尿海藻糖酶的酶活性的测定
1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。2. 步骤将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱，以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标本0.9mI。加上0.1mL 0.25mmol/L的海藻糖，混合后于37℃温育120min。生成的葡萄糖用POD-GOD方法测定，以每小时每升尿液中释放多少umol的葡萄糖量作为海藻糖酶的活性浓度。3. 结果IshiharaR等测定健康组尿海藻糖酶的活性是26.6±14”umol·h-1．gcreatinine-1。......阅读全文
尿海藻糖酶的酶活性的测定
1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。2. 步骤将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱，以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标本0.9mI
尿海藻糖酶的酶含量的测定
1. 原理利用抗海藻糖酶单克隆抗体的夹心ELISA方法检测酶蛋白的含量。2. 步骤国外报导用重组海藻糖酶和人工合成的海藻糖酶多肽片段制备出抗人海藻糖酶的单克隆抗体，然后经过包被、封闭等步骤，用夹心ELISA方法测定出酶蛋白的浓度。3. 结果IshiharaR等用ELISA法测定健康组尿海藻糖酶蛋白的
尿海藻糖酶的测定方法
酶活性的测定1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。2. 步骤将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱，以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标
尿海藻糖酶的测定方法
一、酶活性的测定 1. 原理 利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。 2. 步骤 将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱，以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，将体积调整到1
尿海藻糖酶定量测定的技术要点
1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重组海藻糖酶的制备国外采用标准9-甲氧羰基荧光素固相合成法合成氨基酸残基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色谱法（HPLC）分析并提纯多肽。HPLC主要是根据分子的亲水性（反相）和电荷（离子交换）方面的差别来实现样品的分离
尿海藻糖酶定量测定的技术要点
1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重组海藻糖酶的制备 国外采用标准9-甲氧羰基荧光素固相合成法合成氨基酸残基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色谱法（HPLC）分析并提纯多肽。HPLC主要是根据分子的亲水性（反相）和电荷（离子交换）方面的差别来实现样
人工海藻糖酶多肽片段的合成和重组海藻糖酶的制备
国外采用标准9-甲氧羰基荧光素固相合成法合成氨基酸残基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色谱法（HPLC）分析并提纯多肽。HPLC主要是根据分子的亲水性（反相）和电荷（离子交换）方面的差别来实现样品的分离的。反相HPLC的优点是分辨率大。利用分子生物学方法
海藻糖酶的特性介绍
理化特性 海藻糖酶是一种胞外酶，位于哺乳动物肾和小肠上皮细胞膜的刷状缘，国际酶学编号为EC3.2.1.28，属于水解酶类，它能催化水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，且底物作用是高度专一的。海藻糖酶的等电点为4.37，在正常体液pH7.4时带有大量负电荷。该酶已从哺乳动物，肾脏中提纯，经SDS-
海藻糖酶的临床应用
急、慢性肾小球疾病慢性肾小球肾炎、肾病综合征和慢性肾衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有报道说，急性肾病综合征患者尿液NAG活性升高。这些作者得出结论：急性肾病综合征患者可能有肾小管损害。其他调查也显示NAG活性升高和肾病综合征的复发有关。尽管肾小管损害患者尿NAG活性比对照组高1.5-5倍，而ELI
海藻糖酶的临床应用
急、慢性肾小球疾病慢性肾小球肾炎、肾病综合征和慢性肾衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有报道说，急性肾病综合征患者尿液NAG活性升高。这些作者得出结论：急性肾病综合征患者可能有肾小管损害。其他调查也显示NAG活性升高和肾病综合征的复发有关。尽管肾小管损害患者尿NAG活性比对照组高1.5-5倍，而ELI
海藻糖酶的理化特性
海藻糖酶是一种胞外酶，位于哺乳动物肾和小肠上皮细胞膜的刷状缘，国际酶学编号为EC3.2.1.28，属于水解酶类，它能催化水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，且底物作用是高度专一的。海藻糖酶的等电点为4.37，在正常体液pH7.4时带有大量负电荷。该酶已从哺乳动物，肾脏中提纯，经SDS-PAGE电泳显示
海藻糖酶的理化特性
海藻糖酶是一种胞外酶，位于哺乳动物肾和小肠上皮细胞膜的刷状缘，国际酶学编号为EC3.2.1.28，属于水解酶类，它能催化水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，且底物作用是高度专一的。海藻糖酶的等电点为4.37，在正常体液pH7.4时带有大量负电荷。该酶已从哺乳动物，肾脏中提纯，经SDS-PAGE电泳显示
蔗糖酶的活性怎么测定
LS说的那个是定性分析，只能从程度上大概看出结果，不能得出比较精确的值，一般用比色法，分光光度法，和荧光法测出的较好，不过这个对仪器的要求高了
关于海藻糖酶的临床应用介绍
急、慢性肾小球疾病 慢性肾小球肾炎、肾病综合征和慢性肾衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有报道说，急性肾病综合征患者尿液NAG活性升高。这些作者得出结论：急性肾病综合征患者可能有肾小管损害。其他调查也显示NAG活性升高和肾病综合征的复发有关。尽管肾小管损害患者尿NAG活性比对照组高1.5-5倍，
海藻糖酶的基本信息
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一种，对海藻糖有特异作用，水解后成为2个分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。广泛存在于细菌、霉菌、植物和动物中。在人，除肾脏、肠、肝脏、胆液和尿以外，在血浆α2-球蛋白部分中，也可检出其活性，特别是在肾脏中活性很强。
海藻糖酶的生物学特性
在肠道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作为能源被吸收利用，有报道，缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹泻，而肾海藻糖酶的功能目前还不清楚。有报道说，尿海藻糖酶活性升高与近端肾小管损害和某些种类的肾疾病有关。
概述海藻糖酶缺乏的发病机制
婴儿因为遗传的因素可有蔗糖酶及异麦芽糖酶缺乏。蔗糖-异麦芽糖吸收不良的缺陷主要在蔗糖，而异麦芽糖缺陷是继发的。有研究显示该酶在细胞内的处理有缺陷，堆积在内质网内。酶复合物在高尔基复合体内被阻断，而改变了的酶却被转运至细胞表面。由于以上各种因素，这种单基因疾病可呈异质性。该酶基因定位于染色体3q，
海藻糖酶的国内应用前景
近年来的研究发现，肾小管-间质损害是决定肾功能减退的主要因素，而近端肾小管的损害义是肾功能恶化的重要原因。早期发现肾小管损害是锰床诊断和治疗的关键，而尿海藻糖酶在肾近端小管损害方面具有早期、特异、灵敏的诊断价值，目前国内实验室尚未开展此项检测，临床应用前景很大。当前首要的工作是用分子生物学方法制
海藻糖酶的基本信息介绍
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一种，对海藻糖有特异作用，水解后成为2个分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。广泛存在于细菌、霉菌、植物和动物中。在人，除肾脏、肠、肝脏、胆液和尿以外，在血浆α2-球蛋白部分中，也可检出其活性，特别是在肾脏中活性很强。
关于海藻糖酶缺乏的基本介绍
海藻糖酶缺乏，是属于二糖酶缺乏症临床分类之一。本病又称双糖不耐受症，系指各种先天性或后天性疾病，使小肠黏膜刷状缘双糖酶缺乏，使双糖的消化、吸收发生障碍，进食含有双糖的食物时发生的一系列症状和体征。 海藻糖酶缺乏：正常人小肠黏膜内有多种二糖酶，如乳糖酶能将乳糖分解为半乳糖及葡萄糖；麦芽糖酶能将麦
海藻糖酶的基本信息概述
通过抑制内源海藻糖酶水平来修饰海藻糖-6-磷酸水平从而调节代谢。 本发明在细胞代谢碳流调节领域内。已经发现导入细胞内糖类海藻糖-6-磷酸（T-6-P）有效来源的变化会诱导体内细胞、组织和器官的发育和/或组成的变化。这些变化可通过抑制内源海藻糖酶来诱导，该酶能够将海藻糖水解成两个葡萄糖组分。
海藻糖酶的生物学特性
在肠道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作为能源被吸收利用，有报道，缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹泻，而肾海藻糖酶的功能目前还不清楚。有报道说，尿海藻糖酶活性升高与近端肾小管损害和某些种类的肾疾病有关。
概述海藻糖酶缺乏的发－病机制
婴儿因为遗传的因素可有蔗糖酶及异麦芽糖酶缺乏。蔗糖-异麦芽糖吸收不良的缺陷主要在蔗糖，而异麦芽糖缺陷是继发的。有研究显示该酶在细胞内的处理有缺陷，堆积在内质网内。酶复合物在高尔基复合体内被阻断，而改变了的酶却被转运至细胞表面。由于以上各种因素，这种单基因疾病可呈异质性。该酶基因定位于染色体3q，
酶活性的测定方法
一般采用测定酶促反应初速度的方法来测定活力，因为此时干扰因素较少，速度保持恒定。反应速度的单位是浓度/单位时间，可用底物减少或产物增加的量来表示。因为产物浓度从无到有，变化较大，而底物往往过量，其变化不易测准，所以多用产物来测定
酶活性的测定实验
酶活性的测定可应用于：（1）酶动力学的研究；（2）酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示，或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度，取决于指定的条件。SI单位是katal，1 katal = 1 mol /s，更实际
酶活性测定的方式
酶促反应速度的测定可采用两种方式： 一、测定完成一定量反应所需的时间； 二、测定单位时间内的酶促反应量。前者称为终点法，后者称为动力学法。 终点法 该方式是在特定条件下，将样品中要检知的酶作用一定量的底物，然后根据反应进行到某一程度（即达到某一指标）所需要的时间长短来估计酶的活力。 其
酶活性的测定实验
连续性检测 实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示，或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量
抗海藻糖酶单克隆抗体的制备
通过腹腔注射加佐剂的重组蛋白或合成的多肽来免疫8周龄的雌性小鼠BALB/c，第一次免疫问隔两周后，每周连续注射3-4次。最后一次注射后3-4天杀死小鼠，用改良的Kohler和Milstein方法将脾细胞与B细胞瘤株P3-X63-Ag8融合。细胞融合产生8种杂交瘤克隆株：KM2275、KM2276、K
关于海藻糖酶缺乏的发病原因分析
正常人小肠黏膜内有多种二糖酶，如乳糖酶能将乳糖分解为半乳糖及葡萄糖；麦芽糖酶能将麦芽糖分解为葡萄糖及异麦芽糖；异麦芽糖酶能将异麦芽糖分解为两个分子的葡萄糖；蔗糖酶能分解蔗糖为葡萄糖及果糖；还有海藻糖酶能分解海藻糖为两个分子的葡萄糖。因为某些原因使二糖酶缺乏，从而二糖的消化吸收发生障碍导致腹泻。临
海藻糖酶的基本信息及分布情况
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一种，对海藻糖有特异作用，水解后成为2个分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。广泛存在于细菌、霉菌、植物和动物中。在人，除肾脏、肠、肝脏、胆液和尿以外，在血浆α2-球蛋白部分中，也可检出其活性，特别是在肾脏中活性很强。