寡核苷酸的应用介绍
寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 。寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。调控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防止其翻译成蛋白,在制止癌细胞活动方面能起一定的作用。......阅读全文
关于寡核苷酸的简介
寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段,但在使用这一术语时,对核苷酸残基的数目并无严格规定,在不少文献中,把含有30甚至更多核苷酸残基的多核苷酸分子也称作寡核苷酸。寡核苷酸可由仪器自动合成,它可作为DNA合成的引物(Prime
寡核苷酸微阵列
中文名称寡核苷酸微阵列英文名称oligonucleotide array定 义将一定长度、序列不同的寡核苷酸有序地排列固定在支持物(如玻璃片、尼龙膜等)上,供分子杂交分析的系统。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
反义寡核苷酸简介
反义寡核苷酸(AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达,在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,简称PS2ODNs),是用硫原子将磷酸骨架上的非成键氧原子取代后形成的一类新的寡核苷酸类似物
寡核苷酸微阵列的定义
中文名称寡核苷酸微阵列英文名称oligonucleotide array定 义将一定长度、序列不同的寡核苷酸有序地排列固定在支持物(如玻璃片、尼龙膜等)上,供分子杂交分析的系统。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
寡核苷酸微阵列的定义
中文名称寡核苷酸微阵列英文名称oligonucleotide array定 义将一定长度、序列不同的寡核苷酸有序地排列固定在支持物(如玻璃片、尼龙膜等)上,供分子杂交分析的系统。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
寡核苷酸介导的诱变实验
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 PEGTEATP寡核苷酸诱变引物T4多核苷酸激酶EDTASSC仪器、耗材 水浴锅电泳仪培养箱实验步骤 1. 将一个单链噬菌体产生的噬斑转移至含有1 ml 灭菌TY培养基的1.5 ml 微量离心管中,60℃温育5 min,以杀灭细菌细胞,剧烈振荡以释放琼脂中的噬菌体,
筛选寡核苷酸针的原则
筛选寡核苷酸针的原则下面是筛选寡核苷酸针的一些原则。一.长18~50nt,较长探针杂交时间较长,合成量低;较短探针特异性会差些。二.碱基成分:G+C含量为40%~60%,超出此范围则会增加非特异杂交。三.探针分子内不应存在互补区,否则会出现抑制探针杂交的“发夹”状结构。四.避免单一碱基的重复出现(不
寡核苷酸介导的诱变实验
基本方案 实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒
筛选寡核苷酸针的原则
一.长18~50nt,较长探针杂交时间较长,合成量低;较短探针特异性会差些。二.碱基成分:G+C含量为40%~60%,超出此范围则会增加非特异杂交。三.探针分子内不应存在互补区,否则会出现抑制探针杂交的“发夹”状结构。四.避免单一碱基的重复出现(不能多于4个),如-CCCCC-。五.一旦选定某一序更
寡核苷酸探针的制备方法
寡核苷酸探针是人工合成的,与已知基因DNA互补的,长度可从十几到几十个核苷酸的片段。如仅知蛋白质的氨基酸顺序量,也可以按氨基酸的密码推导出核苷酸序列,并用化学方法合成。
筛选寡核苷酸针的原则
一.长18~50nt,较长探针杂交时间较长,合成量低;较短探针特异性会差些。二.碱基成分:G+C含量为40%~60%,超出此范围则会增加非特异杂交。三.探针分子内不应存在互补区,否则会出现抑制探针杂交的“发夹”状结构。四.避免单一碱基的重复出现(不能多于4个),如-CCCCC-。五.一旦选定某一序更
寡核苷酸介导的诱变实验
用突变的寡核苷酸引导模板的合成,从而改变DNA序列,突变效率可达50~80%。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒PEGTEATP寡核苷酸诱变引物T4多核苷酸激酶EDTASSC仪器、耗材水浴锅电泳仪培养箱实验步骤1. 将一个单链噬菌体产生的噬斑转移至含有1 ml 灭菌TY培养基的1.5 ml 微量离心管中
随机寡核苷酸诱变的概念
中文名称随机寡核苷酸诱变英文名称random oligonucleotide mutagenesis定 义通过合成一系列突变寡核苷酸引物对基因组某个区域进行聚合酶链反应扩增,获得大量突变的DNA,以研究突变对功能的影响。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
等位基因特异性寡核苷酸印迹的方法介绍
中文名称等位基因特异性寡核苷酸印迹英文名称allele specific oligonucleotide blot定 义一种测定基因突变的方法。即应用等位基因特异性寡核苷酸(ASO)仅与完全互补的序列结合,故1个碱基错配即足以阻止ASO探针与目的基因片段杂交;将ASO探针连接dT多聚尾巴,结合于固
合成的寡核苷酸探针的优点
合成的寡核苷酸探针具有一些独特的优点:一.由于链短,其序列复杂度低,分子量小,所以和等量靶位点完全杂交的时间比克隆探针短,如20nt的寡核苷酸探针在浓度为100ng/ml,靶序列为1~100pg、1kb片段或3×10-18~3×10-16mol/L时,达到最大程度的杂交只需10min,而用2kb的克
合成的寡核苷酸探针的优点
合成的寡核苷酸探针具有一些独特的优点:一.由于链短,其序列复杂度低,分子量小,所以和等量靶位点完全杂交的时间比克隆探针短,如20nt的寡核苷酸探针在浓度为100ng/ml,靶序列为1~100pg、1kb片段或3×10-18~3×10-16mol/L时,达到最大程度的杂交只需10min,而用2kb的克
合成的寡核苷酸探针的优点
合成的寡核苷酸探针具有一些独特的优点:一.由于链短,其序列复杂度低,分子量小,所以和等量靶位点完全杂交的时间比克隆探针短,如20nt的寡核苷酸探针在浓度为100ng/ml,靶序列为1~100pg、1kb片段或3×10-18~3×10-16mol/L时,达到最大程度的杂交只需10min,而用2kb的克
简并寡核苷酸诱变实验
本方法的一个重要特点就是将单链的简并寡核苷酸转变成同源双链分子后直接克隆进常规载体。由于不同的寡核苷酸可通过其3’末端的回文结构杂交,因此,寡核苷酸实际上起互为引物的作用,在大肠杆菌DNA聚合酶I klenow片段作用下延伸。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒DNA聚合酶dNTP甘油NaClEDTASDS
简并寡核苷酸诱变实验
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 DNA聚合酶dNTP甘油NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材 水浴锅离心机分光光度计实验步骤 1. 设计寡核苷酸,其3‘端含有由8个核苷酸组成的回文结构,且包含某一限制性内切酶的识别位点;如果可能的话,5’端也应有一含某个限制性内切酶位点的序列。中间区段则应含目
简并寡核苷酸诱变实验
小段DNA序列中产生大量突变 实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒
细胞化学词汇寡核苷酸
寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段,但在使用这一术语时,对核苷酸残基的数目并无严格规定,在不少文献中,把含有30甚至更多核苷酸残基的多核苷酸分子也称作寡核苷酸。寡核苷酸可由仪器自动合成,它可作为DNA合成的引物(Primer)
荧光共振能量转移FRET肽和寡核苷酸荧光标记的应用1
荧光染料标记的肽和寡核苷酸是生化和细胞研究中的重要工具,目前荧光肽和寡核苷酸已广泛用于所有主要类型的荧光成像中,包括荧光共振能量转移(FRET),这些标记的生物分子被广泛用于基于分子信标和其他技术的传染病诊断。FRET肽和寡核苷酸也已通过荧光相关细胞分选(FACS)用于细胞分析,用于体内或
荧光共振能量转移FRET肽和寡核苷酸荧光标记的应用2
FRET原理 荧光共振能量转移(FRET)是一种物理现象,在生物医学研究和药物发现中已经越来越流行。FRET是能量从供体分子(donor)到受体分子(acceptor)的无热量传输。供体分子是最初吸收能量的荧光基团,而受体是随后转移能量的荧光基团,这种共振相互作用发生
寡核苷酸定点诱变的概念
中文名称寡核苷酸定点诱变英文名称oligonucleotidedirected mutagenesis定 义人工获得特定核酸定点突变的一种方案。将需要改变的核苷酸置于一段合成的寡核苷酸中部,在单链噬菌体(如M13)模板上用克列诺酶合成有指定变化的负链,再通过噬菌体复制得到含突变的双链。应用学科生物
寡核苷酸的功能特点和用途
寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段,但在使用这一术语时,对核苷酸残基的数目并无严格规定,在不少文献中,把含有30甚至更多核苷酸残基的多核苷酸分子也称作寡核苷酸。寡核苷酸可由仪器自动合成,它可作为DNA合成的引物(Primer)
寡核苷酸连接分析的技术方法
中文名称寡核苷酸连接分析英文名称oligonucleotide ligation assay定 义一种测定等位基因单碱基突变的方法,用以确定基因是正常(野生型)还是缺陷(突变型)的。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
合成寡核苷酸探针的技术步骤
首先使支持物羟基化,并用光敏保护基团将其保护起来。每次选取择适当的蔽光膜(mask)使需要聚合的部位透光,其它部们不透光。这样,光通过蔽光膜照射到支持物上,受光部位的羟基解保护。因为合成所用的单体分子一端按传统固相合成方法活化,另一端受光敏保护基的保护,所以发生偶联的部位反应后仍旧带有光敏保护基团。
反义寡核苷酸的基本内容
反义寡核苷酸(AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达,在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,简称PS2ODNs),是用硫原子将磷酸骨架上的非成键氧原子取代后形成的一类新的寡核苷酸类似物
FDA批准的寡核苷酸类药物及在研反义寡核苷酸类药物一览
寡核苷酸,是一类20个左右碱基的短链核苷酸的总称(包括脱氧核糖核酸DNA或核糖核酸RNA内的核苷酸)。寡核苷酸可以很容易地和它们的互补链结合,所以常用来作为探针确定DNA或RNA的结构;而其作为药物候选应用的研究则始于大约30年前,包括了反义寡核苷酸(ASOs),核酸适配体(apatmers)及
简并寡核苷酸基因混编实验
简并寡核苷酸基因混编 实验材料 pBSII KS 质粒 大肠杆菌 DH5α