设备,又能适合一般实验室的要求,若作一般的浓度测定较为适应。Folin-酚法灵敏度高,较双缩脲法灵敏100倍。本实验采用的是Folin-酚法。 Folin-酚法所用的试剂由两部分组成。试剂甲相当于双缩脲试剂,可与蛋白质中的肽键起显色反应。试剂乙(磷钨酸和磷钼酸混合液)在碱性条件下极不稳......阅读全文

知识分享:蛋白质含量的测定方法

  实验原理:   蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法、双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法)。其中Bra

蛋白质测定方法

蛋白质测定方法在生化研究中经常涉及到,它是很多实验的基础。因此,了解蛋白质测定方法相当重要。目前,常用的蛋白质测定方法有 以下五种方法:凯氏定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)、紫外吸收法和考马斯亮蓝法(Bradford法)。在这 五种测定法中,考马斯亮蓝法(Br

植物体内可溶性蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法和LOWRY法

实验 植物体内可溶性蛋白质含量的测定植物体内的可溶性蛋白质大多数是参与各种代谢的酶类,测其含量是了解植物体总代谢的一个重要指标。在研究每一种酶的作用时,常以比活(酶活力单位/mg蛋白)表示酶活力大小及酶制剂纯度。因此,测定植物体内可溶性蛋白质是研究酶活的一个重要项目。常用测定方法有Lowry法和考马

浅谈食品中蛋白质测定方法的研究进展

蛋白质是构成生物体细胞组织的重要成分。食物中的蛋白质是人体中氮的惟一来源, 具有糖类和脂肪不可替代的作用。蛋白质与营养代谢、细胞结构、酶、激素、病毒、免疫、物质运转和遗传等密切相关, 其分离与定性、定量分析是生物化学和其他生物学科、食品检验、临床检验、诊断疾病、生物药物分离提纯和质量检验中最重要的工

蛋白质含量的测定方法(一)

实验原理:蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法、双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法)。其中Bradford法

蛋白定量--Lowry法[wkh]

蛋白定量--Lowry法[wkh]   2008-07-28 20:15:35   Folin—酚试剂法(Lowry法)(一)实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。二、 实验原理在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。二、 实验原理在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。二、 实验原理在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测

4种常用蛋白浓度测定方法的比较

蛋白浓度测定方法有很多种,各种蛋白质含量测定的研究也屡见报道。每种方法都有其优点和局限性,在蛋白质样品中往往会含有一些化学试剂,有些化学试剂会干 扰蛋白浓度测定。因此,寻找合适的实验方法以避免干扰对蛋白浓度测定的准确性至关重要。基于Lowry法在测定PEG_IL_6样品时出现大量黄绿色沉 淀,尿素对

蛋白质含量测定实验——folin—酚试剂法

蛋白质含量测定实验可以用于:(1)测定蛋白质浓度;(2)检测所提取的蛋白质含量。实验方法原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即f

蛋白质测定仪在牛奶蛋白质测定中的应用

蛋白质测定仪可以对牛奶(包括纯奶、核桃、燕麦、红枣牛奶、牛初乳)、奶粉(包括牛初乳粉)、豆粉、豆奶粉和鸡蛋等样品中蛋白质含量的测定。适用于乳制品质监站、产品质 量监督检验所、农产品检测中心、畜牧水产品检测站、出入境检验检疫局、工商、卫生等部门对牛奶、奶粉、豆粉、豆奶粉及鸡蛋等样品中蛋白质的快速定量检

蛋白质定量/蛋白质含量的测定(LOWRY法)

实验概要运用LOWRY法测定蛋白质的含量。实验原理Lowry法是双缩脲法和福林酚法的结合与发展,其原理是:蛋白质溶液用碱性铜溶液处理,形成铜-蛋白质的络合盐,再加入酚试剂后,除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外,还使双缩脲法中肽键、碱性铜的显色效果更强烈。因此,Lowry法的显色效果比单独使用

常用蛋白质浓度测定方法汇总

蛋白质是细胞中最重要的含氮生物大分子之一,承担着各种生物功能。蛋白质的定量分析是蛋白质构造分析的基础。目前常用的蛋白测量的方法主要有BCA法、考马斯亮蓝法(Bradford)和Lowry法等。BCA法  原理在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+(biuret

考马斯亮兰法(Bradford法)测定蛋白浓度

(一)实验原理双缩脲法(Biuret法)和Folin―酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点

蛋白质测定方法

蛋白质测定方法一般来说,有以下五种:凯氏定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)、紫外吸收法和考马斯亮蓝法(Bradford法)。表 五种蛋白质测定方法的比较 从以上表格中可以得出,不同的方法有不同的特点和优势,如紫外吸收法测定时间快。但是综合起来,最后一种考马斯亮蓝

Western Blot 相关技术操作与原理-1

【实验原理】: Western Blot 印迹方法,又称为免疫印记,是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对不同分子量的蛋白质进行分离,并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物(NC膜或PVDF膜)上,用抗靶蛋白的非标记抗体(一抗)与转印后膜上的靶蛋白进

蛋白质测定方法的比较

蛋白质的定量,是生物化学中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有以下几种方法:定氮法、紫外吸收法、Lowry法(Folin-酚试剂法)、Bradford法(考马斯亮蓝法)、BCA法等:定氮法比较繁复,但较准确,往往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白。 紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗样

双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)-2

2.[操作步骤]   1. 将研磨管离心一分钟(不低于12000×g)弃上清。 2. 加入裂解液(200-300ul)充分vortex. 3. 再加入样品鼠脑组织(低于100mg)充分研磨。然后可以再加入裂解液至1ml.. 4. 将组织悬液离心5-10min(高于

酚试剂(Lowry)法测血清蛋白质含量

一、 相关理论1、 血清(浆)蛋白质是血清(浆)固体成分中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化和物。2、 血清(浆)蛋白质的分类:目前已研究的有300 余种,已分离提纯的有100 余种,大部分在肝脏合成。1) 盐析法可将血浆蛋白分为白蛋白(Albumin, Alb 或A)和球蛋白(Globulin,

考马斯亮兰法(Bradford法)测定蛋白浓度

实验概要双缩脲法(Biuret法)和Folin―酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而

核酸蛋白检测仪与紫外分析仪的定义和联系

核酸蛋白检测仪核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于

核酸蛋白检测仪与紫外分析仪

 核酸蛋白检测仪核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析

核酸蛋白检测仪与紫外分析仪

核酸蛋白检测仪核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于

蛋白质测定方法及其比较

目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍 使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法); 还有近来广为应用的蛋白定量方法——BCA法。其中Bradford法和Lowry法灵敏度较高,

解析核酸蛋白检测仪与紫外分析仪的定义联系

 核酸蛋白检测仪核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析

解析核酸蛋白检测仪与紫外分析仪的定义联系

核酸蛋白检测仪核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于

解析核酸蛋白检测仪与紫外分析仪的定义联系

核酸蛋白检测仪核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于

蛋白样品的定量

目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓

几种蛋白质浓度测定方法

一、Bradford法蛋白质与考马斯亮兰染料结合生成蓝色物质,蓝色物质的量与蛋白质浓度的高低成正比。生成的蓝色物质在595nm处有最大光吸收,通过测定595nm的光吸收,来测定蛋白质浓度。实验中一般利用牛血清白蛋白(BSA)来作标准曲线,此法的灵敏度为25~200ug/ml。甘油、吐温(tween)