酶活性测定法的测定方式介绍

酶活力的测定可采用两种方式: 其一是测定完成一定量反应所需的时间,其二是测定单位时间内的酶催化的化学反应量。 终点法 该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。 其一个发展是采用检测器对反应进行连续跟踪,并在反应达到某一程度时,精确地自动记录所需要的时间,这就是酶分析自动化中的固定浓度法;另一个发展是作成简便的酶检测纸片。 动力学法 该方式测定原理是:在一定条件下,酶促反应速度和酶浓度成正比,因此测得反应速度就需要求得酶浓度。待测的酶浓度是影响反应速度的唯一因素,其他因素都应处于最适于酶发挥催化作用的水平,为此应选择适宜的底物浓度、缓冲体系、温度,并向反应系统中添加必要的辅助因子。......阅读全文

关于酚妥拉明的测定法介绍

  取本品约25mg,精密称定,置25mL量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5mL,置50mL量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取20μL,注入液相色谱仪,记录色谱图;另取甲磺酸酚妥拉明对照品,同法测定。按外标法以酚妥拉明峰面积计算,即得。  【类别】肾上腺素受体阻滞药。  【贮藏】遮光

常用的-ELISA-测定法介绍

①测定抗体的间接法  首先将已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反应板的凹孔内。加待测抗体(如需筛选的杂交瘤细胞株的组织培养上清液);保温后洗涤以除去未结合的杂蛋白质,加酶标抗抗体;保温后洗涤,加底物保温30min 后,加酸或碱中止酶促反应,用目测或光电比色测定抗体含量。②测定抗原的双抗体夹心法  首先将

豆粕中尿素酶活性的测定_尿素酶解法

将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合,在30℃保持30min后,尿素酶催化尿素水解产生氨的反应。用过量的盐酸溶液中和所产生的氨,再用氢氧化标准溶液回滴。实验材料大豆试剂、试剂盒尿素缓冲溶液盐酸氢氧化钠蒸馏水仪器、耗材样品筛酸度计恒温水浴锅试管精密计时器粉碎机分析天平移液管一、实验目的掌握测定尿素酶

关于酶联免疫吸附测定法标记用酶的介绍

  用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室温下稳定;反应产物易于显现;能商品化生产。当前应用较多的有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP应用最广。  1、酶联免疫吸附测定法标记用酶—过氧化物酶  过氧化物酶广泛分布于植物中,辣根中含量最高,从

尿海藻糖酶的酶活性的测定

1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖,然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。2. 步骤将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱,以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标本0.9mI

熔点测定法测定方法介绍

1.第一法 测定易粉碎的固体药物取供试品适量,研成细粉,除另有规定外应按照品种项下干燥失重的条件进行干燥。若供试品不检查干燥失重、熔点范围低限在135℃以上且受热不分解,可采用105℃干燥;熔点在135℃以下或受热分解的供试品,可在五氧化二磷干燥器中干燥过夜或用其他适宜的干燥方法干燥,如恒温减压干燥

测定酶催化活性存在的缺陷

测定酶催化活性存在的问题是关于医学检验职称的生化检验知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享,希望给予大家帮助!测定酶的催化活性虽然是临床上最常用的方法,但由于酶的催化活性不仅决定于酶的含量,还受多种因素的影响,如所用底物的性质及浓度、反应介质PH、温度、离子强度、激活或抑制因子等,因此具有方

酶活性测定样品的贮存及处理

测定活性之前所贮的样品酶活性有了降低,无论所用的仪器如何先进,也不能获得准确的结果。在适当的条件下酶会失活,因而必须强调在收集样品之后应尽可能快速测试酶活性,最好当天进行测定。关于酶样品的贮存与处理应注意以下几点: 1.酶活力测定最常用的样品是血清或血浆。制备血浆所用的抗凝剂可抑制某些酶的活性,如E

胆碱酯酶活性的测定方法

.胆碱酯酶(ChE或CHE) 正常范围:比色法:130~310U/L; 酶法:儿童和成人男性、女性(40岁以上)5410~32000U/L;女性(16~39岁)4300~ 11500U/L。 2.检查介绍:胆碱酯酶有两类,它们都能水解乙酸胆碱。一类是乙酰胆碱酯酶。另一类是羟基胆碱酯 酶。3.临床意义

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-的

概述脂肪酶的活性测定内容

  1、粗酶液的制备  用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。  2、实验设计  本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理:硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-

吲哚乙酸氧化酶活性的测定

原理   吲哚乙酸在吲哚乙酸氧化酶的作用下,被氧化破坏失去活性。植物体内吲哚乙酸氧化酶活力的大小,对调节体内吲哚乙酸的水平,起着重要的作用,而影响植物的生长。酶活力的大小可以其破坏吲哚乙酸的速度表示之。吲哚乙酸的含量可用比色法测定。   仪器药品     721型分光光度

酶的提取、分离、纯化及其活性测定

  原理   酶是植物体内具有催化作用的蛋白质,植物体内的生化反应,一般都是在酶的作用下进行的,没有酶的催化反应,植物的生命也就停止了,因此对酶的研究是阐明生命现象本质中十分重要的部分。 为要研究酶首先要将酶从组织中提取出来,加以分离、纯化,不同的研究目的对酶制剂的纯度要求也

酶活性测定的常见方法总结

(1)定时法:(两点法)通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,通过加入强酸、强碱、蛋白医学教育网整理沉淀剂等,使反应完全停止(也叫中止反应法)。加入试剂进入化学反应呈色测出

酶活性测定样品的贮存及处理

  1.酶活力测定最常用的样品是血清或血浆。制备血浆所用的抗凝剂可抑制某些酶的活性,如EDTA能抑制ALP,草酸盐抑制LDH,肝素对CK及某些其他酶有轻微的抑制作用,故一般样品以血清为佳  2.多数血清酶以较高浓度存在于红细胞、白细胞或血小板中。因此分离血清时应注意避免溶血。  3.光照对CK活性有

酶活性测定条件的选择和限定

仅在一定条件下酶反应速度v才和酶量成正比例。一定条件是什么?这些条件之间有无主次关系?如何选择合适的测定条件?这些都是实验室工作者在设计或选择测酶活性浓度方法时必须面对的问题。  首先可从理论上探讨在什么特定情况下的反应速度才可能与酶量成正比例。酶的整个反应过程可简化如下:  式中Kp可看成为ES的

酶活性测定样品的贮存与处理

如果在测定活性之前所贮的样品酶活性有了降低,无论所用的仪器如何先进,也不能获得准确的结果。在适当的条件下酶会失活,因而必须强调在收集样品之后应尽可能快速测试酶活性,最好当天进行测定。关于酶样品的贮存与处理应注意以下几点: 1.酶活力测定最常用的样品是血清或血浆。制备血浆所用的抗凝剂可抑制某些酶的活

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理 硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-

关于缺血缺氧性脑病的血清酶活性测定介绍

  新生儿窒息后可引起多脏器功能损害,大量酶类自损伤细胞逸出至血液。一般认为窒息婴儿血清中CPK、LDH和AST活性只能表明窒息程度,不能真实反映心肌细胞或脑细胞损伤程度。国外文献报道,血清中CPK、LDH、AST活性与HIE的病情轻重无关,不能作为诊断和临床分度的依据,但高到一定程度与预后有关,即

酶活性测定方法是什么呢?

  (1)按反应时间分类法  1)定时法:(两点法) 通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。  2)连续监测法:(动力学法或速率法、连续反应法)酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改

脯氨酰异构酶活性测定方法

脯氨酰异构酶活性首先是使用基于糜蛋白酶的测定法发现的。仅当脯氨酸肽键处于反式状态时,蛋白水解酶糜蛋白酶对四残基肽Ala-Ala-Pro-Phe具有非常高的底物特异性。将胰凝乳蛋白酶添加到含有具有该序列的报告肽的溶液中会导致约90%的肽快速裂解,而那些具有顺式脯氨酸键的肽-在水溶液中约为10%-以受未

连续监测法测定酶活性浓度

连续监测法具有测定准确等众多的优点,随着科学技术的发展,自动生化仪的使用,正在逐步取代“固定时间法”。实际工作中,测酶活性浓度常用酶偶联法。最简单的酶偶联反应为以下模式:A:底物B:待测酶产物(不能直接测定)C:指示酶产物(可以直接测定)Ex:待测酶Ei:指示酶如果一些酶反应找不到合适的指示酶与其直

酶免疫测定法检查非淋球菌尿道炎的介绍

  酶免疫测定法检测患者泌尿生殖道标本中的衣原体抗原,判断结果比较客观。本试验的敏感性为60%一90%,特异性为92%一97%。  衣原体培养衣原体是专性细胞内寄生物,只有在活细胞中才能生长和增殖。目前实验室常用的细胞为McCoy细胞及Heh229细胞。所取标本中必须含有活细胞。因此,取材的棉拭子一

细胞因子生物学活性测定法有什么特点?

细胞因子生物学活性测定法主要具有以下特点:①敏感性较高;②特异性不高;③操作繁琐;④易受干扰。

复钙时间测定法介绍

  【原理】 在去钙离子的抗凝血浆中,重新加入适量的钙后,血浆就发生凝固,这一过程所经历的时间即为复钙时间(recalcification time,RT)。  【方法学评价】通常有两种方法:  ①表面玻璃皿法:本法比试管法敏感,但不如试管法简便。  ②试管法:仅用试管替代玻璃皿作试。  RT测定方

液体闪烁光谱测定法介绍

中文名称液体闪烁光谱测定法英文名称liquid scintillation spectrometry定  义基于磷光体或闪烁体等分子在吸收放射性粒子后,可将其能量以光的形式放出的性质来测量样品中放射性活性的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

溶血、黄疸对酶活性测定的影响实验

实验方法原理L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD+实验材料黄疸血清试剂、试剂盒ALT/GPT试剂仪器、耗材半自动生化分析仪试管加样器实验步骤1、稀释试剂.2、开机预温达37度.3、选取测定程序.4、测试:5、结果分析:

抗性酶活性测定需要的缓冲液

放在CO2箱中培养吧。维持PH最好了。

苯胺4羟化酶活性的测定

羟化酶亦称为氢氧化酶,是加氧酶的一种,是催化利用氧分子形成氢氧化物(酚、醇)反应的酶。所谓单(加)氧酶,除底物外,还需要电子供体(NADP-H),AH+O2+NADPH+H+→AOH+NADP++H2O,再从苯丙氨酸合成酪氨酸,(苯丙氨酸羟化酶),从苯胺合成氨基苯酚(芳基-4-羟化酶)。从鲨烯(三十