化学发光探针技术的操作

利用化学发光杂交保护分析的原理检测空肠弯曲菌、单核细胞增生性李斯特氏菌、大肠杆菌O157和金黄色葡萄球菌4种致病菌特异性RNA序列,这种方法无需物理分离,利用吖啶酯标记DNA探针,通过核酸杂交保护分析法,即应用人工合成的靶DNA保守区的寡 核苷酸,在合成时引入一个烷氨基的手臂,经活化后接上吖啶酯,制成化学发光探针。 杂交后无需分离步骤,而是利用差分水解来鉴别,即加入碱性溶液,游离的发光探针遇碱水解失去发光特性,而与特异性目的片段结合的探针形成DNA-RNA杂交体,由于吖啶酯是平面结构很容易进入双螺旋的内部而获得杂交保护,水解速度缓慢(半衰期达10分钟以上),仍有发光性能,可以在发光仪上显示化学发光信号,从而实现对病原菌的检测。......阅读全文

化学发光探针技术的操作

  利用化学发光杂交保护分析的原理检测空肠弯曲菌、单核细胞增生性李斯特氏菌、大肠杆菌O157和金黄色葡萄球菌4种致病菌特异性RNA序列,这种方法无需物理分离,利用吖啶酯标记DNA探针,通过核酸杂交保护分析法,即应用人工合成的靶DNA保守区的寡 核苷酸,在合成时引入一个烷氨基的手臂,经活化后接上吖啶酯

化学发光探针技术的原理

  化学发光探针技术的原理是互补的 核酸单链会特异性识别并结合成稳定的双链复合物。这一检测系统利用一个标记有化学发光物的单链DNA探针,可以特异性的识别和结合目标微生物的核糖体RNA。微生物中的核糖体 RNA释放出来后,化学发光标记的 DNA探针就与之结合形成稳定的DNA-RNA杂合体。标记的DNA

化学发光探针技术的应用优势

  化学发光探针技术可在30分钟内快速确定 病原体,并可直接于固体或液体培养基上鉴定目标微生物。该方法可直接应用于国外生产的LEADER 50i检测仪上,仪器自动注入检测试剂,立刻测量标记物所产生化学反应的化学发光强度,并自动计算结果及打印报告,该检测方法敏感性高,特异性强,检测成本低,操作简便、快

化学发光探针检测技术速查病原菌

  吉林检验检疫局建立的金标法检测单核细胞增生性李斯特氏菌技术作为当今检测病原体和诊断疾病方面最为敏感的免疫学技术之一,不仅操作简便、快速、特异,更为重要的是适用于广大基层食品监管部门的现场检测和诊断,这些特点都是其他免疫学方法所无法比拟的。  该技术不仅具有巨大的发展潜力,而且还具

地高辛标记探针的化学发光检测实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 抗体实验步骤 1.  用地髙辛标记探针与带DNA或RNA印迹的正电荷尼龙膜杂交。 2.  根据厂商的推荐条件,封闭和结合抗体。3.  对X光片曝光约20 min。

地高辛标记探针的化学发光检测实验

化学发光法             实验材料 DNA 试剂、试剂盒

地高辛标记探针的化学发光检测实验

地高辛系统是过提供的另一种非同位素标记方法,其检测方法是通过偶联上一种或数种荧光染料或酶的抗地高辛抗体,或用间接免疫荧光来测定。实验材料DNA试剂、试剂盒抗体实验步骤1.  用地髙辛标记探针与带DNA或RNA印迹的正电荷尼龙膜杂交。 2.  根据厂商的推荐条件,封闭和结合抗体。3.  对X光片曝光约

AFM探针的操作模式

随着AFM技术的发展,各种新应用不断涌现。具体包括如下技术:(1) 接触模式 (contact mode) 最早的模式,探针和样品直接接触,探针容易磨损,因此要求探针较软,即悬臂的弹性系数小,一般小于1N/m。(2) 轻敲模式 (tapping mode) 也叫Dynamic Force或者Inte

AFM探针的操作模式

随着AFM技术的发展,各种新应用不断涌现。具体包括如下技术:(1) 接触模式 (contact mode) 最早的模式,探针和样品直接接触,探针容易磨损,因此要求探针较软,即悬臂的弹性系数小,一般小于1N/m。(2) 轻敲模式 (tapping mode) 也叫Dynamic Force或者Inte

TaqMan探针法的操作

在之前发表的文章《实时荧光定量PCR检测方法,你选对了吗?》中提到,实时荧光定量PCR常用的方法包括了SYBR Green染料法、TaqMan探针法、分子信标、荧光共振能量传递(FRET)和LUX Primers等。那么应用最为广泛的则是SYBR Green染料法和TaqMan探针法,两者各

化学发光技术

放射免疫分析法有很高的灵敏度,但存在着放射性防护和同位素污染等问题。近年来,许多非放射性同位素标记的免疫分析方法相继出现。其中,在化学发光反应及抗原-抗体特异性识别基础上建立起来的一种新的非放射免疫分析技术--化学发光免疫分析法,由于这种方法具有灵敏度高,特异性强,精密度好,线性范围宽,仪器设备简单

化学发光实验的操作步骤

1、将A和B两种试剂在保鲜膜上等体积混合;1min后,将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触;1min后,将膜移至另一保鲜膜上,去尽残液,包好,放入X-光片夹中。2、在暗室中,将1×显影液和定影液分别倒入塑料盘中;在红灯下取出X-光片,用切纸刀剪裁适当大小(比膜的长和宽均需大1cm);打开X-光片夹,把X

化学发光实验的操作步骤

1、将A和B两种试剂在保鲜膜上等体积混合;1min后,将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触;1min后,将膜移至另一保鲜膜上,去尽残液,包好,放入X-光片夹中。2、在暗室中,将1×显影液和定影液分别倒入塑料盘中;在红灯下取出X-光片,用切纸刀剪裁适当大小(比膜的长和宽均需大1cm);打开X-光片夹,把X

荧光探针技术的概念

受到激发光激发后,从激发态单重态回到基态,在紫外-可见-近红外区有特征发光,称之为荧光。荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子,被称为荧光探针。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针,可以根据探针尺寸分为

“DNA探针”的技术依据

DNA探针根据其来源分为3种:一种来源于基因组中的基因本身,称为基因组探针(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一种是从相应的基因经转录获得mRNA,再通过逆转录得到的探针,称为cDNA探针(cDNA probe);此外,还可在体外人工合成20~50个碱基的与基

生物素酰化探针的检测实验——化学发光法

实验材料DNA试剂、试剂盒生物素磷酸酶仪器、耗材紫外灯离心机实验步骤1.  用夹子固定已转印的尼龙膜的边角于一小片干的吸水纸上,样品面朝上,放进温箱内12~80℃放15~30 min 或温室晾干过夜。 2.  将带核酸的面朝上暴露于紫外灯下,用最适的时间交联。3.  用生物素探针与膜杂交,用适当强度

西南大学发明高效电致化学发光信号探针

  贵金属(Au、Ag、Pt等)纳米簇通常指的是由几个到约一百个原子组成的分子聚集体,具有生物相容性好、超小尺寸(<2 nm)、优异的光电性质、易于标记等特点,是极具应用潜力的新一代ECL探针,尤其是在生物传感和生物成像方面。然而,金属纳米簇的超小尺寸限制了其进一步的分离、纯化和固定;同时,金属纳米

RNA探针技术简介

许多载体如pBluescript, pGEM等均带有来自噬菌体SP6或E.coli噬菌体T7或T3的启动子,它们能特异性地被各自噬菌体编码的依赖于DNA的RNA聚合酶所识别,合成特异性的RNA。在反应体系中若加入经标记的NTP,则可合成RNA探针。RNA探针一般都是单链,它具有单链DNA探针的优点,

化学发光定氮仪的化学发光技术解析

  电化学发光是通过对电极施加一定的电压进行电化学反应而发光,通过测量化学发光光谱和强度来测定物质含量的一种痕量分析方法。它将电分析化学手段和化学发光方法相结合,具有独特的优点,如重现性和灵敏度进一步提高,在多种组份同时存在时,可施加不同波形、不同电压的信号进行选择性测量等,是潜在的分析手段之一。化

探针台操作点针工作站操作

  一.探针台操作步骤:  1.将测试产品放入探针台的台盘上;  2. 打开显微镜光源灯(LED或光源机);  3.打开背光面板光源开关;  4.调整Z axis高度对焦,使能清楚看到样品图象为OK;  5.调整目镜和Zoom倍率,使影像清晰;  二.点针操作步骤:  1. 通过移动镜头组部分找到S

DNA探针的技术优势

①DNA探针多克隆在质粒载体中,制备方法简便;②DNA探针相对RNA探针(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探针的标记方法较成熟,可用同位素或非同位素标记,有多种方法可供选择。

RNA探针技术的应用介绍

这类RNA探针主要用于研究目的,而不是用于检测。例如,在筛选逆转录病毒人类免疫缺陷病毒(HIV)的基因组DNA克隆时,因无DNA探针可利用,就利用HIV的全套标记mRNA作为探针,成功地筛选到多株HIV基因组DNA克隆。又如进行中的转录分析(nuclear run on transcrip-tion

常见RNA探针的技术特点

cRNA探针:是以cDNA为模板,通过体外转录而获得的。因为它是一种单链探针,因此也避免了应用双链cDNA探针做杂交反应时存在的两条之间的复性问题。cRNA与RNA之间形成的杂交体要比cDNA-RNA杂交体稳定。cRNA-RNA之间形成的杂交体不受RNA酶的影响。因此杂交反应后可用RNA酶处理,以除

DAN探针检测的技术原理

DNA 或 RNA 片段能识别特定序列基因的 DNA 片段,能与互补的核苷酸序列特异结合,这种用同位素或非同位素标记的单链 DNA 片段即为核酸探针。核酸探针技术是将双链 DNA 经加热或碱处理,使碱基对间的氢链被破坏而变性,解开成两条互补的单链。它们在一定温度和中性盐溶液条件下,又可按 A-T、G

LEADER-50i基因探针化学发光检测仪

  配套试剂盒   一、概述   LEADER 50i是一台基因探针化学发光检测仪。该仪器利用分子生物学原理,采用基因探针方法确认鉴定待测微生物,30分钟即可快速确定,并可直接于从固体或液体培养基上鉴定目标微生物。仪器自动注入检测试剂,立刻测量标记物所产生化学反应的化学发光强度,并自动计算结果及

LEADER-50i基因探针化学发光检测仪

  一、概述   LEADER 50i是一台基因探针化学发光检测仪。该仪器利用分子生物学原理,采用基因探针方法确认鉴定待测微生物,30分钟即可快速确定,并可直接于从固体或液体培养基上鉴定目标微生物。仪器自动注入检测试剂,立刻测量标记物所产生化学反应的化学发光强度,并自动计算结果及打印报告。   

LEADER-50i基因探针化学发光检测仪

  配套试剂盒   一、概述   LEADER 50i是一台基因探针化学发光检测仪。该仪器利用分子生物学原理,采用基因探针方法确认鉴定待测微生物,30分钟即可快速确定,并可直接于从固体或液体培养基上鉴定目标微生物。仪器自动注入检测试剂,立刻测量标记物所产生化学反应的化学发光强度,并自动计算结果及

底物化学发光操作注意

1. 试剂每个批号均独立优化,请不要混用或稀释试剂以免降低敏感性;2. 加入一抗后膜不能再干燥;3. 适当地封闭和洗涤膜片至关重要;4. 使用前配置化学发光试剂,配置足够覆盖膜片即可,弃去使用过的混合试剂;5. 使用干净取样头取用每种试剂;6. 第一张片子建议曝光1分钟,观察结果后判断最佳曝光时间可

化学发光技术趋势分析

导语从市场份额上看,罗氏、雅培等IVD巨头由于技术优势和先发优势占据了我国大部分化学发光市场,仅前四大巨头就占据了80%以上的市场,而国产厂商只占整个化学发光市场的10%出头。我国化学发光技术起步较晚,早期以板式为主,市场占有率前三的国产品牌分别是安图、科美和新波。▌免疫技术发展迅速,成长为份额最大

磁微粒化学发光技术

一、化学发光免疫分析技术概述化学发光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA)兴起于上世纪70年代中期,发展至今已经成为一种成熟先进的超微量活性物质检测技术,应用范围十分广泛。该技术近10年发展迅猛,是目前推广应用最快的免疫分析方法,也是目前最先进的标记免疫测定技