蓖麻种子毒蛋白的高效凝胶过滤色谱分析

摘要:植物蓖麻种子的抽提液经sepharose 4 B 柱和sephadexG2100柱分离纯化,得到一种毒蛋白,利用光谱图和反相高效液相色谱来确认毒蛋白的纯度。根据标准相对分子质量曲线,得到它的相对分子质量并与SDS2PAGF (十一烷基磺酸钠2聚丙烯酰胺凝胶电泳)所得结果进行比较,用氨基酸自动分析仪测定了其氨基酸组成。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文

凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量

实验目的掌握凝胶层析的基本原理。学习利用凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量的实验技能。实验原理凝胶层析法也称分子筛层析法,是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。当混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高。凝胶

凝胶层析法(gel-chromatography)测定蛋白质相对分子质量

实验目的掌握凝胶层析的基本原理。学习利用凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量的实验技能。实验原理凝胶层析法也称分子筛层析法,是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。当混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高。凝胶

关于蓖麻毒蛋白的分子结构链介绍

  Ricin由两个肽链以二硫键共价相连接,作为糖蛋白,Ricin含有共价结合的糖分子,糖的主要组成是甘露糖、葡萄糖和半乳糖。蓖麻毒蛋白的一级结构分析已由Funatsu等人完成。 [11] 两条多肤链分别称为A链(Ricinchain A,RTA)和B链(Ricinchain B,RTB)。RTA是

蓖麻毒蛋白分子链结构A链的相关介绍

  A链中只有两个Lys残基,一个位于N端第4位,一个位于C端附近,对于A链的毒性作用极为重要。B链是由260个氨基酸残基组成,并有4个分子内的二硫链,有两条寡糖链(G1cNAc)2(Man)6和(G1 cNAc)2(Man)7,分别接在第93位和133位Asn残基上,故分子量较A链高。B链两条寡糖

凝胶色谱测定聚合物相对分子质量及其分布

在凝胶色谱技术应用之前,许多经典方法都可以测定高聚物的相对分子质量,如端基测定法、渗透压法、粘度法等,但在测定时都有局限。在相对分子质量分布(多分散性指数)成为人们关注的热点后,经典方法却不能同时测定聚合物的相对分子质量分布。凝胶(渗透)色谱(GPC)的应用改善了测试条件,并提供了可以同时测定聚合物

凝胶色谱测定聚合物相对分子质量及其分布

在凝胶色谱技术应用之前,许多经典方法都可以测定高聚物的相对分子质量,如端基测定法、渗透压法、粘度法等,但在测定时都有局限。在相对分子质量分布(多分散性指数)成为人们关注的热点后,经典方法却不能同时测定聚合物的相对分子质量分布。凝胶(渗透)色谱(GPC)的应用改善了测试条件,并提供了可以同时测定聚合物

蓖麻毒蛋白的毒性介绍

一个蓖麻毒蛋白分子进入细胞内,就足以使整个细胞的蛋白质合成完全停止而死亡。蓖麻毒素的毒性多肽是A链,A链具有使核糖体失活的能力。B链上含有两个半乳糖结合部位,能与细胞上含半乳糖基的糖蛋白或糖酯结合,蓖麻毒蛋白通过B链连接在细胞表面含有半乳糖末端的糖蛋白和脂蛋白上进入细胞,A链在B链的帮助下,容易穿过

蓖麻毒蛋白的毒性介绍

蓖麻毒蛋白是蓖麻毒素中毒性最强的一种,对各种哺乳动物都有毒。家畜中,兔和马较敏感,羊和鸡等较不敏感。兔(肌肉注射)半数致死剂量LD50为4.1μg/kg,小鼠(腹腔注射)LD50为10μg/kg,人经口致死量为0.15-0.2g,静脉致死量为20 mg。蓖麻毒蛋白是一种细胞毒素,对小白鼠有毒,但对斜

关于蓖麻毒蛋白的基本介绍

  蓖麻毒蛋白是从蓖麻中分离得到的具有凝集素活性的毒蛋白,为最强烈天然毒素之一。是由全毒素、毒类素、凝集素三种物质组成的蛋白质。蓖麻毒蛋白对所有哺乳动物真核细胞都有毒害作用,而对某些恶性肿瘤细胞毒性更强。这使它在医学上成为用于杀伤肿瘤细胞的首选毒素之一。

关于蓖麻毒蛋白的基本概述

  蓖麻(Ricinus communus)又称大麻子、红麻等,是大戟科蓖麻属植物,蓖麻栽培历史悠久,是世界十大油料作物之一,主要分布于非洲、亚洲等,具有特殊的用途和很高的经济价值。中国蓖麻资源丰富,种植面积约700万亩,蓖麻籽年产量34万吨,居世界第2位。蓖麻的种子(蓖麻子)蓖麻籽是蓖麻成熟的果实

概述蓖麻毒蛋白的作用机理

  一个蓖麻毒蛋白分子进入细胞内,就足以使整个细胞的蛋白质合成完全停止而死亡。蓖麻毒素的毒性多肽是A链,A链具有使核糖体失活的能力。B链上含有两个半乳糖结合部位,能与细胞上含半乳糖基的糖蛋白或糖酯结合,蓖麻毒蛋白通过B链连接在细胞表面含有半乳糖末端的糖蛋白和脂蛋白上进入细胞,A链在B链的帮助下,容易

关于蓖麻毒蛋白的检测介绍

  蓖麻毒蛋白分析检测尚缺乏简单、快速、准确的定量分析方法,通用的方法如红血细胞凝集法、280nm紫外吸收法,仅达目视比较半定量分析,还不适用于工业化规模的产品控制分析,更缺乏同时检出能力。郑成、高宝岩用高效液相色谱法在色谱柱150×4.6mm,5μm键合C4固定相,水、乙腈混合流动相,流速1mL/

蓖麻毒蛋白的基本信息

中文名蓖麻毒蛋白外文名Ricin一级学科生物化学与分子生物学毒    性成人致死量为7mg定义蓖麻毒蛋白是从蓖麻中分离得到的具有凝集素活性的毒蛋白,为最强烈天然毒素之一。是由全毒素、毒类素、凝集素三种物质组成的蛋白质。蓖麻毒蛋白对所有哺乳动物真核细胞都有毒害作用,而对某些恶性肿瘤细胞毒性更强。这使它

蓖麻毒蛋白的物化性质

生化组成蓖麻毒蛋白是糖蛋白异二聚体,是由全毒素、毒类素、凝集素三种物质组成的蛋白质,并由数种不同类型的高分子蛋白质组成,其分子式为:-[C8H8N2O2]n-,分子量64000左右,也有报道为36000~85000。已发现的结晶型有已发现的类型有:结晶型(2种)、B1型、T3型、G型、D型,中国和日

凝胶过滤色谱

根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。

关于蓖麻毒蛋白的毒性的介绍

  蓖麻毒蛋白是蓖麻毒素中毒性最强的一种,对各种哺乳动物都有毒。家畜中,兔和马较敏感,羊和鸡等较不敏感。兔(肌肉注射)半数致死剂量LD50为4.1μg/kg,小鼠(腹腔注射)LD50为10μg/kg,人经口致死量为0.15-0.2g,静脉致死量为20 mg。蓖麻毒蛋白是一种细胞毒素,对小白鼠有毒,但

关于蓖麻毒蛋白的生化组成介绍

  蓖麻毒蛋白是糖蛋白异二聚体,是由全毒素、毒类素、凝集素三种物质组成的蛋白质,并由数种不同类型的高分子蛋白质组成,其分子式为:-[C8H8N2O2]n-,分子量64000左右,也有报道为36000~85000。已发现的结晶型有已发现的类型有:结晶型(2种)、B1型、T3型、G型、D型,中国和日本生

简述蓖麻毒蛋白的分离纯化介绍

  蓖麻毒蛋白已被广泛用于“导向药物”的制备(即免疫毒素),将蓖麻毒蛋白应用于生物农药方向也已受到广泛关注与研究,因此,蓖麻毒蛋白的提取纯化具有重要意义,研究提高蓖麻毒蛋白提取率的方法,并用于大规模生产之中,是许多专家正在进行的一项重要研究。  随着基因工程技术的发展,已能利用基因克隆的方法制备Ri

关于蓖麻毒蛋白基因脱毒的介绍

  生物技术的发展及基因沉默技术的出现,为蓖麻脱毒问题的解决提供了新的方法。基因沉默理论认为,导入与内源基因有较高同源性的基因可加强内源基因的沉默。Angel SM和Hamilton A J等的研究也表明,转入重复DNA片段引起内源基因近100%的转录后沉默。这为转基因沉默内源基因提供了更加高效的方

简述蓖麻毒蛋白的临床表现

  中毒后数小时出现症状。早期有精神不振,恶心呕吐,腹痛、腹泻、便血;继则出现脱水、血压下降,休克嗜睡;严重者可出现抽搐、昏迷,牙关紧闭;最后因循环衰竭而死亡。少数病人可出现发烧、黄疸、便血、蛋白尿、无尿或血尿,终因酸中毒、尿毒症而死亡。该毒素易损伤肝、肾等实质器官,发生出血、变性、坏死病变。并能凝

蓖麻毒蛋白中毒的救治措施介绍

  立即用高锰酸钾或炭末混悬液洗胃,随继口服盐类泻药及高位灌肠等急救措施,以排出未被吸收之毒物。  口服乳汁、鸡蛋清及阿拉伯胶,以保护胃粘膜。如出现昏迷、嗜睡等症状时,可皮下注射可拉明、樟脑磺酸钠等,必要时可用洋地黄制剂。如因大量呕吐、严重腹泻而失水时,应及时大量静滴5%葡萄糖生理盐水或低分子右旋糖

凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量实验_凝胶过滤层析法

凝胶过滤也称排阻层析、分子筛层析和凝胶层析。本实验目的是了解凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量的基本原理,巩固柱层析的操作方法。实验方法原理凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Ch

相对分子质量的概念

相对分子质量(Relative molecular mass),是指化学式中各个原子的相对原子质量(Ar)的总和,用符号Mr表示,单位是1。对于聚合物而言,其相对分子量可达几万甚至几十万;相对分子质量最小的氧化物的化学式为H₂O。

蛋白-10kd-等于多少相对分子质量

蛋白质分子量的计算方法:氨基酸的平均分子量X氨基酸总的分子数(肽链数+肽键数)-18X脱水缩合的水分子数(和肽键数相等)

蛋白质相对分子质量大小是多少

一般来说,蛋白质的分子量需在8000以上。若分子量再小一些就属于多肽的范围了。

测定蛋白质相对分子质量最准确方法

1。根据化学组成测定最低分子量用化学分析方法测出蛋白质中某一微量元素的含量,并假设分子中只有一个这种元素的原子,就可以计算出蛋白质的最低分子量。2. 渗透压法当蛋白质浓度不大时,可用以下公式: M=RT/lim(∏/C) 其中R是气体常数(0.082),T是绝对温度,∏是渗透压(以大气压计),浓度单

蓖麻毒蛋白作为抗癌药物的介绍

  蓖麻毒蛋白(ricin)是一种植物毒蛋白,具有相当明显的抗肿瘤作用,它们能通过抑制蛋白质合成来杀死癌细胞。蓖麻毒蛋白抗癌机理主要是:它能强烈地抑制各种癌细胞的蛋白合成,中度抑制DNA的合成,而对RNA的抑制则较弱。 另一个重要的药理作用是:它具有很强的抗原性,可经各种途径进入机体,并可产生抗体和

凝胶过滤色谱柱

凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分

相对分子质量和质量分数怎样计算

考试的时候相对原子质量会在试卷上体现.相对分子质量即将相对原子质量乘以原子个数例:CO2(二氧化碳):12*1+16*2=12+32=44 求溶质质量分数即将溶质质量除以溶液质量乘以100% 例:100克氯化钠溶液中含10克氯化钠,求其质量分数. W%=10g/100g*100%=10% 求一个分子

SDSPAGE电泳测定蛋白质相对分子质量

实验目的了解SDS-PAGE垂直板型电泳法的基本原理及操作技术。学习并掌握SDS-PAGE法测定蛋白质相对分子量的技术。实验原理    SDS-PAGE电泳法,即十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳法,。1.在蛋白质混合样品中各蛋白质组分的迁移率主要取决于分子大小和形状以及所带电荷多少。2.在聚丙烯酰