兔缺血再灌注心肌的蛋白质组学双向凝胶电泳分析

[摘要]【目的】研究缺血再灌注心肌的相关蛋白变化。【方法】将8 只新西兰大白兔随机分为2 组( n =4) :正常心肌对照组(C 组) 和缺血再灌注心肌组(R 组) 。C 组正常灌注160 min ,不阻断左冠状动脉;R 组左冠状动脉前降支阻断40 min ,开放再灌注120 min。分别取各组左心室心肌进行二维凝胶电泳,利用Im2ageMaster 2D 软件分析实验结果。【结果】R 组和C 组对比,有17 个蛋白表达发生了显著变化,其中表达增强的有7 个蛋白,表达降低的有4 个蛋白,表达不匹配(仅在R 组出现) 的有6 个蛋白点。【结论】这些差异表达的蛋白可能在心肌缺血再灌注损伤的保护中发挥作用。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文

锶离子治疗心肌缺血/再灌注损伤研究新进展

  心肌缺血后及时恢复血供是治疗急性心梗的必要手段,但会带来新的损伤,称为心肌缺血/再灌注损伤,目前缺乏有效的针对心肌缺血/再灌注损伤的干预手段。因此,发展治疗心肌缺血/再灌注损伤的实用性方法,尤其是针对促进心肌细胞存活、血管再生、抑制纤维疤痕形成的有效干预手段具有重要的临床意义。由于锶离子在促进骨

双向凝胶电泳

双向凝胶电泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年发明的,原理是第1向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,具有相同等电点的蛋白质无论其分子大小,在电场的作用下都会用聚焦在某一特定位置即等电点处;第2向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白

急性心肌梗死再灌注策略

  成功的再灌注策略能够早期、完全、持久地开通病变相关血管,可以改善急性心肌梗死患者的预后。冠状动脉再灌注手段包括静脉溶栓、经皮冠状动脉介入术 (PCI) 和冠状动脉旁路术(CABG) 。由于介入治疗的发展,需要急诊CABG的病例越来越少。本文讨论急性心肌梗死(AMI)的PCI和静脉溶栓策略

我国学者提出防治心肌缺血再灌注损伤新策略

日前,中国工程院院士、哈尔滨医科大学药理学教授杨宝峰团队首次发现N-乙酰转移酶10(NAT10)是介导心肌缺血再灌注损伤关键调控分子,抑制NAT10表达和功能有望成为心肌缺血再灌注损伤的治疗新策略。相关成果于近日发表在国际期刊《氧化还原生物学》上。急性心肌梗死严重危害人类生命健康。《中国心血管健康与

双向凝胶电泳原理

1、根据蛋白质的等电点(第一向)和分子量(第二向)的不同进行分离。2、电泳后根据蛋白质的上样量对胶进行考马斯亮兰染色、银染或荧光染色,然后用相关软件对电泳图象进行分析。

电泳分析仪双向凝胶电泳方法介绍

   双向凝胶电泳  双向凝胶电泳又称二维凝胶电泳,主要用于分离和分析混合的蛋白质组分,是优于其它方法能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的方法。  该方法第一向采用等电聚焦,根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质等电点不同,将蛋白质进行分离。第二向采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,按蛋白质分子量的

双向凝胶电泳的图像采集和分析

  成像设备可以摄人图像,对凝胶图像以数字形式保存,对每块凝胶图像进行平等的比较,在各研究组之间传递信息,并对大量的数据进行归类分析。目前应用较为广泛的图像分析软件有PDQuest、ImageMaster 2D Elite、Melanie、BioImage Investigator等,分辨率较高,功

双向凝胶电泳实验常见问题分析

(1)低拷贝蛋白的鉴定。人体的微量蛋白往往还是重要的调节蛋白。除增加双向凝胶电泳灵敏度的方法外,最有希望的还是把介质辅助的激光解吸/离子化质谱用到PVDF膜上,但当前的技术还不足以检出拷贝数低于1000的蛋白质。(2)极酸或极碱蛋白的分离。(3)极大(>200kD)或极小(

双向凝胶电泳技术

  双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的最有使用价值的核心方法。   分离蛋白质组所有蛋白的两个关键参数是其分辨率和可重复性。在目前情况下,

双向凝胶电泳技术

双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的最有使用价值的核心方法。分离蛋白质组所有蛋白的两个关键参数是其分辨率和可重复性。在目前情况下,双向凝胶电泳

双向凝胶电泳存在问题

(1)低拷贝蛋白的鉴定。人体的微量蛋白往往还是重要的调节蛋白。除增加双向凝胶电泳灵敏度的方法外,最有希望的还是把介质辅助的激光解吸/离子化质谱用到PVDF膜上,但当前的技术还不足以检出拷贝数低于1000的蛋白质。(2)极酸或极碱蛋白的分离。(3)极大(>200kD)或极小(

双向凝胶电泳操作步骤

样品要求1、建议使用的蛋白质溶解体系为8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT;2、样品浓度大于2 μg/ μl;样品制备双向电泳成功的关键在于建立一套有效的、可重复的样品制备方法。样品制备的影响因素包括蛋白质的溶解性、分子量、电荷数及等电点等。对于不同的样品性质及

双向凝胶电泳技术

  双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的最有使用价值的核心方法。   分离蛋白质组所有蛋白的两个关键参数是其分辨率和可重复性。在目前情况下,

双向凝胶电泳的作用

双向凝胶电泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年发明的,原理是第1向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,具有相同等电点的蛋白质无论其分子大小,在电场的作用下都会用聚焦在某一特定位置即等电点处;第2向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白

蛋白质组的双向凝胶电泳技术介绍

  双向凝胶电泳技术与质谱技术是目前应用最为广泛的研究蛋白质组学的方法。双向凝胶电泳技术利用蛋白质的等电点和分子量差别将各种蛋白质区分开来。虽然二维凝胶电泳难以辨别低丰度蛋白,对操作要求也较高,但其通量高、分辨率和重复性好以及可与质谱联用的特点,使其成为目前最流行、可靠的蛋白质组研究手段。双向凝胶电

关于脑缺血再灌注损伤的简介

  脑是人体对缺氧最为敏感的器官,脑组织缺血(ischemia)将会导致局部脑组织及其功能的损害,其损害程度与缺血时间长短及残存血流量多少有关,短期不完全性缺血只引起可逆性损害,而长时间的完全缺血或严重缺血会引起梗死。组织学变化脑最明显的组织学变化是脑水肿及脑细胞坏死。脑水肿的产生是膜脂质过氧化使膜

研究发现肝脏缺血再灌注损伤原因

  缺血阶段的脂质代谢紊乱,是肝脏缺血再灌注损伤过程中的早期决定性触发因素,会直接导致肝脏移植术后出现器官衰竭和急慢性组织排异现象。武汉大学人民医院心血管内科李红良教授团队的一项研究发现肝脏缺血再灌注损伤的根本原因,是缺血阶段脂质信号网络重构。  最新一期《自然·医学》在线发表了他们的这一成果,该项

黄花柳花总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制

黄花柳花总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制

黄花柳花总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制

黄花柳花总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制

注射用益气复脉(冻干)改善小鼠心肌缺血再灌注损伤...

注射用益气复脉(冻干)改善小鼠心肌缺血再灌注损伤的作用

几种双向凝胶电泳蛋白质检测方法的比较

蛋白质组研究要求有高分辨率的蛋白质分离及准确、灵敏的质谱鉴定技术。凝胶电泳中蛋白质的着色不仅影响蛋白质分离的分辨率,同时也影响后续的质谱鉴定。选择适当的蛋白质染色法将有助于提高蛋白质组学研究结果的质量。蛋白质的染色常用的有4类:有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。其中有机试剂染色以考马斯亮蓝染

双向凝胶电泳的操作步骤

样品要求1、建议使用的蛋白质溶解体系为8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT;2、样品浓度大于2 μg/ μl;样品制备双向电泳成功的关键在于建立一套有效的、可重复的样品制备方法。样品制备的影响因素包括蛋白质的溶解性、分子量、电荷数及等电点等。对于不同的样品性质及

双向凝胶电泳的技术简介

双向凝胶电泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年发明的,原理是第1向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,具有相同等电点的蛋白质无论其分子大小,在电场的作用下都会用聚焦在某一特定位置即等电点处;第2向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白

双向凝胶电泳的技术应用

凝胶中蛋白的检测凝胶染色的目的是使其中的蛋白质能够被观察到。目前还没有通用的染色方法,只能在考虑多种因素如需要的灵敏度、线性范围、方便程度、费用、以及成像设备类型等基础上,结合实际进行选择。有时也可以将蛋白转膜后通过免疫印迹的方法来进行检测。图像采集和分析成像设备可以摄人图像,对凝胶图像以数字形式保

简述双向凝胶电泳的原理

  1、根据蛋白质的等电点(第一向)和分子量(第二向)的不同进行分离。  2、电泳后根据蛋白质的上样量对胶进行考马斯亮兰染色、银染或荧光染色,然后用相关软件对电泳图象进行分析。

双向凝胶电泳的操作步骤

样品要求1、建议使用的蛋白质溶解体系为8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT;2、样品浓度大于2 μg/ μl;样品制备双向电泳成功的关键在于建立一套有效的、可重复的样品制备方法。样品制备的影响因素包括蛋白质的溶解性、分子量、电荷数及等电点等。对于不同的样品性质及

双向凝胶电泳的工作原理

1、根据蛋白质的等电点(第一向)和分子量(第二向)的不同进行分离。2、电泳后根据蛋白质的上样量对胶进行考马斯亮兰染色、银染或荧光染色,然后用相关软件对电泳图象进行分析。

双向凝胶电泳的操作步骤

样品要求1、建议使用的蛋白质溶解体系为8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT;2、样品浓度大于2 μg/ μl;样品制备双向电泳成功的关键在于建立一套有效的、可重复的样品制备方法。样品制备的影响因素包括蛋白质的溶解性、分子量、电荷数及等电点等。对于不同的样品性质及

双向凝胶电泳的工作原理

双向凝胶电泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年发明的,原理是第1向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,具有相同等电点的蛋白质无论其分子大小,在电场的作用下都会用聚焦在某一特定位置即等电点处;第2向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白