基因干扰技术在植物学中的应用
在植物学中的应用Napoli等将1个查尔酮合成酶基因(chs)置于1个强启动子后导人矮牵牛(Petunia hybrida),试图加深花朵的紫颜色。结果部分花的颜色并非期待中的深紫色,而是形成了花斑状甚至白色,而且这种性状可以遗传。因为导入的基因和其同源的内源基因同时都被抑制,他们将这种现象命名为共抑制(co-suppression)。类似的结果同样在真菌脉胞菌(Neurospora crassa)中和其它转基因植物中存在。对于部分转基因植物来说,基因沉默可能是因为特异基因的甲基化而导致,这被称为转录水平基因沉默。但确实部分植物中的基因沉默是在转录后发生的,这被称为转录后基因沉默。实验表明在发生PTGS的个体中同源转录确实存在,但是很快在胞浆中被降解,没有积聚。Palauqui等进一步证实,在植物中将出现转基因沉默的植株嫁接到另一没有基因沉默的转基因植株中同样可以导致PTGS,但对非转基因植株却无效。Cogoni等证实PTGS由......阅读全文
基因干扰技术在植物学中的应用
在植物学中的应用Napoli等将1个查尔酮合成酶基因(chs)置于1个强启动子后导人矮牵牛(Petunia hybrida),试图加深花朵的紫颜色。结果部分花的颜色并非期待中的深紫色,而是形成了花斑状甚至白色,而且这种性状可以遗传。因为导入的基因和其同源的内源基因同时都被抑制,他们将这种现象命名为共
RNA干扰技术在植物学中的应用
Napoli等将1个查尔酮合成酶基因(chs)置于1个强启动子后导人矮牵牛(Petunia hybrida),试图加深花朵的紫颜色。结果部分花的颜色并非期待中的深紫色,而是形成了花斑状甚至白色,而且这种性状可以遗传。因为导入的基因和其同源的内源基因同时都被抑制,他们将这种现象命名为共抑制(co-
RNA干扰用于在植物学中的应用
Napoli等将1个查尔酮合成酶基因(chs)置于1个强启动子后导人矮牵牛(Petunia hybrida),试图加深花朵的紫颜色。结果部分花的颜色并非期待中的深紫色,而是形成了花斑状甚至白色,而且这种性状可以遗传。因为导入的基因和其同源的内源基因同时都被抑制,他们将这种现象命名为共抑制(co-su
RNA干扰在植物学中的应用介绍
Napoli等将1个查尔酮合成酶基因(chs)置于1个强启动子后导人矮牵牛(Petunia hybrida),试图加深花朵的紫颜色。结果部分花的颜色并非期待中的深紫色,而是形成了花斑状甚至白色,而且这种性状可以遗传。因为导入的基因和其同源的内源基因同时都被抑制,他们将这种现象命名为共抑制(co-su
RNAi在植物学中的应用
Napoli等将1个查尔酮合成酶基因(chs)置于1个强启动子后导人矮牵牛(Petunia hybrida),试图加深花朵的紫颜色。结果部分花的颜色并非期待中的深紫色,而是形成了花斑状甚至白色,而且这种性状可以遗传。因为导入的基因和其同源的内源基因同时都被抑制,他们将这种现象命名为共抑制(co-su
基因干扰技术的应用
由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,(长度超过三十的dsRNA会引起干扰素毒性)所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗领域。
PCR技术在突变基因检测中的应用
基因突变(gene mutation)是遗传病和肿瘤发生的根本原因,检测与遗传病及恶 性肿瘤发生有关的突变基因(mutant gene)是分子生物学,医学遗传学及肿瘤学研究 的热点,它对阐明遗传病和肿瘤发生的分子生物学基础及其诊断和早期诊断具有重要 \意义,分子生物学技术的发展,尤其是PCR技术的出
非病毒转染技术在基因编辑中的应用
印第安纳大学医学院的印第安纳再生医学与工程中心(ICRME)是组织纳米转染(TNT)再生医学技术的发源地,该技术可在活体中实现功能性组织重编程。去年,ICRME的研究人员在《Nature Protocol》上发表了关于如何制造TNT 2.0硅芯片硬件的文章。现在,他们的研究首次证明了TNT可以作为一
基因芯片技术在疟疾研究中的应用
随着人类基因组( human genome p roject, HGP) 、多种模式生物(model organism)和部分病原体基因组测序的完成,基因序列数据以前所未有的速度不断增长。传统实验方法已无法系统地获得和诠释日益庞大的基因序列信息,研究者们迫切需要一种新的手段,以便大规模、高通
RACE技术在基因工程抗体中的应用
前言20世纪80年代后期,随着分子生物学的迅速发展,使得人们可以通过基因工程技术对天然的分子进行人为的改造,这为抗体药物带来了新的突破点和希望。了解和阐明抗体分子的结构及功能,为人类疾病诊断及治疗提供了新的推动力。基因工程抗体 为了解决传统的鼠源性单抗存在的弊端,对鼠源性单抗进行改进以及人源化单抗的
RNAi技术在功能基因组中的应用
在功能基因组研究中,需要对特定基因进行功能丧失或降低突变,以确定其功能。由于RNAi具有高度的序列专一性,可以特异地使特定基因沉默,获得功能丧失或降低突变,因此RNAi可以作为一种强有力的研究工具,用于功能基因组的研究。将功能未知的基因的编码区(外显子)或启动子区,以反向重复的方式由同一启动子控制表
显微操作技术在基因编辑中的应用(一)
本文将大致回顾小鼠转基因领域的显微操作技术,包括CRISPR/Cas9技术,旨在对这类客户所用的工作流程和术语进行介绍。此外,还针对有用的显微操作系统配置提供一些建议。显微操作技术概述图1:CRISPR/Cas9、原核注射和胚胎干细胞移植技术的粗略比较。更多详情请参阅下文。小鼠胚胎早期发育阶段 图2
显微操作技术在基因编辑中的应用(二)
图6:PN 注射过程DNA 随机非靶向整合到基因组中典型的PNI系统设置:-DMi8:手动、电动部件可供选择-透射光轴; S28聚光镜及微分干涉差-5/10倍物镜(FLUOTAR或N PLAN)用于大致观察-20倍、40倍长工作距离物镜。40倍物镜用于注射-3板载物台(固定载物台的物体导杆妨碍显微
显微操作技术在基因编辑中的应用(三)
图9:ESI注入8细胞阶段的胚胎。钝端毛细管图10:EMBL转基因过程中使用的DMi8、Eppendorf TransferMan 4r显微操作器和PiezoXpert压电破膜仪。以钝端毛细管进行胚囊注射。DIC用于小鼠转基因的CRISPR/Cas 9技术用于小鼠转基因的CRISPR/Cas9技术为
基因芯片技术在疟原虫研究中的应用
基因芯片技术的出现有力地促进了人们对疟原虫生物学的认识。早在2000年,恶性疟原虫的基因组测序尚未完成, Hayward等根据恶性疟原虫绿豆核酸酶基因文库, 制成“鸟枪”DNA ( shotgunDNA)芯片,分析了疟原虫滋养体和配子体之间的基因表达差异,为疟原虫发育阻断剂和疫苗研究提供了有益线
基因工程技术在饲料用酶中的应用
(1)利用重组微生物反应器高效表达目的酶,降低生产成本。(2)利用基因工程技术改良饲用酶制剂,提高酶的质量与效率。随着基因工程技术的发展,通过将部分微生物的基因改造,例如,通过基因工程手段,将酶蛋白的基本结构改变,强化酶在某方面的功能特性的这一做法已成为商业上成功的典范,然而,这种做法给酶制剂的应用
冷冻干燥技术在基因工程药物中的应用
随着生物技术的迅猛发展,生物活性物质不断被利用,利用转基因的宿主体(原核和真核)细胞生产的活性物质作为药物已应用于临床,国内外批准上市的已逾50种,正在开发的数量达几百种其中,大部分是蛋白质和活性多肽蛋白质分子的化学结构决定其活性影响活性的因素很多,主要有两方面,一是结构因素,包括分子量大小,氨基酸
冷冻干燥技术在基因工程药物中的应用
随着生物技术的迅猛发展,生物活性物质不断被利用,利用转基因的宿主体(原核和真核)细胞生产的活性物质作为药物已应用于临床,国内外批准上市的已逾50种,正在开发的数量达几百种其中,大部分是蛋白质和活性多肽蛋白质分子的化学结构决定其活性影响活性的因素很多,主要有两方面,一是结构因素,包括分子量大小,氨基酸
基因枪在棉花转基因中的应用
在迄今发展起来的棉花转基因技术中,农杆菌介导的遗传转化应用最为广泛。自1987年Umbeck等通过农杆菌介导法成功获得坷字棉转基因植株后,农杆菌介导法逐渐成为国际上最普遍的转化手段,并且取得很大进展。中国农科院棉花研究所成功建立了20多个棉花品种的高效、稳定的规模化转化体系,实现了流水线操作,建立了
Celigo技术在基因治疗和病毒研究中的应用(一)
Biogen于1978年由几位著名的生物学家,包括爱丁堡大学的Kenneth Murray、麻省理工学院的Phillip Allen Sharp,以及哈佛大学的Walter Gilbert和Charles Weissmann在日内瓦成立。后来,Walter Gilbert和Phillip A
比较基因组杂交技术在肿瘤研究中的应用实验
比较基因组杂交技术在肿瘤研究中的应用 试剂、试剂盒 Ham F10 培养基 胎牛血清
比较基因组杂交技术在肿瘤研究中的应用实验
比较基因组杂交(CGH) 可以提供肿瘤细胞全基因组染色体拷贝数改变的信息 [1]。与常规细胞遗传学分析不同,CGH 无需细胞培养,因此只要是可以获得 DNA 的临床标本,包括存档的石蜡包埋组织,都可以进行该实验 ra。CGH 可以在正常染色体上定位扩增或缺失的 DNA 序列,从而显示出重要基因的位点
基因芯片技术在肾移植组织配型中的应用
为了比较基因芯片和特异性聚合酶链反应(PCR-SSP)两种HLA-DR分型方法,探讨适用于肾移植供、受者分型的新方法。研究者对60份肾移植供、受者的DNA样本同时采用基因芯片和PCR-SSP进行HLA-DR分型,并进行分析比较。结果60例样本的两种分型方法结果完全一致56份,相同率达93%。结果不相
Celigo技术在基因治疗和病毒研究中的应用(二)
蚀斑实验流程示例见下图:经典的病毒感染滴度就是通过蚀斑实验来测定的。通常,将细胞接种在多孔培养板中形成汇合的单细胞层。在第二天,将细胞用稀释的病毒样品接种一段特定的时间(时间取决于滴定的辅助病毒)。除去接种物并用新鲜培养基换液,再将细胞孵育若干天,直到形成大到足以通过肉眼观察和计数的蚀斑。传统的蚀斑
Celigo技术在基因治疗和病毒研究中的应用(三)
Disucssion这里所介绍的使用荧光检测的自动蚀斑计数方法有助于加快蚀斑检测的速度。但是,有几种类型的感染性病毒滴度实验不会形成蚀斑。半数组织培养感染剂量(TCID50)就是另一种常用的病毒滴定方法。TCID50是终点稀释测定法,用于确定感染50%接种细胞所需的病毒样品稀释度。由于蚀斑和TCID
基因芯片技术在疟疾动物模型研究中的应用
动物模型在人类疟疾的病理学研究、疫苗开发和治疗试验等方面发挥着不可替代的作用,基因芯片技术与动物模型的结合,更进一步加深了人类在分子水平上对疟疾的认识。2004年Sexton等利用基因芯片分析了鼠疟原虫转录组的变化,结果发现鼠感染原虫后脑部400余基因及脾脏600余基因的转录发生了变化,这些变化
基因干扰技术的基本特征
①RNAi是转录后水平的基因沉默机制;②RNAi具有很高的特异性,只降解与之序列相应的单个内源基因的mRNA;③RNAi抑制基因表达具有很高的效率,表型可以达到缺失突变体表型的程度,而且相对很少量的dsRNA分子(数量远远少于内源mRNA的数量)就能完全抑制相应基因的表达,是以催化放大的方式进行的;
基因干扰技术的作用机制介绍
病毒基因、人工转入基因、转座子等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内,并利用宿主细胞进行转录时,常产生一些dsRNA。宿主细胞对这些dsRNA迅即产生反应,其胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA(大约21~23 bp),即siRNA。siRNA在细胞内R
基因技术在军事领域的应用介绍
生物武器已经使用了很长的时间。细菌,毒气都令人为之色变。但是,传说中的基因武器却更加令人胆寒。
基因技术在军事领域的应用介绍
生物武器已经使用了很长的时间。细菌,毒气都令人为之色变。但是,传说中的基因武器却更加令人胆寒。