尿海藻糖酶定量测定的技术要点
1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重组海藻糖酶的制备 国外采用标准9-甲氧羰基荧光素固相合成法合成氨基酸残基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色谱法（HPLC）分析并提纯多肽。HPLC主要是根据分子的亲水性（反相）和电荷（离子交换）方面的差别来实现样品的分离的。反相HPLC的优点是分辨率大。利用分子生物学方法表达出的重组人海藻糖酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化后也可以作为一种免疫原。 2. 抗海藻糖酶单克隆抗体的制备 通过腹腔注射加佐剂的重组蛋白或合成的多肽来免疫8周龄的雌性小鼠BALB/c，第一次免疫问隔两周后，每周连续注射3-4次。最后一次注射后3-4天杀死小鼠，用改良的Kohler和Milstein方法将脾细胞与B细胞瘤株P3-X63-Ag8融合。细胞融合产生8种杂交瘤克隆株：KM2275、KM2276、KM2285-2290，单克隆抗体KM2275和KM2276是由重组......阅读全文
尿海藻糖酶定量测定的技术要点
1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重组海藻糖酶的制备 国外采用标准9-甲氧羰基荧光素固相合成法合成氨基酸残基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色谱法（HPLC）分析并提纯多肽。HPLC主要是根据分子的亲水性（反相）和电荷（离子交换）方面的差别来实现样
尿海藻糖酶定量测定的技术要点
1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重组海藻糖酶的制备国外采用标准9-甲氧羰基荧光素固相合成法合成氨基酸残基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色谱法（HPLC）分析并提纯多肽。HPLC主要是根据分子的亲水性（反相）和电荷（离子交换）方面的差别来实现样品的分离
尿海藻糖酶的测定方法
酶活性的测定1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。2. 步骤将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱，以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标
尿海藻糖酶的测定方法
一、酶活性的测定 1. 原理 利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。 2. 步骤 将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱，以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，将体积调整到1
尿海藻糖酶的酶含量的测定
1. 原理利用抗海藻糖酶单克隆抗体的夹心ELISA方法检测酶蛋白的含量。2. 步骤国外报导用重组海藻糖酶和人工合成的海藻糖酶多肽片段制备出抗人海藻糖酶的单克隆抗体，然后经过包被、封闭等步骤，用夹心ELISA方法测定出酶蛋白的浓度。3. 结果IshiharaR等用ELISA法测定健康组尿海藻糖酶蛋白的
尿海藻糖酶的酶活性的测定
1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。2. 步骤将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱，以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标本0.9mI
人工海藻糖酶多肽片段的合成和重组海藻糖酶的制备
国外采用标准9-甲氧羰基荧光素固相合成法合成氨基酸残基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色谱法（HPLC）分析并提纯多肽。HPLC主要是根据分子的亲水性（反相）和电荷（离子交换）方面的差别来实现样品的分离的。反相HPLC的优点是分辨率大。利用分子生物学方法
海藻糖酶的临床应用
急、慢性肾小球疾病慢性肾小球肾炎、肾病综合征和慢性肾衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有报道说，急性肾病综合征患者尿液NAG活性升高。这些作者得出结论：急性肾病综合征患者可能有肾小管损害。其他调查也显示NAG活性升高和肾病综合征的复发有关。尽管肾小管损害患者尿NAG活性比对照组高1.5-5倍，而ELI
海藻糖酶的理化特性
海藻糖酶是一种胞外酶，位于哺乳动物肾和小肠上皮细胞膜的刷状缘，国际酶学编号为EC3.2.1.28，属于水解酶类，它能催化水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，且底物作用是高度专一的。海藻糖酶的等电点为4.37，在正常体液pH7.4时带有大量负电荷。该酶已从哺乳动物，肾脏中提纯，经SDS-PAGE电泳显示
海藻糖酶的临床应用
急、慢性肾小球疾病慢性肾小球肾炎、肾病综合征和慢性肾衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有报道说，急性肾病综合征患者尿液NAG活性升高。这些作者得出结论：急性肾病综合征患者可能有肾小管损害。其他调查也显示NAG活性升高和肾病综合征的复发有关。尽管肾小管损害患者尿NAG活性比对照组高1.5-5倍，而ELI
海藻糖酶的特性介绍
理化特性 海藻糖酶是一种胞外酶，位于哺乳动物肾和小肠上皮细胞膜的刷状缘，国际酶学编号为EC3.2.1.28，属于水解酶类，它能催化水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，且底物作用是高度专一的。海藻糖酶的等电点为4.37，在正常体液pH7.4时带有大量负电荷。该酶已从哺乳动物，肾脏中提纯，经SDS-
海藻糖酶的理化特性
海藻糖酶是一种胞外酶，位于哺乳动物肾和小肠上皮细胞膜的刷状缘，国际酶学编号为EC3.2.1.28，属于水解酶类，它能催化水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，且底物作用是高度专一的。海藻糖酶的等电点为4.37，在正常体液pH7.4时带有大量负电荷。该酶已从哺乳动物，肾脏中提纯，经SDS-PAGE电泳显示
海藻糖酶的基本信息
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一种，对海藻糖有特异作用，水解后成为2个分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。广泛存在于细菌、霉菌、植物和动物中。在人，除肾脏、肠、肝脏、胆液和尿以外，在血浆α2-球蛋白部分中，也可检出其活性，特别是在肾脏中活性很强。
海藻糖酶的国内应用前景
近年来的研究发现，肾小管-间质损害是决定肾功能减退的主要因素，而近端肾小管的损害义是肾功能恶化的重要原因。早期发现肾小管损害是锰床诊断和治疗的关键，而尿海藻糖酶在肾近端小管损害方面具有早期、特异、灵敏的诊断价值，目前国内实验室尚未开展此项检测，临床应用前景很大。当前首要的工作是用分子生物学方法制
海藻糖酶的生物学特性
在肠道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作为能源被吸收利用，有报道，缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹泻，而肾海藻糖酶的功能目前还不清楚。有报道说，尿海藻糖酶活性升高与近端肾小管损害和某些种类的肾疾病有关。
关于海藻糖酶缺乏的基本介绍
海藻糖酶缺乏，是属于二糖酶缺乏症临床分类之一。本病又称双糖不耐受症，系指各种先天性或后天性疾病，使小肠黏膜刷状缘双糖酶缺乏，使双糖的消化、吸收发生障碍，进食含有双糖的食物时发生的一系列症状和体征。 海藻糖酶缺乏：正常人小肠黏膜内有多种二糖酶，如乳糖酶能将乳糖分解为半乳糖及葡萄糖；麦芽糖酶能将麦
关于海藻糖酶的临床应用介绍
急、慢性肾小球疾病 慢性肾小球肾炎、肾病综合征和慢性肾衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有报道说，急性肾病综合征患者尿液NAG活性升高。这些作者得出结论：急性肾病综合征患者可能有肾小管损害。其他调查也显示NAG活性升高和肾病综合征的复发有关。尽管肾小管损害患者尿NAG活性比对照组高1.5-5倍，
概述海藻糖酶缺乏的发病机制
婴儿因为遗传的因素可有蔗糖酶及异麦芽糖酶缺乏。蔗糖-异麦芽糖吸收不良的缺陷主要在蔗糖，而异麦芽糖缺陷是继发的。有研究显示该酶在细胞内的处理有缺陷，堆积在内质网内。酶复合物在高尔基复合体内被阻断，而改变了的酶却被转运至细胞表面。由于以上各种因素，这种单基因疾病可呈异质性。该酶基因定位于染色体3q，
海藻糖酶的生物学特性
在肠道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作为能源被吸收利用，有报道，缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹泻，而肾海藻糖酶的功能目前还不清楚。有报道说，尿海藻糖酶活性升高与近端肾小管损害和某些种类的肾疾病有关。
海藻糖酶的基本信息概述
通过抑制内源海藻糖酶水平来修饰海藻糖-6-磷酸水平从而调节代谢。 本发明在细胞代谢碳流调节领域内。已经发现导入细胞内糖类海藻糖-6-磷酸（T-6-P）有效来源的变化会诱导体内细胞、组织和器官的发育和/或组成的变化。这些变化可通过抑制内源海藻糖酶来诱导，该酶能够将海藻糖水解成两个葡萄糖组分。
海藻糖酶的基本信息介绍
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一种，对海藻糖有特异作用，水解后成为2个分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。广泛存在于细菌、霉菌、植物和动物中。在人，除肾脏、肠、肝脏、胆液和尿以外，在血浆α2-球蛋白部分中，也可检出其活性，特别是在肾脏中活性很强。
概述海藻糖酶缺乏的发－病机制
婴儿因为遗传的因素可有蔗糖酶及异麦芽糖酶缺乏。蔗糖-异麦芽糖吸收不良的缺陷主要在蔗糖，而异麦芽糖缺陷是继发的。有研究显示该酶在细胞内的处理有缺陷，堆积在内质网内。酶复合物在高尔基复合体内被阻断，而改变了的酶却被转运至细胞表面。由于以上各种因素，这种单基因疾病可呈异质性。该酶基因定位于染色体3q，
关于海藻糖酶缺乏的发病原因分析
正常人小肠黏膜内有多种二糖酶，如乳糖酶能将乳糖分解为半乳糖及葡萄糖；麦芽糖酶能将麦芽糖分解为葡萄糖及异麦芽糖；异麦芽糖酶能将异麦芽糖分解为两个分子的葡萄糖；蔗糖酶能分解蔗糖为葡萄糖及果糖；还有海藻糖酶能分解海藻糖为两个分子的葡萄糖。因为某些原因使二糖酶缺乏，从而二糖的消化吸收发生障碍导致腹泻。临
抗海藻糖酶单克隆抗体的制备
通过腹腔注射加佐剂的重组蛋白或合成的多肽来免疫8周龄的雌性小鼠BALB/c，第一次免疫问隔两周后，每周连续注射3-4次。最后一次注射后3-4天杀死小鼠，用改良的Kohler和Milstein方法将脾细胞与B细胞瘤株P3-X63-Ag8融合。细胞融合产生8种杂交瘤克隆株：KM2275、KM2276、K
海藻糖酶的基本信息及分布情况
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一种，对海藻糖有特异作用，水解后成为2个分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。广泛存在于细菌、霉菌、植物和动物中。在人，除肾脏、肠、肝脏、胆液和尿以外，在血浆α2-球蛋白部分中，也可检出其活性，特别是在肾脏中活性很强。
荧光定量PCR实验的技术要点
1、 目的基因（DNA和mRNA）的查找和比对 从http://www.ncbi.nlm.nih.gov/网点的genbank中下载所需要的序列。下载的方式有两种：一为打开某个序列后，直接点击“save”，保存格式为“.txt”文件。保存的名称中要包括序列的物种、序列的亚型、序列的注册号。然后
昆虫海藻糖酶(trehalase)ELISA试剂盒简介
昆虫海藻糖酶(trehalase)ELISA试剂盒适用于检测人动植物组织匀浆、细胞上清、血清、血浆、尿液或其他相关生物液体中浓度。检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗体的微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色
尿β2－微球蛋白测定要点介绍
β2-MG 分子量小，可直接从肾小球滤过，但在近端小管可完全重吸收。尿β2-MG 异常，表明肾小管重吸收功能下降。恶性肿瘤患者由于血β2-MG 浓度显著增高，滤过量超过肾小管重吸收能力，也可使尿β2-MG浓度升高。尿内β2-MG 极不稳定，在偏酸环境中容易降解。因此，留取标本时应碱化尿液，确保结
荧光定量PCR要点
一、荧光定量PCR原理荧光定量PCR（Real-time PCR），是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团，通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。以探针法荧光定量PCR为例：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针两端
二糖酶缺乏症的症状体征
1.乳糖酶缺乏时，服牛奶或乳糖后可引起腹鸣、腹痛，或有绞痛，腹泻重者粪便呈水样，酸臭有泡沫。停服含乳糖的食物后症状消失。病人一般情况好，如无肠道手术历史一般无脂肪泻。蔗糖、异麦芽糖酶缺乏时，在服蔗糖及淀粉后引起腹泻，症状与乳糖酶缺乏相似。 2.临床分类 (1)先天性乳糖酶缺乏：婴儿出生后进食