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通过腹腔注射加佐剂的重组蛋白或合成的多肽来免疫8周龄的雌性小鼠BALB/c，第一次免疫问隔两周后，每周连续注射3-4次。最后一次注射后3-4天杀死小鼠，用改良的Kohler和Milstein方法将脾细胞与B细胞瘤株P3-X63-Ag8融合。细胞融合产生8种杂交瘤克隆株：KM2275、KM2276、KM2285-2290，单克隆抗体KM2275和KM2276是由重组海藻糖酶免疫产生的抗体，其他抗体是由合成多肽免疫产生的。抗体KM2275和KM2287与重组海藻糖酶和尿液中的海藻糖酶均有良好反应。......阅读全文
通过腹腔注射加佐剂的重组蛋白或合成的多肽来免疫8周龄的雌性小鼠BALB/c，第一次免疫问隔两周后，每周连续注射3-4次。最后一次注射后3-4天杀死小鼠，用改良的Kohler和Milstein方法将脾细胞与B细胞瘤株P3-X63-Ag8融合。细胞融合产生8种杂交瘤克隆株：KM2275、KM2276、K
国外采用标准9-甲氧羰基荧光素固相合成法合成氨基酸残基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色谱法（HPLC）分析并提纯多肽。HPLC主要是根据分子的亲水性（反相）和电荷（离子交换）方面的差别来实现样品的分离的。反相HPLC的优点是分辨率大。利用分子生物学方法
海藻糖酶是一种胞外酶，位于哺乳动物肾和小肠上皮细胞膜的刷状缘，国际酶学编号为EC3.2.1.28，属于水解酶类，它能催化水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，且底物作用是高度专一的。海藻糖酶的等电点为4.37，在正常体液pH7.4时带有大量负电荷。该酶已从哺乳动物，肾脏中提纯，经SDS-PAGE电泳显示
急、慢性肾小球疾病慢性肾小球肾炎、肾病综合征和慢性肾衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有报道说，急性肾病综合征患者尿液NAG活性升高。这些作者得出结论：急性肾病综合征患者可能有肾小管损害。其他调查也显示NAG活性升高和肾病综合征的复发有关。尽管肾小管损害患者尿NAG活性比对照组高1.5-5倍，而ELI
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一种，对海藻糖有特异作用，水解后成为2个分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。广泛存在于细菌、霉菌、植物和动物中。在人，除肾脏、肠、肝脏、胆液和尿以外，在血浆α2-球蛋白部分中，也可检出其活性，特别是在肾脏中活性很强。
1. 原理利用抗海藻糖酶单克隆抗体的夹心ELISA方法检测酶蛋白的含量。2. 步骤国外报导用重组海藻糖酶和人工合成的海藻糖酶多肽片段制备出抗人海藻糖酶的单克隆抗体，然后经过包被、封闭等步骤，用夹心ELISA方法测定出酶蛋白的浓度。3. 结果IshiharaR等用ELISA法测定健康组尿海藻糖酶蛋白的
在肠道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作为能源被吸收利用，有报道，缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹泻，而肾海藻糖酶的功能目前还不清楚。有报道说，尿海藻糖酶活性升高与近端肾小管损害和某些种类的肾疾病有关。
1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖，然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。2. 步骤将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱，以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标本0.9mI
昆虫海藻糖酶(trehalase)ELISA试剂盒适用于检测人动植物组织匀浆、细胞上清、血清、血浆、尿液或其他相关生物液体中浓度。检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗体的微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色
基本方案 实验方法原理 实验材料 融合