蓖麻种子毒蛋白的高效凝胶过滤色谱分析
摘要:植物蓖麻种子的抽提液经sepharose 4 B 柱和sephadexG2100柱分离纯化,得到一种毒蛋白,利用光谱图和反相高效液相色谱来确认毒蛋白的纯度。根据标准相对分子质量曲线,得到它的相对分子质量并与SDS2PAGF (十一烷基磺酸钠2聚丙烯酰胺凝胶电泳)所得结果进行比较,用氨基酸自动分析仪测定了其氨基酸组成。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文
SDSPAGE电泳测定蛋白质相对分子质量
实验目的了解SDS-PAGE垂直板型电泳法的基本原理及操作技术。学习并掌握SDS-PAGE法测定蛋白质相对分子量的技术。实验原理 SDS-PAGE电泳法,即十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳法,。1.在蛋白质混合样品中各蛋白质组分的迁移率主要取决于分子大小和形状以及所带电荷多少。2.在聚丙烯酰
果胶的相对分子质量介绍
果胶的相对分子质量介于50~300ku之间,不同原料和工艺提取到的果胶的相对分子质量相差甚大。 凝胶法和高效体积排阻色谱法(High Performance Size Exclusion Chromatography,HPSEC)是测定果胶相对分子质量的主要方法。HPSEC测定较为准确,且结果信
凝胶过滤色谱与凝胶渗透色谱的区别
凝胶色谱以水为流动相的称作凝胶过滤色谱,以有机溶剂为流动相的,称作凝胶渗透色谱。
凝胶过滤色谱-与凝胶渗透色谱的区别
凝胶过滤色谱 与凝胶渗透色谱的区别是凝胶色谱以水为流动相的称作凝胶过滤色谱,以有机溶剂为流动相的,称作凝胶渗透色谱。
概述蓖麻毒蛋白在其他方面的应用
蓖麻毒蛋白分子能专一的与含有半乳糖末端残基的多糖或糖蛋白结合,根据亲和吸附的原理,蓖麻毒蛋白可用于分离纯化相应糖基的糖蛋白、糖脂和多糖;同时还可以用来研究细胞表面糖的分布,从而成为研究细胞膜的有效方法。此外,蓖麻毒蛋白是一种核糖体失活蛋白,它也是理论上研究核糖体结构和功能的重要工具。另外,李淑华
蛋白质的相对分子质量一般有多大
蛋白质是一种相对分子质量很大,变化范围也很大的生物分子,从几千到100万以上,比如:牛胰岛素相对分子质量5700,人的血红蛋白的相对分子质量则是64500。
分子筛(凝胶过滤层析)蛋白纯化系统的优缺点
那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下关于分子筛(凝胶过滤层析)蛋白纯化系统的优缺点: 分子筛定义: 分子筛层析,又称为凝胶过滤层析或体积排阻层析。分子筛层析是利用有一定孔径范围的多孔凝胶作为固定相,对混合物中各组分按分子大小进行分离的层析技术。具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖
葡聚糖凝胶层析(分子排阻层析或凝胶过滤)
【实验目的】1.掌握葡聚糖凝胶的特性及凝胶层析的原理。2.学习葡聚糖凝胶层析的基本操作技术。 【实验原理】 凝胶层析又称分子排阻层析或凝胶过滤,是以被分离物质的分子量差异为基础的一种层析分离技术,这一技术为纯化蛋白质等生物大分子提供了一种非常温和的分离方法。层析的固定相载体是凝胶颗粒,目前应
凝胶渗透色谱GPC/凝胶过滤色谱GFC基础知识
凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography, GPC)是1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定,而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物(聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开),优点是:保留时间短,
凝胶过滤色谱仪分类
凝胶过滤色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室凝胶过滤色谱仪和工业凝胶过滤色谱仪。2、按功能可分:分析型凝胶过滤色谱仪和制备型凝胶过滤色谱仪。3、按灵敏性可分:微量凝胶过滤色谱仪和痕量凝胶过滤色谱仪。4、按产地可分:国产凝胶过滤色谱仪和进口凝胶过滤色谱仪。5、按使用范围可分:专用型凝胶过滤色谱
凝胶过滤层析法测定蛋白质的分子量实验
实验方法原理 凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Chromatography ) 和凝胶层析( Gel Chromatography) 。凝胶一般是由葡聚糖的胶体
凝胶过滤层析法测定蛋白质的分子量实验
实验方法原理 凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Chromatography ) 和凝胶层析( Gel C
蓖麻毒中毒的临床表现
中毒后数小时出现症状。早期有精神不振,恶心呕吐,腹痛、腹泻、便血;继则出现脱水、血压下降,休克嗜睡;严重者可出现抽搐、昏迷,牙关紧闭;最后因循环衰竭而死亡。少数病人可出现发烧、黄疸、便血、蛋白尿、无尿或血尿,终因酸中毒、尿毒症而死亡。该毒素易损伤肝、肾等实质器官,发生出血、变性、坏死病变。并能凝集和
蛋白质纯化技术—凝胶过滤色谱法的介绍
凝胶过滤色谱法(gel-filtration chromatography, GFC)又称排阻色谱。凝胶是一类具有三维空间结构的多孔网状颗粒物质,如琼脂糖凝胶(sepharose)、葡聚糖凝胶(sephadex),将凝胶颗粒装入色谱柱中即可用于物质的分离。当被分离物质通过凝胶柱时,大于凝胶孔径的
关于壳聚糖的相对分子质量介绍
壳聚糖无味、无臭、无毒性,纯壳聚糖略带珍珠光泽。生物体中甲壳素的相对分子质量为1×106-2×106,经提取后甲壳素的相对分子质量约为3×105-7×105,由甲壳素制取壳聚糖相对分子质量则更低,约2×105-5×105。在制造过程中甲壳素与壳聚糖相对分子质量的大小,一般用粘度高低的数值来表示。
关于蓖麻毒蛋白在生物农药上的应用介绍
化学农药、化肥等化学制品对植物产品和人类生存环境的污染问题是亟待解决的重大课题,也是实现中国农业可持续发展的主要障碍之一。利用易降解、对作物安全的植物源杀虫剂代替有机杀虫剂被很多植物保护专家们认为是解决这一问题的良好途径。为此,开发和应用植物源农药已成为各国所追逐的目标。生物杀虫剂由于对人畜毒性
为什么超速离心可以测蛋白质的相对分子质量
用离心方法分离生物大分子和亚细胞物质的基本原理是根据它们在液体介质中或者沉降速度不同而形成不同的区带,或者它们的密度不同而停留在液体介质中不同的位置而把它们一一分开。前者是沉降速度法,应用该法时液体介质的最大密度要小于样品中最小颗粒的密度,离心时选用高转速和短时间;后者是沉降平衡法,应用该法时液体介
蛋白质凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(也叫分子筛)是利用具有多孔网状结构的颗粒的分子筛作用,根据被分离样品中各组分相对分子质量大小的差异进行分离的技术。 凝胶过滤层析(GF)法又称为排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖
根据质谱图怎么求出相对分子质量
可以先找母离子,之后通过二级MS的碎片离子进一步确认一般来说对后面的峰有可能是分子离子,要是这样的话,分子量就至个峰的值;
分子筛(凝胶过滤层析)的优缺点
分子筛定义分子筛层析,又称为凝胶过滤层析或体积排阻层析。分子筛层析是利用有一定孔径范围的多孔凝胶作为固定相,对混合物中各组分按分子大小进行分离的层析技术。具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。避开原因一:工艺放大困难分子筛层析无法遵循线性放大原则,即使遵
聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪凝胶总浓度与蛋白质相对......
聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的电泳技术。凝胶的三维网状结构具有分子筛效应,分子筛效应的大小取决于凝胶孔径大小与生物大分子大小的接近程度。凝胶总浓度不同,平均孔径不同,不同大小和形状的大分子通过筛孔时受到的阻力不同,加上大分子的电荷效应,使迁移率不同的大分子得以分离,广泛用
凝胶过滤色谱柱用于体积排阻层析
体积排阻,也叫凝胶过滤,根据物质尺寸大小的不同分离。如果分子的尺寸大于树脂的最大孔径,这种分子就不能进入树脂颗粒内部,它所经过的有效体积最小,最先从洗脱液中流出。而小分子能够进入树脂的孔道中,经过的有效体积比较大,从洗脱液中流出较晚,分子量越小,流出越晚。 体积排阻层析可以用于纯化的*步,按分子量
研究发现影响调控蓖麻种子发育的模块
近日,东北林业大学教授郑志民团队揭示了miR396b-GRF4通过影响生长素的生物合成,进而调控蓖麻种子发育的遗传调控基础。相关成果发表在Plant Physiology上。蓖麻是大戟科蓖麻属,多年生木本一年生草本植物,广泛分布于世界各地,具有耐干旱、耐盐碱、耐重金属污染等特性。作为重要的可再生能源
研究发现影响调控蓖麻种子发育的模块
近日,东北林业大学教授郑志民团队揭示了miR396b-GRF4通过影响生长素的生物合成,进而调控蓖麻种子发育的遗传调控基础。相关成果发表在Plant Physiology上。 蓖麻是大戟科蓖麻属,多年生木本一年生草本植物,广泛分布于世界各地,具有耐干旱、耐盐碱、耐重金属污染等特性。作为重要的可
凝胶层析法(凝胶过滤)脱盐和分离蛋白质2
(3)在开始收集洗脱液的同时检查蛋白质是否已开始流出。为此,由每支收集管中取出1滴溶液置于黑色比色磁盘中,加入1滴20%磺基水杨酸,若呈现白色絮状沉淀即证明已有蛋白质出现,直到检查不出白色沉淀时,停止收集洗脱液。(4)由经检查含有蛋白质的每管中,取1滴溶液,放置在白色比色盘孔中,加入1滴奈氏试剂,若
凝胶层析法(凝胶过滤)脱盐和分离蛋白质1
原理凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯化前均应除去,此过程称为“脱盐”(desalthing)。脱盐常用透析法和凝胶过滤法,这两种方法各有利弊。前者的优点是透析后析品终体积较小,但所需时间较长,且盐不易除尽;凝胶过滤法则能将盐除尽,所需时间
凝胶层析法(凝胶过滤)脱盐和分离蛋白质3
灌注凝胶时要求将均匀的凝胶一直加到所需柱床高度,不能时断时续,否则将出现分层或“纹路”等毛病。若中途出现这些现象,可以用玻璃棒将已形成的柱床逐步搅起,直至出毛病的部分再让凝胶重新沉降或继续加入搅匀的凝胶悬液。若在灌好胶后才发现“纹路”、分层等现象时,要重新装柱,以免影响层析效果。在做大型的凝胶柱时,
凝胶过滤(分子筛层析或凝胶层析)原理和实验方法
凝胶层析又称为分子筛层析或凝胶过滤。具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。以葡聚糖凝胶应用最广,商品名是sephadex型号很多,从G10到G200,它的主要应用范围是:①分级分离各种抗原与抗体;② 去掉复合物中的小分子物质。如除盐、荧光素和游离的放射
通过转录组分析鉴定风筝果种子油脂代谢基因
蓖麻油酸的脂肪酸链上含有一个羟基官能团,是一种特殊脂肪酸,具有粘度高、酸度低、耐高温、不易氧化、不易凝固等特点,在500~600℃高温下不变质、不燃烧,零下18℃ 的低温下不凝固等特殊性能。利用蓖麻油生成的化学衍生物已达3000多种,广泛应用于国防、航空、航天、化工医药和机械制造等,是目前能替代
蛋白质技术专题:凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验方法蛋白质的凝胶过滤