几种标记实验的特点
RAPD利用 10 个碱基的一个或几个随机引物非定点地扩增 DNA 片段，一般一个引物可扩增 6-12 条 DNA 片段，利用凝胶电泳分开扩增的片段，从而进行基因多态性研究。 RAPD 是一种能快速进行基因多态性研究的技术，并且由于不涉及印迹杂交、放射性自显影等技术，因此简便易行。SSR 真核生物的基因组中散布着大量的串联重复序列，其中， 2-4 个 bp 的微卫星序列 (Microsatellite 或叫简单序列重复 SSR:Simple Sequence Repeats) 具有高度多态性。 微卫星在结构上的最大特点是两端序列较保守， SSR 引物根据与微卫星重复序两端的特定短序列设计，用来扩增重复序列本身，从而揭示微卫星的多态性。 SSR 是检测多态性的一种有效方法。微卫星（ SSR ）是广泛分布于真核生物基因组中的短串联重复序列（ 1 － 7bp ）， SSR 实验一般检测到的是一个单一的多等位基因位点；是共显性遗传，可鉴......阅读全文
ISSR（intersimple－sequence－repeat）分子标记的实验原理及操作
ISSR标记ISSR（inter-simple sequence repeat）标记是一种类似RAPD，但利用包含重复序列并在 3’或5’锚定的单寡聚核酸引物对基因组进行扩增的标记系统，即用SSR引物来扩增重复序列之间的区域。其原理具体是，ISSR标记根据生物广泛存在 SSR的特点，利用在生
免疫沉淀实验——免疫沉淀放射性标记抗原
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS仪器、耗材离心机实验步骤1. 按基本方案进行，但以下说明的操作步骤已经修改：（2b）按所需选用步骤4b所提供的其中之一备择物（①，②，③）预澄清放射性抗原溶液。（4b）加入1 μl 抗原特异性抗血清，或3 μg 抗原特异性单抗，或抗质特异性杂交瘤培养上 清（克隆化细
非荧光标记的遗传标记分析技术
近年来，美国GENTEON公司采用激光致导的动态荧光检测技术（Dynamic fluorescence），结合多通道毛细管电泳技术，研制出Capella 400型全自动基因分析系统。该仪器采用动态荧光检测技术，彻底消除了传统荧光DNA标记检测的高成本和复杂性，可精确有效到检测未经标记的单链或双链核苷
放射性标记化合物的标记方法
放射性标记化合物的常用标记方法有化学合成法、同位素交换法和 生物化学法。通常是根据所需标记化合物的组成、结构及应用要求来选择合适的放射性核素，然后再根据可提供的含有所需放射性核素的原料，结合应用要求来设计其标记路线。原料的物理化学性质不同，所采用的标记路线也不同（见放射性标记方法）。常用于标记的放射
亲和标记的应用
有人用亲和标记技术直接鉴别结合部位的氨基酸残基。其做法是将一化学性质活跃的侧链连接到半抗原上，当此带有侧链的半抗原与相应抗体结合后，侧链即与邻近的氨基酸形成共价键，也就是说，结合部位邻近的氨基酸残基被标记了。也有人用叠氮基作侧链连接到半抗原上，并与相应抗体结合，经紫外线照射后，叠氮基转变成活化的硝基
标记的免疫技术
免疫技术是利用抗原抗体反应进行的检测方法，即应用制备好的特异性抗原或抗体作为试剂，以检测标本中的相应抗体或抗原。它的特点是具有高度的特异性和敏感性。如将试剂抗原或试剂抗体用可以微量检测的标记物（例如放射性核素、荧光素、酶等）进行标记，则在与标本中的相应抗体或抗原反应后，可以不必测定抗原抗体复合物
分子标记的概念
分子标记（Molecular Markers），是以个体间遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记，是DNA水平遗传多态性的直接的反映。与其他几种遗传标记——形态学标记、生物化学标记、细胞学标记相比，DNA分子标记具有的优越性有：大多数分子标记为共显性，对隐性的性状的选择十分便利；基因组变异极其
什么是参照标记？
中文名称参照标记英文名称reference marker定 义在遗传图或物理图作图时，确定与其他标记之间相对位置的一种信息标记。应用学科遗传学（一级学科），基因组学（二级学科）
蛋白质标记
Biosynthetic labeling (Sefton Lab)Biotinylation of Antibody (Contributed by Nanci Donacki)125I Labeling of Protein using ICl (ScienceXchange)Protein (
亲和标记的意义
亲和标记(affinity labeling)：指对酶的活性部位、受体的结合位点进行特异标记的方法。试剂A-X的A基团和X基团可分别与不同的位点进行结合，从而将两种物质交联在一起。
亲和标记的原理
亲和标记指用对具有特异的亲和性物质中导入化学反应基团的试剂，有选择地修饰存在于活体高分子的对应结合部位的官能基。因根据亲和标记的目的而设计的试剂，对相应的活体高分子具特异的亲和性，故形成试剂与活体高分子的特异的复合体，结果在结合部位试剂之浓度特别高，因而结合部位的官能基得到良好的修饰。例如，对以芳香
抗体的标记方法
荧光色素标记抗体1．准备好凝胶滤柱以便完成结合反应后用于分离标记抗体和游离的荧光色素。分离球形蛋白使用排除极限为20 000～50 000的凝胶介质和细粒级凝胶（直径约50μm）。所需凝胶滤柱的大小可根据偶联反应的总体积×20来确定。依据厂家说明准备好滤柱，用20倍柱床体积的PBS灌注滤柱，直至缓冲
酶标记的概念
中文名称酶标记英文名称enzyme labeling定 义一种免疫标记技术。即将酶与抗体或抗原结合，通过与底物反应而显色，用于示踪组织切片或细胞等标本中的相应抗原或抗体。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断（三级学科）
亲和标记的概念
亲和标记(affinity labeling)：指对酶的活性部位、受体的结合位点进行特异标记的方法。试剂A-X的A基团和X基团可分别与不同的位点进行结合，从而将两种物质交联在一起。
标记基因的分类
选择基因和报告基因都可以看做是标记基因，都起着标记目的基因是否成功转化的作用，但是它们又有着各自的特点。选择基因（又称选择标记基因），主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因，这种基因在执行其选择功能时，通常存在检测慢（蛋白酶作用需要时间）、依赖外界筛选压力（如抗生素、除草剂）等缺陷。而报告
什么是标记抗体？
抗体经过酶标记、铁蛋白标记或通过胶体金标记获得标记抗体，是免疫电镜样品制备的一种方法，用于观察抗原抗体免疫复合物方面研究的手段。免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上，通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。抗体标记主要是用于抗
标记的免疫技术
免疫技术是利用抗原抗体反应进行的检测方法，即应用制备好的特异性抗原或抗体作为试剂，以检测标本中的相应抗体或抗原。它的特点是具有高度的特异性和敏感性。如将试剂抗原或试剂抗体用可以微量检测的标记物（例如放射性核素、荧光素、酶等）进行标记，则在与标本中的相应抗体或抗原反应后，可以不必测定抗原抗体复合物
AFLP标记技术
实验概要AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来(附图)。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的
简述探针标记方法
①缺口平移标记法。利用的是DNA聚合酶I能修复DNA链的功能。该法先由DNaseI在DNA双链上随机切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´；端核苷酸，同时在3´；端修复加入被标记核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、简便、成本相对较低、比活性相对较高、标记均匀，多用于大分
RFLP标记技术
实验概要DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种（个体）基因组的限制性内切酶的酶
分子标记的简介
分子标记(Molecular Genetic Markers)是以个体间遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记，是 DNA 水平遗传多态性的直接的反映。与其他几种遗传标记——形态标记、同工酶标记、细胞标记相比，DNA 分子标记具有的优越性有：大多数分子标记为共显性，对隐性的农艺性状的选择十分便
分子标记的概述
分子标记的概念有广义和狭义之分。广义的分子标记是指可遗传的并可检测的DNA序列或蛋白质。狭义分子标记是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异性DNA片段。 分子标记（Molecular Markers），是以个体间遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记，是DNA水平遗传多态性的直接的
RAPD标记技术
实验概要运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly amplifiled polymorphic DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上，它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体)
组织切片的免疫过氧化物酶标记实验
实验材料组织样品试剂、试剂盒PBS过氧化氢PAP二氨基联苯胺仪器、耗材离心机加湿盒培养箱实验步骤1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2. 待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片
组织切片的免疫过氧化物酶标记实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 PBS过氧化氢PAP二氨基联苯胺仪器、耗材 离心机加湿盒培养箱实验步骤 1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2. 待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿
用大肠杆菌－Klenow－片段标记合成的寡核苷酸实验
试剂、试剂盒 甲酰胺加样缓冲液 大肠杆菌 DNA 聚合酶 IKlenow 片段 变性聚丙烯酰胺凝胶 寡核苷酸引物 寡核苷酸模板 [α-32P]dNTP
方案21.11－3H胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验
实验方法原理 细胞培养至适当密度，用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min，清洗后固定细胞，除去未掺入的前体物，准备同位素放射自显术。 实验步骤 材料
光镜下双/多重免疫标记实验——双重免疫荧光染色
实验步骤1. 古兹菲德-雅各氏病（CJD）病人的尸解脑组织，4％ 中性甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，厚 5 μm（贴片前的载玻片应预涂不含有荧光色素的黏合剂）。2. 常规脱蜡，水化。3. 抗原修复（柠槺酸盐缓冲液 pH 6.0 中，高压灭菌器加热 100℃，20 min）及 96％ 甲酸孵育 2 m
用大肠杆菌－Klenow－片段标记合成的寡核苷酸实验
试剂、试剂盒 甲酰胺加样缓冲液大肠杆菌 DNA 聚合酶 IKlenow 片段变性聚丙烯酰胺凝胶寡核苷酸引物 寡核苷酸模板[α-32P]dNTP仪器、耗材 磷荧光粘贴标签水浴或模块实验步骤 材料溶液和缓冲液稀样贮存液至适当浓度。甲酰胺加样缓冲液10XKlenow 缓冲液酶与缓冲液大肠杆菌 DNA 聚合
循环测序：利用－PCR－和引物末端标记进行双脱氧测序实验
试剂、试剂盒 ddNTP 延伸 终止混合物酶及其缓冲液AmpliTaq CS 或其他无外切酶活性的 DNA 聚合酶循环测序缓冲液热稳定的 DNA 聚合酶核酸和寡核苷酸模板 DNA仪器、耗材 小离心管 或者微孔板热循环仪实验步骤 材料溶液和缓冲液贮存液、缓冲液和试剂的配方请参照附录 1。将贮存液稀释到