双缩脲反应的作用
双缩脲反应通常是用以测量肽和蛋白质的种颜色反应:一般含两个或更多肽键的化合物即可与碱性CuSO4溶液生成紫红色或蓝紫色的复合物,称为双缩脲反应。利用这个反应可测定蛋白质的含量。应用双缩脲反应、红外光谱分析及X线衍射法等均可证明蛋白质分子中肽键的存在,蛋白质分子中的多肽链可被酸、碱或蛋白酶水解成为氨基酸或分子较小的肽段,此方法在研究蛋白质的一级结构时常被采用。......阅读全文
双缩脲反应的作用
双缩脲反应通常是用以测量肽和蛋白质的种颜色反应:一般含两个或更多肽键的化合物即可与碱性CuSO4溶液生成紫红色或蓝紫色的复合物,称为双缩脲反应。利用这个反应可测定蛋白质的含量。应用双缩脲反应、红外光谱分析及X线衍射法等均可证明蛋白质分子中肽键的存在,蛋白质分子中的多肽链可被酸、碱或蛋白酶水解成为氨基
双缩脲反应的概念
双缩脲反应是肽和蛋白质所特有的,而为氨基酸所没有的一种颜色反应。一般分子中含有两个氨基甲酰基(即肽键:-CO-NH-)的化合物与碱性溶液作用,生成紫色或者蓝紫色的络合物。
双缩脲反应的简介
两分子尿素(NH2-CO-NH2)加热至180℃左右生成双缩脲(NH2-CO-NH-CO-NH2)并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与Cu2+结合生成紫红色配合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中有肽键,其结构与双缩脲相似,也能发生此反应。可用于蛋白质的定性或定量测定。任何蛋白质或者蛋白质水
双缩脲反应的配制双缩脲试剂的注意事项
双缩脲试剂由NaOH溶液(0.1g/mL)和CuSO4溶液(0.01g/mL)配制而成,配制比例为5:1。但是双缩脲试剂不用现配现用,先加入NaoH营造碱性环境,再加入CuSO4。这是与斐林试剂不同的地方。
什么是双缩脲反应?
双缩脲反应是肽和蛋白质所特有的,而为氨基酸所没有的一种颜色反应。一般分子中含有两个氨基甲酰基(即肽键:-CO-NH-)的化合物与碱性溶液作用,生成紫色或者蓝紫色的络合物。
双缩脲反应的操作特点
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应,且颜色深浅与蛋白质的含量的关系在一定范围内符合比尔定律,而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关,故可用双缩脲法测定蛋白质的含量(借助分光光度计可减小误差)。双缩脲反应主要涉及肽键,因此受蛋白质特异性影响较小。且使
双缩脲反应的基本内容介绍
双缩脲反应是肽和蛋白质所特有的,而为氨基酸所没有的一种颜色反应。一般分子中含有两个氨基甲酪基(即肽键:-CO-NH-)的化合物与碱性溶液作用,生成紫色或者蓝紫色的络合物。 在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)与铜离子(Cu2+)作用,形成紫红色络合物(该物质的分子结
双缩脲反应的定义和表现式
在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H₂NOC-NH-CONH₂)与铜离子(Cu²⁺)作用,形成紫红色络合物(该物质的分子结构式见图),该反应即双缩脲反应。铜溶液作用,就会形成紫色或蓝紫色络合物。注:除-CO-NH-有此反应外,酰胺基(-CO-NH₂)、亚甲基(-CH₂-)、亚氨基(-NH-)、(-C
双缩脲试剂用法
双缩脲试剂: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液). 用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀.如待测中存在蛋白质,则呈现紫色.
双缩脲试剂是什么配制的
先将双缩脲试剂A加入组织样液,振荡均匀(必须营造碱性环境),再加入双缩脲试剂B,摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。 双缩脲(NH
双缩脲法的试验原理简介
双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能够以一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成
关于双缩脲反应的鉴定相关内容介绍
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应,且颜色深浅与蛋白质的含量的关系在一定范围内符合比尔定律,而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关,故可用双缩脲法测定蛋白质的含量(借助分光光度计可减小误差)。 双缩脲反应主要涉及肽键,因此受蛋白质特异性影响较
关于双缩脲法的名词解释
双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。 双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜,而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境,因此它可被其他碱,如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾,可延长试剂的使用寿命。
简述双缩脲法的操作方法
1、标准曲线的测定:取12支试管分两组,分别加入0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升的标准蛋白质溶液,用水补足到1毫升,然后加入4毫升双缩脲试剂。充分摇匀后,在室温(20~25℃)下放置30分钟,于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值
双缩脲法血清总蛋白测定实验
实验方法原理 凡分子中含有两个甲酰胺基(-CONH2-)的化合物都能与碱性铜溶液作用,形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健(-CONH2-)都能起此反应,而且各种血浆蛋白显色程度基本相同.实验步骤 一、实验操作:按表进行混匀,置25℃30min。(37℃10min)在波长540
双缩脲法血清总蛋白测定实验
实验方法原理凡分子中含有两个甲酰胺基(-CONH2-)的化合物都能与碱性铜溶液作用,形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健(-CONH2-)都能起此反应,而且各种血浆蛋白显色程度基本相同.实验步骤一、实验操作:按表进行混匀,置25℃30min。(37℃10min)在波长540nm
蛋白质浓度测定(双缩脲法)
实验概要1.掌握本实验方法的原理和操作2.掌握标准工作(A—C)曲线的制作3.熟悉蛋白质定量测定的几种常用方法实验原理测定蛋白质的定量方法有很多,目前常用的有凯氏定氮法;比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法;紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法:在碱性溶液中,双缩脲(H2N
蛋白质浓度测定(双缩脲法)
实验原理测定蛋白质的定量方法有很多,目前常用的有凯氏定氮法;比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法;紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法:在碱性溶液中,双缩脲(H2N—CO—NH—CO—NH2)与二价铜离子作用形成紫红色的络合物,这一反应称双缩脲反应。凡分子中含二个或二个以上
斐林试剂和双缩脲试剂的对比
斐林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液(斐林试剂中还有酒石酸钾钠)和CuSO4溶液组成,但二者有如下三点不同:(1)溶液浓度不同CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05 g/mL;CuSO4溶液称为双缩脲试剂B,其浓度为0.01 g/mL。(2)使用原理不同斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下
关于双缩脲法的试验器材相关介绍
1. 试剂: (1)标准蛋白质溶液:用标准的结晶牛血清清蛋白(BSA)或标准酪蛋白,配制成10mg/ml的标准蛋白溶液,可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。如有需要,标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,计算出其纯度,再根据其纯度,称量配制成标准蛋白质溶液。
测量蛋白质的方法双缩脲法
当脲被小心地加热至150-160摄氏度时,可由两个分子间脱去一个氨分子而生成二缩脲,也叫双缩脲,双缩脲与碱及少量硫酸铜溶液作用生成紫红色的配合物,此反应称为双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有肽键,与双缩脲结构相似,故也能呈现此反应而生成紫红色配合物,在一定条件下其颜色深浅与蛋白质含量成正比,据此可用吸
斐林试剂和双缩脲试剂的对比
斐林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液(斐林试剂中还有酒石酸钾钠)和CuSO4溶液组成,但二者有如下三点不同: (1)溶液浓度不同 CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05 g/mL; CuSO4溶液称为双缩脲试剂B,其浓度为0.01 g/mL。 (2)使用原理不同 斐林试剂是新配
蛋白质定量检测方法——双缩脲法
双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋
蛋白质浓度测定(双缩脲法)实验
实验原理测定蛋白质的定量方法有很多,目前常用的有凯氏定氮法;比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法;紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法:在碱性溶液中,双缩脲(H2N—CO—NH—CO—NH2)与二价铜离子作用形成紫红色的络合物,这一反应称双缩脲反应。凡分子中含二个或二个以上
关于蛋白定量的分析方法双缩脲法的简介
双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反
双缩脲法皮尼克法测定蛋白质
1 原理: 双缩脲在碱性条件中,能与CuSO4结合成红紫色的络合物。pro分子中含有肽链与双缩脲结构相似,也呈此反应。本法直接用于测定像小麦粉等固体试样的pro含量。但作为铜的稳定剂,酒石酸钾钠比甘油好些。小麦粉中的pro能直接地一边抽出一边进行定量。 2 试剂 ⑴甘油作为稳定剂:取10m
蛋白质含量测定法双缩脲法
本法系依据蛋白质分子中含有的两个以上肽键在碱性溶液中与Cu2+形成紫红色络合物,在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。 本法快速、灵敏度低,测定范围通常可达1~10mg。本法干扰测定的物质主要有硫酸铵、三羟甲基氨基甲烷缓冲液
蛋白质浓度测定(双缩脲法)实验介绍
实验原理测定蛋白质的定量方法有很多,目前常用的有凯氏定氮法;比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法;紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法:在碱性溶液中,双缩脲(H2N—CO—NH—CO—NH2)与二价铜离子作用形成紫红色的络合物,这一反应称双缩脲反应。凡分子中含二个或二个以
怎样用双缩脲法测定蛋白质
(一)实验原理双缩脲(NH3CONHCONH3)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓
凯氏定氮仪与双缩脲法的比较分析
蛋白质是生命的物质基础,是有机大分子,是构成细胞的基本有机物,是生命活动的主要承担者。虽然蛋白质在副食中含量较高,且并不是我们每天热量的主要来源,但是我们却离不开蛋白质。由于蛋白质是直接参与人体生理活动的物质,是人体必需的营养物质,所以无论是在粮食、乳制品还是饮料中人们对蛋白质的要求都是十分高的。因